第十章蛋白質(zhì)和氨基酸的測(cè)定第一節(jié)概述-文庫(kù)吧
2025-09-07 11:38 本頁(yè)面
【正文】 ② 也可以用過量的標(biāo)準(zhǔn) H2SO4或標(biāo)準(zhǔn) HCl溶液吸收后再以標(biāo)準(zhǔn) NaOH滴定過量的酸 。 整個(gè)過程分三步：消化、蒸餾、吸收與滴定 1. 消化 總反應(yīng)式： 1加硫酸鉀 作為增溫劑，提高溶液沸點(diǎn)， 純硫酸沸點(diǎn) 340℃ ，加入硫酸鉀之后可以提高 至 400℃ 以上。也可加入硫酸鈉，氯化鉀等提 高沸點(diǎn)，但效果不如硫酸鉀。 2NH2（ CH2） 2COOH+13H2SO4 （ NH4） 2SO4+6CO2+12SO2+16H2O 一定要用濃硫酸 （ 98%） 2 加硫酸銅 作為催化劑。還可以作消化終點(diǎn)指示劑（做蒸餾時(shí)堿性指示劑）。還可以加氧化汞、汞（均有毒，價(jià)格貴）、硒粉、二氧化鈦。 3 加氧化劑 如雙氧水、次氯酸鉀等加速有機(jī) 物氧化速度。 儀器： 219頁(yè) 要防止爆沸。 另外：介紹“自動(dòng)回流消化儀” 2. 蒸餾 消化液 + 40%氫氧化鈉加熱蒸餾，放出氨氣。 3. 吸收與滴定 1用 4%硼酸吸收，用鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，指示劑用混合指示劑（甲基紅 — 溴甲基酚綠混合指示劑）國(guó)標(biāo)用亞甲基蘭 +甲基紅。 指示劑 紅色 綠色 紅色 （酸） （堿） （酸） 2 用過量的 H2SO4 或 HCl 標(biāo)準(zhǔn)溶液吸收，再用 NaOH 標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定過剩的酸液，用甲基紅指示劑。 吸收 滴定 ? 操作方法： 158頁(yè)，其中講“以奈氏試 劑”檢查氨是否全部蒸完， 以奈氏試劑 —— 〔 Nessler試劑， K2（ HgI4） 〕 檢驗(yàn) NH4+離子 ， 遇銨根 ， 離子析 出黃色或紅棕色沉淀 。 配制 方法 g KI + g HgCl2 溶于 70 毫升水 。 加 30毫升 4 mol/L氫氧化鈉 （ 或氫氧化鉀 ） 溶液 ， 必要時(shí)過濾 ， 并存于玻璃瓶中蓋緊口 。 方法 溶解 g HgI2 + KI 10 g于適量少許水，后加水稀釋至 50 ml,靜置后，取其澄清液，棄去沉淀，儲(chǔ)存于棕色瓶中。 ? 結(jié)果計(jì)算： 158頁(yè) 注意： F—— 氮換算為蛋白質(zhì)的系數(shù) ， 一般為 也可查表 。 ? 說明： ① 所用試劑溶液應(yīng)用無氨蒸餾水配制 。 ② 消化時(shí)不要用強(qiáng)火 ， 應(yīng)保持和緩沸騰 ， 以免粘貼在凱氏瓶?jī)?nèi)壁上的含氮化合物在無硫酸存在的情況下消化不完全而造成氮損失 。 ③ 消化時(shí)應(yīng)注意不時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)凱氏燒瓶，以便利用冷凝酸液將附在瓶壁上的固體殘?jiān)聪?，并促進(jìn)其消化完全。 ④ 樣品中若含脂肪較多時(shí)，消化過程中易產(chǎn)生大量泡沫，為防止泡沫溢出瓶外，在開始消化時(shí)應(yīng)用小火加熱，并時(shí)時(shí)搖動(dòng)；或者加入少量辛醇或液體石蠟或硅油消泡劑，并同時(shí)注意控
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