非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳(native-page)的分類(已改無錯字)
2022-09-15 17:14:14 本頁面
【正文】 子，金屬運輸?shù)鞍祝矸蹱畹鞍祝饘倜?，金屬肽等）不會分解成脫輔蛋白和金屬輔助因子。孤立蛋白的生物活性結(jié)構(gòu)（天然或3D構(gòu)象）在QPNCPAGE后不會發(fā)生構(gòu)象變化。所以，金屬蛋白和蛋白異構(gòu)體在PAGE中被定量的分成高純度的部分。QPNC與其它電泳技術(shù)如SDSPAGE，2DE，等速電泳和CN PAGE等相比被稱為“突破性的方法”。 實驗方法（1）儲備液1）200mM TrisHCl 10mM NaN3 ，室溫2）200mM TrisHCl 10mM NaN3 ，室溫3）40%丙烯酰胺/，4℃（新鮮）（2）電泳緩沖液20mM TrisHCl 1mMNaN3 （除氣），4℃電泳槽上部：500ml電泳緩沖液電泳槽下部：2000ml電泳緩沖液（3）洗脫液20mM TrisHCl 1mMNaN3 （除氣），4℃洗脫室：700ml洗脫緩沖液（4）分離膠丙烯酰胺4%T 體積40ml成分：4ml40%丙烯酰胺/4ml 200mM TrisHCl 10mM NaN3 32 mL H2O200 μL 10% APS20 μL TEMEDAPS和TEMED最后加入。輕輕攪拌燒瓶中的混合物，注意不能產(chǎn)生氣泡。然后把溶液移入內(nèi)徑為28mm，長為40mm有刻度的玻璃柱中。加入3ml正丙醇。60分鐘聚合后用電泳緩沖液沖洗凝膠，然后用4ml電泳緩沖液覆蓋凝膠表面。在室溫下凝集69小時。（5）樣品的準(zhǔn)備
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