功能蛋白質(zhì)組學(xué)研究方法-文庫(kù)吧
2025-04-22 14:09 本頁(yè)面
【正文】 通過(guò)親合作用樣品中的某些蛋白質(zhì)被吸附到芯片的固相基質(zhì)表面上 ， 用緩沖液洗去芯片上的雜質(zhì)蛋白和其他污染物 ， 然后在芯片上 加 入 能 量 吸 收 分 子 （ energy absorbing molecular,EAM） ， 芯片干燥后 ， 在真空管中用激光轟擊 ， 蛋白質(zhì)在吸收能量后被解析發(fā)生離子化 ， 在電場(chǎng)力作用下脫離芯片表面 ， 被離子檢測(cè)器所檢測(cè) 。 檢測(cè)結(jié)果經(jīng)過(guò)軟件分析處理后 ， 可繪制出質(zhì)譜圖 ， 顯示相關(guān)蛋白質(zhì)的分子量 、 含量等信息 。 抗體芯片 抗體芯片主要研究在不同生理或病理狀態(tài)下蛋白質(zhì)水平的量變。微型化、集成化、高通量化是抗體芯片重要特點(diǎn)。 芯片上排列了許多已知蛋白質(zhì)的單克隆抗體，這些單克隆抗體對(duì)應(yīng)的蛋白質(zhì)（抗原）都是細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能上十分重要的蛋白，涉及信號(hào)傳導(dǎo)、腫瘤、細(xì)胞周期調(diào)控、細(xì)胞結(jié)構(gòu)、細(xì)胞凋亡等廣泛的領(lǐng)域。 抗體芯片檢測(cè)的結(jié)果不是蛋白質(zhì)的絕對(duì)含量而是目的蛋白質(zhì)在兩個(gè)樣品之間的相對(duì)峰度。 靶蛋白質(zhì)芯片 主要用于蛋白質(zhì)相互作用研究、蛋白表達(dá)研究和小分子蛋白結(jié)合研究。 靶蛋白質(zhì)的獲得： ； ； (如細(xì)菌、酵母等 )在芯片上原位表 達(dá)蛋白質(zhì)（ living芯片） 。 ，然后利用不依賴細(xì)胞 的體外蛋白表達(dá)系統(tǒng) ， 在原位合成靶蛋白 。 液相蛋白質(zhì)芯片 是一種新型的、高度靈活的多元蛋白質(zhì)研究平臺(tái)，可以適用于蛋白質(zhì)組研究、臨床研究和藥物研究中的各種蛋白質(zhì)分析。 ? 液相芯片體系由許多不同的小球體為主要基質(zhì)，每種小球體上固定有不同的探針?lè)肿?，將這些小球體懸浮于一個(gè)液相體系中，就構(gòu)成了一個(gè)液相蛋白質(zhì)芯片系統(tǒng)。在液相系統(tǒng)中，為了區(qū)分不同的探針，在球形基質(zhì)的制造過(guò)程當(dāng)中，摻入了兩種不同的紅色分類(lèi)熒光，根據(jù)這兩種紅色分類(lèi)熒光的比例不同 (色彩編號(hào) )，區(qū)分不同的探針。 ? 可同時(shí)固定各種蛋白質(zhì)、多肽、核酸等生物分子， 可以對(duì)同一個(gè)樣品中的多個(gè)不同的分子同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)。 噬菌體展示技術(shù) 自 1985年 Smith G
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