chap糖類藥物ppt課件-免費(fèi)閱讀
【正文】 ? 3．展開：展開室如需預(yù)先用展開劑飽和，將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開室的展開劑中，浸入展開劑的深度為距薄層板底邊 — （切勿將樣點(diǎn)浸入展開劑中），密封室蓋，等展開至規(guī)定距離（一般為 10— 15cm），取出薄層板，晾干。 ? 單糖標(biāo)準(zhǔn)品。用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣于薄層板上，一般為圓點(diǎn)，點(diǎn)樣基線距底邊 ，點(diǎn)樣直徑為 2— 4mm，點(diǎn)間距離約為 — ，點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況以不影響檢出為宜。 ? 展開劑 :正丁醇：乙酸乙酯：異丙醇：醋酸：乙醇：水：吡啶＝ 7： 20： 12： 7： 6： 6。合并多糖高峰部分，濃縮后透析，凍干，即得多糖級分。在濃縮液中加入 3倍體積的乙醇攪拌，沉淀為多糖和蛋白質(zhì)的混合物，此為粗多糖。 ? （二）多糖的純化 試劑和器材 一、試劑 平衡緩沖溶液： , PH=。 ? 有些粘多糖可用 水 或 鹽溶液 直接提取，但因大部粘多糖與蛋白質(zhì)結(jié)合于細(xì)胞中，因此需用 酶解法 或 堿解法 使糖 白質(zhì)間的結(jié)合鍵斷裂，促使 多糖釋放 ? ? 一般組織中存在 多種 粘多糖。 （ － ） 多糖的提取 提取多糖時，一般先需進(jìn)行 脫脂 ，以便多糖釋放。 多糖是非細(xì)胞毒物物質(zhì)，在細(xì)胞內(nèi)的存在方式有 游離型與結(jié)合型 兩種。 植物體內(nèi)含有 水解 多糖衍生物的 酶 ，必須 抑制或破壞酶 的作用后，才能制取 天然存在形式的多糖 。 ? 如在稀堿中仍不易溶出者，可加入 硼砂 ，對甘露聚糖、半乳聚糖等能形成 硼酸絡(luò)合物 的多糖，此法可得相當(dāng)純的物質(zhì)。 ? （ 2）酶解法 理想的 工具酶 是 專一性低 的、具有廣泛水解作用的 蛋白酶 。 三、 器材 DEAE Sepharose Fast Flow，旋轉(zhuǎn)真空蒸發(fā)儀，搖床，離心機(jī)，層析柱： 26 10 ? 操作方法 ? 一、
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