【正文】 號 ： B/0 主題內容 Rh（ D）血型鑒定 （鹽 水法） 生效日期： 20210211 第 9 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 3 + = 紅細胞凝集成數小塊，血 清尚清晰。 2 + = 紅細胞凝塊分散成許多小塊，見到游離紅細胞。 1 + = 肉眼可見大顆粒，周圍有較多游離紅細胞。 +/ = 鏡下可見數個紅細胞凝集在一起，周圍有很多游離紅細胞。 MF = 混合凝集外觀（ mixed field）是指鏡下可見少數紅細胞凝集，而極大多數紅細胞仍成分散分布。 — 表示陰性，鏡下未見凝集，紅細胞均勻分布。 。受檢者紅細胞 Rh（ D） 血型：陽性或陰性。出現陰性、弱陽性或結果不清楚時，進行試管法試驗。 法 1滴抗 D試劑。 1滴滴 2%5%紅細胞生理鹽水懸液于上述試管中，混勻。 32003400r/min離心 1530秒。 ，肉眼或顯微鏡觀察有無凝集現象。 ：凝集這為陽性反應，反之為陰性反應。報告方式同玻片法。 9 操作性能 快速簡便，特異性強，重復性好。 10超出范圍結果處理： 細胞自凝：在冬天氣溫較低時，某些病人血清中含有冷凝集素而導致假陽性；若有此懷疑，建議在最后滴入懸浮液時將試管立即置入 37℃水浴中， 輕輕轉動試管混勻，并在 30秒內觀察結果。 5%為宜，過濃或過淡可使抗原抗體比例不適當，反應不明顯易誤判。 各種原因引起的紅細胞溶解，誤判為不凝集，部分溶血時，可溶性血型物質中和了相應的抗體。 11注意事項 ，血清中有很多天然抗體存在，故不需作反定型試驗。 ，因 Rh抗原抗體凝集反應的凝集塊比較脆弱，觀察反應結果，應輕輕彈動試管，不可用力搖動。 ，用畢后應放置冰箱保存，以免細菌污 染。 、滴管和玻片必須清潔干燥，防止溶血。 操作方法應按規(guī)定，一般應先加血清，然后再加紅細胞懸液，以便容易核實是否漏加血清。 成都市第二人民醫(yī)院檢驗科 血庫 SOP 文件編號： CDEYLABXK CZ02 版本 /修訂號 ： B/0 主題內容 Rh（ D）血型鑒定 （鹽 水法） 生效日期： 20210211 第 10 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital IgM抗 D與相應紅細胞的反應溫度以 4oC為最強，但為了防止冷凝集現象的干擾，一般仍再室溫（ 20~24oC）內進行試驗， 37oC可使反應減弱。 ，速度不宜過快或過慢，以防假陽性或假陰性結果。 、繼發(fā)性凝固以及緡錢狀排列的區(qū)別。 、記錄，避免筆誤。 文獻 中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司編，全國臨床檢驗操作規(guī)程（第二版） .南京：東南大學出版社， 1997， P89 成都市第二人民醫(yī)院檢驗科 血庫 SOP 文件編號： CDEYLABXK CZ03 版本 /修訂號 ： B/0 主題內容 冰凍血漿解融操作規(guī)程 生效日期： 20210211 第 11 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 冰凍血漿解融操作規(guī)程 1 目的 融化新鮮冰凍血漿，使冰凍血漿從固態(tài)裝化解為液態(tài)狀，利于臨床輸注。 2 范圍 使用于本院輸血科 3 職責 發(fā)血、值班崗位完成 4 原理 KHR1型冰凍血漿解凍箱采用加熱箱、解凍箱、循環(huán)管路、儀器箱等組成的全自動循環(huán)冰凍血漿系統(tǒng)，水在加熱箱內被加熱至設定溫度，然后由循環(huán)泵送入解凍槽，冰凍血漿袋放在專用的不銹鋼解凍架中，水的流體靜壓力包住血漿袋，與冰凍血漿進行熱交 換后再循環(huán)金加熱箱內加熱。循環(huán)的水流既能加快冰凍血漿與水的熱交換，又能使冰凍血漿快速安全的溶解至適合人體輸入的溫度。由于加熱箱與解凍槽的分離，加熱管與周圍高溫不會破壞血漿的有效成分。 5 操作 ：按《 KHR1型冰凍血漿融化箱》使用說明書進行安裝 ，連接進水管、排水管 若顯示屏顯示“缺水”時，請采用人工加水，當水位達到時，儀器會自動進入預溫狀態(tài)。 ： 時間設定，一 般設定 18 分鐘，通過按“ +”或“ ”來調整設定時間，在解凍中可調整。 ：將冰凍血漿裝入袋內，再掛在解凍架上放妥當，并用架上壓桿壓住，按確定。 6 保養(yǎng) 清洗：使用自來水自動進水的用戶，應經常清洗解凍箱，以確保箱體內部清潔。具體方法：在圖 2狀態(tài)下，按動“左右”鍵使“清洗”反顯，再按“確定”，及其進入清洗狀態(tài)。此時應接好進水管和出水管，儀器清洗過程如下，先排空加熱箱中的水，再注入清水，開始循環(huán)，然后排空水，清洗完成時，儀器自動返回到初始狀態(tài)，可根據用戶水質的好壞，一般 成都市第二人民醫(yī)院檢驗科 血庫 SOP 文件編號： CDEYLABXK CZ03 版本 /修訂號 ： B/0 主題內容 冰凍血漿解融操作規(guī)程 生效日期： 20210211 第 12 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 每周清洗 1至 2次。使用蒸餾水的用戶也必須每周清洗換水。 溫度效正：定時對水箱溫度進行檢測，如發(fā)現實測溫度與顯示溫度相差 ，應對解凍箱進行校正。具體方法如下：在關機狀態(tài)下，按住面板上的“上下”檔開機，循環(huán)泵隨即打開，加熱箱內的水上升至解凍槽內，溫度窗口顯示即時水溫。用量程準確的 050度分辨率為 ，經觀察若顯示溫度與測量溫度不一致，可按溫度“ +， ”鍵若干次直至兩者溫度相同。最后按一次“確定”鍵確認即完成效正。 7 注意事項 ：注意經常清洗解凍箱，以確保箱體內 部到清潔，采用自動進水清洗。 ，沒半年對水溫測試是否與版面溫度顯示相同。 ，保證水溫正確。 中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司編，全國臨床檢驗操作規(guī)程（第二版） .南京：東南大學出版社， 1997， 成都市第二人民醫(yī)院檢驗科 血庫 SOP 文件編號： CDEYLABXK CZ04 版本 /修訂號 ： B/0 主題內容 交叉配血 （凝聚胺法） 生效日期： 20210211 第 13 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 交叉配血（凝聚胺法） ： 在臨床用血前將患者血清和血細胞分別與獻血員血細胞和血清進行交叉配血試驗，以排除各種因素引起的輸血反應（如凝集或溶血），保證用血安全。 ： 所有申請輸用全血及紅細胞懸液的標本。 申請輸用手工血小板的 標本。 ：輸血科主任負責對該標準化操作規(guī)程監(jiān)督執(zhí)行。 原理 凝聚胺是帶有高價陽離子的多聚季銨鹽 ,溶解后能產生大量正電荷，可以大量中和紅細胞表面的負電荷，減弱紅細胞之間的排斥力，使紅細胞彼此之間的距離縮小，出現正常紅細胞可逆性的非特異性凝集：低離子強度溶液降低了紅細胞的 Zeta 電位，進一步增強抗原抗體間的引力，增強了血型抗體凝集紅細胞的能力。當血清中存在 IgM或 IgG類血型抗體時，在上述條件下，與紅細胞緊密結合，出現特異性的凝集，此時加入枸櫞酸鹽解聚液（懸浮液）以消除凝聚胺的 正電荷，由 IgM或 IgG類血型抗體與紅細胞產生的凝集不會散開，如血清中不存在 IgM或 IgG類血型抗體，加入解聚液可使非特異性凝集解散。 . 標本采集 標本種類：新抽取的抗凝血 標本要求： 抗凝劑： EDTA（濃度 15g/L）或枸櫞酸鈉（濃度 32g/L）抗凝 采血量：至少不低于 2ml 的靜脈血（加入試管后注意 與 抗凝劑混勻） 標本采集要求 采血時，一定要認真核對病室、床號和病人姓名，無誤后再抽血。 血標本容 器要清潔干燥并事先貼好標簽，加血標本前要認真核對、無誤后再將血液注入。 血標本標簽填寫必須與申請單上的病人姓名、科別、床號、編號完全一致。 采血者要在申請單和標本標簽上簽名，寫清采血時間，及時送檢。 采血時要防止溶血及多量組織液混入 （多發(fā)生在靜脈穿刺不順利勉強抽血時）在病人輸液時采集標本，必須從未輸液的一側肢體抽取，絕不允許在輸液管接頭處采集。 ，應事先采取血標本作血型鑒定，填寫在輸血申請單上，以便核 成都市第二人民醫(yī)院檢驗科 血庫 SOP 文件編號： CDEYLABXK CZ04 版本 /修訂號 ： B/0 主題內容 交叉配血 （凝聚胺法） 生效日期： 20210211 第 14 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 對。急診搶救輸血，未能事先采 血檢測血型，則要求注明急診字樣由專人核對、貼標簽、采取血標本送檢。 . 標本儲存 待測標本在 28℃ 下的保存時間為 72 小時 ，已檢測標本 28℃ 冰箱保存 7天。 . 標本運輸 室溫 運輸 . 標本拒收標準 溶血 、 受污染，或者含有凝塊的樣品。 。 . 試劑 試劑名稱： 凝聚胺介質試劑 試劑生產廠家： 珠海貝索生物技術有限公司 試劑 組成 ： 低離子溶液，凝聚胺溶液，懸浮液 器 ： 802上海手術器械廠 ，以 3000r/min離心 3分鐘，分離上層受、供著血清或血漿，并在壓積紅細胞制成 5%受、供著紅細胞生理鹽水懸液。 2支小試管，標明主側和次側，主側管加患者血清（血漿） 2滴，加供著 5%紅細胞生理鹽水懸液（洗滌或不洗滌均可） 1滴，次側管反之。 LISS液 ，再加凝聚胺液 2滴，混合均勻。 3400r/min離心 15秒，然后把上清液倒掉，不要瀝干，讓試管底殘留 。 ，目測紅細胞有無凝集，如無凝集，必須重做 。如有凝集，則進行下一步。 2滴，輕輕轉動試管混合并同時觀察結果。如果在 301min內凝集散開，表示凝聚胺引起的非特異性聚集，配血結果相合 。如果凝集不散開，則為紅細胞抗原抗體結合的特異性反應，配血結果不相合。如反應可疑，可進一步倒在玻片上用顯微鏡觀察。 如果主側管和次側管內紅細胞凝集散開，則為凝集胺引起的非特異性，表示配血結果相合，可以輸用。 如果主側管和次側管或單獨一側管內紅細胞凝集不散開，則為 抗原抗體結合的特異性反應，表示配血結果不相合，禁忌輸用。 成都市第二人民醫(yī)院檢驗科 血庫 SOP 文件編號： CDEYLABXK CZ04 版本 /修訂號 ： B/0 主題內容 交叉配血 （凝聚胺法） 生效日期： 20210211 第 15 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 7 注意事項 若受血者用血量大，需要 10個以上獻血員時，獻血員間也要進行交叉配血。 ，因為配血試管中發(fā)生溶血現象，表明有抗原抗體反應，同時還有補體參與，是配血結果的嚴重情況。 ，可影響配血結果的判斷。此時可在最后加懸浮液時，將試管立即放入 37℃水浴中，輕輕轉動試管，并在 30秒內觀察結果。 ，應盡快觀察結果，以免反應減弱或消失。 ，若患者血液標 本中含有肝素，需多加幾滴凝聚胺溶液以中和肝素。 中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司編，全國臨床檢驗操作規(guī)程（第二版） .南京：東南大學出版社， 1997， 成都市第二人民醫(yī)院檢驗科 血庫 SOP 文件編號： CDEYLABXK CZ05 版本 /修訂號 ： B/0 主題內容 交叉配血 （微柱凝膠法） 生效日期： 20210211 第 16 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 交叉配血（微柱凝膠法） ： 在臨床用血前將患者血清和血細胞分別與獻血員血細胞和血清進行交叉配血試驗，以排除各種因素引起的輸血反應（如凝集或溶血），保證用血安全。 ： 所有申請輸用全血及紅細胞懸液的標本。 申請輸用手工血小板的標本。 ：輸血科主任負責對該標準化操作規(guī)程監(jiān)督執(zhí)行。 交叉配血就是將 患者血清和血細胞分別與獻血員血細胞和血清進行主次測交叉配 試驗，以排除各種因素引起的輸血反應（如凝集或溶血），保證用血安全。 微柱凝膠檢測法是凝膠分子篩技術和免疫學抗原抗體反應相結合的產物，通過調節(jié)凝膠（葡聚糖）的濃度，控制凝膠間隙大小，只允許游離紅細胞通過，從而達到分離游離紅細胞和凝集紅細胞的目的。如果紅細胞沉積在凝膠管底部，表明紅細胞未發(fā)生凝集，即凝集實驗陰性；如果紅細胞聚集在凝膠上部或中部，表明紅細胞發(fā)生凝集，即凝集實驗陽性。 標本種類：新抽取的抗凝血 ： 抗凝劑： EDTA（濃度 15g/L）或枸櫞酸鈉（濃度 32g/L）抗凝 采血量：至少不低于 5ml的靜脈血（加入試管后注意 與 抗凝劑混勻） 離心要求：轉速必須大于 3500轉 /分，時間必須大于 15分鐘 標本采集要求 采血時，一定要認真核對病室、