蛋白質(zhì)的通性ppt課件(已改無(wú)錯(cuò)字)
2023-06-03 06:15:23 本頁(yè)面
【正文】 及羧基 α氨基酸 — OH N 四、 蛋白質(zhì)的顏色反應(yīng) 五、蛋白質(zhì)分離純化的一般原則 ? 分離純化蛋白質(zhì)一般經(jīng)過(guò)：前處理、粗分級(jí)分離和細(xì)分級(jí)分離。 前處理： 破碎生物組織； 選擇合適的緩沖液把蛋白質(zhì)提取出來(lái)； 如果所要的蛋白質(zhì)主要集中在細(xì)胞的某一組分中，如細(xì)胞核、染色體、核糖體，則可用差速離心法進(jìn)行分離。 粗分級(jí)分離： 采用的方法有分段鹽析法；等電點(diǎn)沉淀法和有機(jī)溶劑分級(jí)分離法等。 細(xì)分級(jí)分離： 采用的方法一般有層析法；凝膠過(guò)濾法；離子交換層析法；吸附層析和親和層析，必要時(shí)選擇電泳法作進(jìn)一步純化。 利用對(duì)配體的特異生物學(xué)親合力純化 —— 親和層析 根據(jù)分子大小不同 透析和超過(guò)濾 凝膠過(guò)濾 根據(jù)溶解度不同 等電點(diǎn)沉淀 鹽溶和鹽析 有機(jī)溶劑沉淀 根據(jù)電荷不同純化 電泳 離子交換層析 六、蛋白質(zhì)分離純化的方法 七、蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的測(cè)定 ? 凝膠過(guò)濾法 ? SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法 ? 沉降速度法 八、蛋白質(zhì)的含量測(cè)定和純度鑒定 ? 蛋白質(zhì)含量測(cè)定 :凱氏定氮法、雙縮脲法、 Folin酚試劑法（又叫 Lowry)，紫外吸收法、染料結(jié)合法（考馬斯亮藍(lán)結(jié)合法，也叫 Bradford法）和膠體金測(cè)定法等。 ? 蛋白質(zhì)純度的鑒定 :凱氏定氮法、雙縮脲法、 Fo
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