【正文】 號(hào) ： B/0 主題內(nèi)容 Rh（ D）血型鑒定 （鹽 水法） 生效日期： 20210211 第 9 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 3 + = 紅細(xì)胞凝集成數(shù)小塊，血 清尚清晰。 2 + = 紅細(xì)胞凝塊分散成許多小塊，見到游離紅細(xì)胞。 1 + = 肉眼可見大顆粒，周圍有較多游離紅細(xì)胞。 +/ = 鏡下可見數(shù)個(gè)紅細(xì)胞凝集在一起，周圍有很多游離紅細(xì)胞。 MF = 混合凝集外觀（ mixed field）是指鏡下可見少數(shù)紅細(xì)胞凝集，而極大多數(shù)紅細(xì)胞仍成分散分布。 — 表示陰性，鏡下未見凝集，紅細(xì)胞均勻分布。 。受檢者紅細(xì)胞 Rh（ D） 血型：陽性或陰性。出現(xiàn)陰性、弱陽性或結(jié)果不清楚時(shí)，進(jìn)行試管法試驗(yàn)。 法 1滴抗 D試劑。 1滴滴 2%5%紅細(xì)胞生理鹽水懸液于上述試管中，混勻。 32003400r/min離心 1530秒。 ，肉眼或顯微鏡觀察有無凝集現(xiàn)象。 ：凝集這為陽性反應(yīng)，反之為陰性反應(yīng)。報(bào)告方式同玻片法。 9 操作性能 快速簡(jiǎn)便，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好。 10超出范圍結(jié)果處理： 細(xì)胞自凝：在冬天氣溫較低時(shí)，某些病人血清中含有冷凝集素而導(dǎo)致假陽性；若有此懷疑，建議在最后滴入懸浮液時(shí)將試管立即置入 37℃水浴中， 輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)試管混勻，并在 30秒內(nèi)觀察結(jié)果。 5%為宜，過濃或過淡可使抗原抗體比例不適當(dāng)，反應(yīng)不明顯易誤判。 各種原因引起的紅細(xì)胞溶解，誤判為不凝集，部分溶血時(shí)，可溶性血型物質(zhì)中和了相應(yīng)的抗體。 11注意事項(xiàng) ，血清中有很多天然抗體存在，故不需作反定型試驗(yàn)。 ，因 Rh抗原抗體凝集反應(yīng)的凝集塊比較脆弱，觀察反應(yīng)結(jié)果，應(yīng)輕輕彈動(dòng)試管，不可用力搖動(dòng)。 ，用畢后應(yīng)放置冰箱保存，以免細(xì)菌污 染。 、滴管和玻片必須清潔干燥，防止溶血。 操作方法應(yīng)按規(guī)定，一般應(yīng)先加血清，然后再加紅細(xì)胞懸液，以便容易核實(shí)是否漏加血清。 成都市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 血庫 SOP 文件編號(hào)： CDEYLABXK CZ02 版本 /修訂號(hào) ： B/0 主題內(nèi)容 Rh（ D）血型鑒定 （鹽 水法） 生效日期： 20210211 第 10 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital IgM抗 D與相應(yīng)紅細(xì)胞的反應(yīng)溫度以 4oC為最強(qiáng)，但為了防止冷凝集現(xiàn)象的干擾，一般仍再室溫（ 20~24oC）內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)， 37oC可使反應(yīng)減弱。 ，速度不宜過快或過慢，以防假陽性或假陰性結(jié)果。 、繼發(fā)性凝固以及緡錢狀排列的區(qū)別。 、記錄，避免筆誤。 文獻(xiàn) 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部醫(yī)政司編，全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第二版） .南京：東南大學(xué)出版社， 1997， P89 成都市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 血庫 SOP 文件編號(hào)： CDEYLABXK CZ03 版本 /修訂號(hào) ： B/0 主題內(nèi)容 冰凍血漿解融操作規(guī)程 生效日期： 20210211 第 11 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 冰凍血漿解融操作規(guī)程 1 目的 融化新鮮冰凍血漿，使冰凍血漿從固態(tài)裝化解為液態(tài)狀，利于臨床輸注。 2 范圍 使用于本院輸血科 3 職責(zé) 發(fā)血、值班崗位完成 4 原理 KHR1型冰凍血漿解凍箱采用加熱箱、解凍箱、循環(huán)管路、儀器箱等組成的全自動(dòng)循環(huán)冰凍血漿系統(tǒng)，水在加熱箱內(nèi)被加熱至設(shè)定溫度，然后由循環(huán)泵送入解凍槽，冰凍血漿袋放在專用的不銹鋼解凍架中，水的流體靜壓力包住血漿袋，與冰凍血漿進(jìn)行熱交 換后再循環(huán)金加熱箱內(nèi)加熱。循環(huán)的水流既能加快冰凍血漿與水的熱交換，又能使冰凍血漿快速安全的溶解至適合人體輸入的溫度。由于加熱箱與解凍槽的分離，加熱管與周圍高溫不會(huì)破壞血漿的有效成分。 5 操作 ：按《 KHR1型冰凍血漿融化箱》使用說明書進(jìn)行安裝 ，連接進(jìn)水管、排水管 若顯示屏顯示“缺水”時(shí)，請(qǐng)采用人工加水，當(dāng)水位達(dá)到時(shí)，儀器會(huì)自動(dòng)進(jìn)入預(yù)溫狀態(tài)。 ： 時(shí)間設(shè)定，一 般設(shè)定 18 分鐘，通過按“ +”或“ ”來調(diào)整設(shè)定時(shí)間，在解凍中可調(diào)整。 ：將冰凍血漿裝入袋內(nèi)，再掛在解凍架上放妥當(dāng)，并用架上壓桿壓住，按確定。 6 保養(yǎng) 清洗：使用自來水自動(dòng)進(jìn)水的用戶，應(yīng)經(jīng)常清洗解凍箱，以確保箱體內(nèi)部清潔。具體方法：在圖 2狀態(tài)下，按動(dòng)“左右”鍵使“清洗”反顯，再按“確定”，及其進(jìn)入清洗狀態(tài)。此時(shí)應(yīng)接好進(jìn)水管和出水管，儀器清洗過程如下，先排空加熱箱中的水，再注入清水，開始循環(huán)，然后排空水，清洗完成時(shí)，儀器自動(dòng)返回到初始狀態(tài)，可根據(jù)用戶水質(zhì)的好壞，一般 成都市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 血庫 SOP 文件編號(hào)： CDEYLABXK CZ03 版本 /修訂號(hào) ： B/0 主題內(nèi)容 冰凍血漿解融操作規(guī)程 生效日期： 20210211 第 12 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 每周清洗 1至 2次。使用蒸餾水的用戶也必須每周清洗換水。 溫度效正：定時(shí)對(duì)水箱溫度進(jìn)行檢測(cè)，如發(fā)現(xiàn)實(shí)測(cè)溫度與顯示溫度相差 ，應(yīng)對(duì)解凍箱進(jìn)行校正。具體方法如下：在關(guān)機(jī)狀態(tài)下，按住面板上的“上下”檔開機(jī)，循環(huán)泵隨即打開，加熱箱內(nèi)的水上升至解凍槽內(nèi)，溫度窗口顯示即時(shí)水溫。用量程準(zhǔn)確的 050度分辨率為 ，經(jīng)觀察若顯示溫度與測(cè)量溫度不一致，可按溫度“ +， ”鍵若干次直至兩者溫度相同。最后按一次“確定”鍵確認(rèn)即完成效正。 7 注意事項(xiàng) ：注意經(jīng)常清洗解凍箱，以確保箱體內(nèi) 部到清潔，采用自動(dòng)進(jìn)水清洗。 ，沒半年對(duì)水溫測(cè)試是否與版面溫度顯示相同。 ，保證水溫正確。 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部醫(yī)政司編，全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第二版） .南京：東南大學(xué)出版社， 1997， 成都市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 血庫 SOP 文件編號(hào)： CDEYLABXK CZ04 版本 /修訂號(hào) ： B/0 主題內(nèi)容 交叉配血 （凝聚胺法） 生效日期： 20210211 第 13 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 交叉配血（凝聚胺法） ： 在臨床用血前將患者血清和血細(xì)胞分別與獻(xiàn)血員血細(xì)胞和血清進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)，以排除各種因素引起的輸血反應(yīng)（如凝集或溶血），保證用血安全。 ： 所有申請(qǐng)輸用全血及紅細(xì)胞懸液的標(biāo)本。 申請(qǐng)輸用手工血小板的 標(biāo)本。 ：輸血科主任負(fù)責(zé)對(duì)該標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程監(jiān)督執(zhí)行。 原理 凝聚胺是帶有高價(jià)陽離子的多聚季銨鹽 ,溶解后能產(chǎn)生大量正電荷，可以大量中和紅細(xì)胞表面的負(fù)電荷，減弱紅細(xì)胞之間的排斥力，使紅細(xì)胞彼此之間的距離縮小，出現(xiàn)正常紅細(xì)胞可逆性的非特異性凝集：低離子強(qiáng)度溶液降低了紅細(xì)胞的 Zeta 電位，進(jìn)一步增強(qiáng)抗原抗體間的引力，增強(qiáng)了血型抗體凝集紅細(xì)胞的能力。當(dāng)血清中存在 IgM或 IgG類血型抗體時(shí)，在上述條件下，與紅細(xì)胞緊密結(jié)合，出現(xiàn)特異性的凝集，此時(shí)加入枸櫞酸鹽解聚液（懸浮液）以消除凝聚胺的 正電荷，由 IgM或 IgG類血型抗體與紅細(xì)胞產(chǎn)生的凝集不會(huì)散開，如血清中不存在 IgM或 IgG類血型抗體，加入解聚液可使非特異性凝集解散。 . 標(biāo)本采集 標(biāo)本種類：新抽取的抗凝血 標(biāo)本要求： 抗凝劑： EDTA（濃度 15g/L）或枸櫞酸鈉（濃度 32g/L）抗凝 采血量：至少不低于 2ml 的靜脈血（加入試管后注意 與 抗凝劑混勻） 標(biāo)本采集要求 采血時(shí)，一定要認(rèn)真核對(duì)病室、床號(hào)和病人姓名，無誤后再抽血。 血標(biāo)本容 器要清潔干燥并事先貼好標(biāo)簽，加血標(biāo)本前要認(rèn)真核對(duì)、無誤后再將血液注入。 血標(biāo)本標(biāo)簽填寫必須與申請(qǐng)單上的病人姓名、科別、床號(hào)、編號(hào)完全一致。 采血者要在申請(qǐng)單和標(biāo)本標(biāo)簽上簽名，寫清采血時(shí)間，及時(shí)送檢。 采血時(shí)要防止溶血及多量組織液混入 （多發(fā)生在靜脈穿刺不順利勉強(qiáng)抽血時(shí)）在病人輸液時(shí)采集標(biāo)本，必須從未輸液的一側(cè)肢體抽取，絕不允許在輸液管接頭處采集。 ，應(yīng)事先采取血標(biāo)本作血型鑒定，填寫在輸血申請(qǐng)單上，以便核 成都市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 血庫 SOP 文件編號(hào)： CDEYLABXK CZ04 版本 /修訂號(hào) ： B/0 主題內(nèi)容 交叉配血 （凝聚胺法） 生效日期： 20210211 第 14 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 對(duì)。急診搶救輸血，未能事先采 血檢測(cè)血型，則要求注明急診字樣由專人核對(duì)、貼標(biāo)簽、采取血標(biāo)本送檢。 . 標(biāo)本儲(chǔ)存 待測(cè)標(biāo)本在 28℃ 下的保存時(shí)間為 72 小時(shí) ，已檢測(cè)標(biāo)本 28℃ 冰箱保存 7天。 . 標(biāo)本運(yùn)輸 室溫 運(yùn)輸 . 標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn) 溶血 、 受污染，或者含有凝塊的樣品。 。 . 試劑 試劑名稱： 凝聚胺介質(zhì)試劑 試劑生產(chǎn)廠家： 珠海貝索生物技術(shù)有限公司 試劑 組成 ： 低離子溶液，凝聚胺溶液，懸浮液 器 ： 802上海手術(shù)器械廠 ，以 3000r/min離心 3分鐘，分離上層受、供著血清或血漿，并在壓積紅細(xì)胞制成 5%受、供著紅細(xì)胞生理鹽水懸液。 2支小試管，標(biāo)明主側(cè)和次側(cè)，主側(cè)管加患者血清（血漿） 2滴，加供著 5%紅細(xì)胞生理鹽水懸液（洗滌或不洗滌均可） 1滴，次側(cè)管反之。 LISS液 ，再加凝聚胺液 2滴，混合均勻。 3400r/min離心 15秒，然后把上清液倒掉，不要瀝干，讓試管底殘留 。 ，目測(cè)紅細(xì)胞有無凝集，如無凝集，必須重做 。如有凝集，則進(jìn)行下一步。 2滴，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)試管混合并同時(shí)觀察結(jié)果。如果在 301min內(nèi)凝集散開，表示凝聚胺引起的非特異性聚集，配血結(jié)果相合 。如果凝集不散開，則為紅細(xì)胞抗原抗體結(jié)合的特異性反應(yīng)，配血結(jié)果不相合。如反應(yīng)可疑，可進(jìn)一步倒在玻片上用顯微鏡觀察。 如果主側(cè)管和次側(cè)管內(nèi)紅細(xì)胞凝集散開，則為凝集胺引起的非特異性，表示配血結(jié)果相合，可以輸用。 如果主側(cè)管和次側(cè)管或單獨(dú)一側(cè)管內(nèi)紅細(xì)胞凝集不散開，則為 抗原抗體結(jié)合的特異性反應(yīng)，表示配血結(jié)果不相合，禁忌輸用。 成都市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 血庫 SOP 文件編號(hào)： CDEYLABXK CZ04 版本 /修訂號(hào) ： B/0 主題內(nèi)容 交叉配血 （凝聚胺法） 生效日期： 20210211 第 15 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 7 注意事項(xiàng) 若受血者用血量大，需要 10個(gè)以上獻(xiàn)血員時(shí)，獻(xiàn)血員間也要進(jìn)行交叉配血。 ，因?yàn)榕溲嚬苤邪l(fā)生溶血現(xiàn)象，表明有抗原抗體反應(yīng)，同時(shí)還有補(bǔ)體參與，是配血結(jié)果的嚴(yán)重情況。 ，可影響配血結(jié)果的判斷。此時(shí)可在最后加懸浮液時(shí)，將試管立即放入 37℃水浴中，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)試管，并在 30秒內(nèi)觀察結(jié)果。 ，應(yīng)盡快觀察結(jié)果，以免反應(yīng)減弱或消失。 ，若患者血液標(biāo) 本中含有肝素，需多加幾滴凝聚胺溶液以中和肝素。 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部醫(yī)政司編，全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第二版） .南京：東南大學(xué)出版社， 1997， 成都市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 血庫 SOP 文件編號(hào)： CDEYLABXK CZ05 版本 /修訂號(hào) ： B/0 主題內(nèi)容 交叉配血 （微柱凝膠法） 生效日期： 20210211 第 16 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 交叉配血（微柱凝膠法） ： 在臨床用血前將患者血清和血細(xì)胞分別與獻(xiàn)血員血細(xì)胞和血清進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)，以排除各種因素引起的輸血反應(yīng)（如凝集或溶血），保證用血安全。 ： 所有申請(qǐng)輸用全血及紅細(xì)胞懸液的標(biāo)本。 申請(qǐng)輸用手工血小板的標(biāo)本。 ：輸血科主任負(fù)責(zé)對(duì)該標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程監(jiān)督執(zhí)行。 交叉配血就是將 患者血清和血細(xì)胞分別與獻(xiàn)血員血細(xì)胞和血清進(jìn)行主次測(cè)交叉配 試驗(yàn)，以排除各種因素引起的輸血反應(yīng)（如凝集或溶血），保證用血安全。 微柱凝膠檢測(cè)法是凝膠分子篩技術(shù)和免疫學(xué)抗原抗體反應(yīng)相結(jié)合的產(chǎn)物，通過調(diào)節(jié)凝膠（葡聚糖）的濃度，控制凝膠間隙大小，只允許游離紅細(xì)胞通過，從而達(dá)到分離游離紅細(xì)胞和凝集紅細(xì)胞的目的。如果紅細(xì)胞沉積在凝膠管底部，表明紅細(xì)胞未發(fā)生凝集，即凝集實(shí)驗(yàn)陰性；如果紅細(xì)胞聚集在凝膠上部或中部，表明紅細(xì)胞發(fā)生凝集，即凝集實(shí)驗(yàn)陽性。 標(biāo)本種類：新抽取的抗凝血 ： 抗凝劑： EDTA（濃度 15g/L）或枸櫞酸鈉（濃度 32g/L）抗凝 采血量：至少不低于 5ml的靜脈血（加入試管后注意 與 抗凝劑混勻） 離心要求：轉(zhuǎn)速必須大于 3500轉(zhuǎn) /分，時(shí)間必須大于 15分鐘 標(biāo)本采集要求 采血時(shí)，一定要認(rèn)真核對(duì)病室、