【正文】 Azithromycin B, 阿奇霉素 B 系統(tǒng)適用性試驗附圖 ? 方法之二 : 梯度洗脫法的使用有效檢出極性相差懸殊的系列雜質(zhì)驗證等度洗脫法對各類雜質(zhì)的檢出能力? CDE發(fā)補實例 1.注射用頭孢地嗪鈉本品有關物質(zhì)檢查采用 HPLC法 ,建議由等度洗脫改為 梯度洗脫 ,并與等度洗脫的方法進行對比研究。 ? CDE發(fā)補實例 2.匹多莫德本品有關物質(zhì)檢查采用 HPLC法 ,建議參照國外藥典 ,由等度洗脫改為 梯度洗脫 ,并與等度洗脫的方法進行對比研究。? 照高效液相色譜法試驗，以氨基硅烷鍵合硅膠為填充劑，柱前接以十八烷基（或氨基）硅烷鍵合硅膠為填充劑的預柱（5cm 2cm） ,以 （用10％磷酸調(diào)節(jié) pH值至 ）為流動相 A；乙腈為流動相 B，按梯度洗脫方法，梯度條件如下：? 檢測波長為 210nm，理論板數(shù)按匹多莫德峰計算應不低于20220，各已知雜質(zhì)峰之間的分離度及匹多莫德峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度均應符合要求。 時間 流 動 相 A 流 動 相 B 流速 2022版 CP實例 . 總 數(shù) 有關物 質(zhì) HPLC梯度洗脫原料 藥 27 27 12制 劑 42 36 17頭孢菌素的有關物質(zhì)檢查 總 數(shù) 有關物 質(zhì) HPLC梯度洗脫 原料 藥 20 20 11 制 劑 28 23 15 碳青霉烯與單環(huán) β 內(nèi) 酰 胺 類 有關物 質(zhì)檢查 總 數(shù) 有關物 質(zhì) HPLC梯度洗脫 原料 藥 2 2 1 制 劑 2 2 1青霉素類與酶 抑制劑 有關物 質(zhì)檢查方法之三 . 采用 多種手段 進行雜質(zhì)種類和含量的比較由雜質(zhì)多樣性復雜性和方法局限性所決定 單一方法不能滿足多個雜質(zhì)的檢測時，可采用兩種或兩種以上的方法互為補充，控制雜質(zhì)– 同一方法采用不同的測試條件 如 :正相 HPLC、反相 HPLC、不同流動相的反相HPLC等–分離技術與檢測手段聯(lián)用 如 :HPLC、 GC、 LCMS、 GCMS、 HPLCDAD、 CE等–高新技術和方法的采用 如 :新增離子色譜法，核磁共振波譜法、拉曼光譜法等 CDE電子刊物 《 抗生素類藥物雜質(zhì)控制研究的技術要求 》 建議采用 LC/MS、 二極管陣列監(jiān)測器 ，以及在研品與研究對照產(chǎn)品 混合進樣 等 多種方法 從不同側(cè)面綜合判斷，并以列表方式全面反映研究結(jié)果，綜合分析二者所含雜質(zhì)種類和含量的差異，進而評價其質(zhì)量的差異。在上述規(guī)范研究的基礎上，結(jié)合相關技術指導原則，制定科學合理的雜質(zhì)限度。CDE“新藥申報與審評技術 ”論文 —《 化學藥品雜質(zhì)研究思路探析 》 中國藥典、國家藥品標準 等:已知雜質(zhì)：奧美拉唑磺?；铮?氧化產(chǎn)物 ）等分析方法： HPLC法，檢測波長為 280nm，規(guī)定奧美拉唑峰與奧美拉唑磺酰化物峰的分離度實例實例 : 注射用奧美拉唑鈉注射用奧美拉唑鈉方法補充： 歐洲藥典、英國藥典收載的 TLC法 －－奧美拉唑的 還原產(chǎn)物2022版 CP生化藥實例 . 肝素鈉采用 分離效能更高的 離子色譜法色譜條件：? IonPacAS11戴安陰離子分析柱， 2502mm? IonPacAG11戴安陰離子保護柱， 502mm? 流動相 A： %NaH2PO4，pH? 流動相 B： %NaH2PO4/14%NaClO4， pH? 梯度洗脫? 流速： mL/min? 檢測波長 :202nm? 實際樣品測定譜圖? 肝素鈉產(chǎn)品中多硫酸軟骨素的測定（按照 2022年中國藥典）? 樣品前處理： 取樣品，制成 20mg/mL的水溶液。? 肝素鈉粗產(chǎn)品中多硫酸軟骨素的測定樣品前處理：稱取樣品 ，加水 mL，混勻溶解后加 mL乙腈，混勻后，于冰箱中沉降 10min，取出后用 10000rpm高速離心機離心 10min，取上層清液 4mL，用氮氣吹干后，用水定容至 8mL，定容后的液體過 μm尼龍濾膜，之后過OnGuardRP柱，濾液上機分析。關注之三 : 雜質(zhì)研究 對照用樣品－ CDE電子刊物 《 抗生素類藥物雜質(zhì)控制研究的技術要求 》 ? 主要針對仿制藥（ 1）首選 原研產(chǎn)品 ，如果原研企業(yè)產(chǎn)品已經(jīng)進口中國，可采用原研進口品；（ 2）如果無法獲得原研產(chǎn)品或者原研進口產(chǎn)品，可以采用 ICH成員國的上市產(chǎn)品 ，即美國、歐盟或日本等國的同品種仿制產(chǎn)品。如果上述國家產(chǎn)品已經(jīng)進口中國，可采用進口品。（ 3）如果國內(nèi)企業(yè)采用 上述產(chǎn)地的無菌原料，進行分裝的無菌粉針 ，也可采用該企業(yè)產(chǎn)品作為雜質(zhì)研究對照樣品。對于其他制劑，因可能采用的輔料、溶劑比較復雜，并使用可能產(chǎn)熱的某些工藝，即使采用進口原料制得的制劑，其雜質(zhì)譜也可能與國外樣品有差異，對于上述制劑，仍建議采用上述第 (1)、 (2)種研究對照樣品。 ? （ 4）如果該仿制藥品仍在上述 ICH成員國上市，申請人未采用其上市品作為雜質(zhì)研究對照樣品，而采用其他產(chǎn)地的樣品（包括國內(nèi)產(chǎn)品）作為雜質(zhì)研究對照樣品，一般不予認可。（ 5）如果該仿制藥品未在上述 ICH成員國上市，即企業(yè)無法獲得符合上述要求的國外樣品、進口樣品或者國產(chǎn)樣品時，則建議充分考慮立題合理性的前提下，按照新藥的雜質(zhì)研究的技術要求，采用 多家國內(nèi)上市制劑 ，進行深入的雜質(zhì)研究和控制，新報產(chǎn)品的質(zhì)量應不低于多數(shù)國內(nèi)企業(yè)產(chǎn)品的質(zhì)量。（ 6）如果該藥物已收載于 EP、 BP、 USP、 JP等國際通用藥典 ，且該藥典標準中對有關物質(zhì)進行了良好的控制，例如英國藥典納入的阿奇霉素明確了 16種已知雜質(zhì)的限度，此種情況下可參考藥典方法進行申報藥品有關物質(zhì)的控制，但需提供 雜質(zhì)對照品（或雜質(zhì)定位對照液）的來源和相關證明 。 關注之四 :復方 制劑的雜質(zhì)研究1)現(xiàn)有國家質(zhì)量標準中多數(shù)復方制劑沒有相應有關物質(zhì)控制2)雖有控制，但沒有考慮復方制劑的特點，研究思路與單方制一般沒有明顯區(qū)別方法 3)專屬性欠佳4)雜質(zhì)歸屬控制少，籠統(tǒng)控制為主? 2022年版藥典二部收載化學藥物復方制劑的有關物質(zhì)檢查項的情況收 載 復方制劑 品種 (個 )已建有關物 質(zhì)檢查項 的品種 (個 )比 例62 10 %2022年版藥典二部收載化學藥物復方制劑有關物質(zhì)檢查項的具體情況? 甘油果糖注射液 紫外 可見分光光度法測定 5羥甲基糠醛? 左炔諾孕酮炔雌醚片 TLC法 ,沒有雜質(zhì)歸屬 ,配有二個對照品溶液 ,與哪個對照品溶液比較 ,未表述清楚 ,無法判斷? 阿莫西林克拉維酸鉀片 HPLC法 ,梯度 ,僅檢查阿莫西林的雜質(zhì) ,單個雜質(zhì)的量不得大于 %,雜質(zhì)總量不得大于 %? 注射用阿莫西林鈉 /克拉維酸鉀 HPLC法 ,梯度 ,僅檢查阿莫西林的雜質(zhì) ,單個雜質(zhì)的量不得大于 %,雜質(zhì)總量不得大于 %? 復方阿米三嗪片 包芯片 ,分離外層片及片芯 ,分別 TLC法測定? 多巴絲肼片 HPLC法 ,檢查鹽酸芐絲肼的鹽酸絲肼與鹽酸三羥芐基芐絲肼二個已知雜質(zhì)? 萘普待因片 TLC法 ,檢查含量較大成分萘普生的單個雜質(zhì) :主成分自身對照比較 (限度 %)及萘普生的已知雜質(zhì) 6甲氧基 2萘乙酮 (限度 %)? 鋁鎂司片 比色法 ,檢查阿司匹林的已知有關物質(zhì)水楊酸? 注射用頭孢哌酮鈉 /舒巴坦鈉 HPLC法 ,所有雜質(zhì)峰面積與對照溶液中二個主成分峰面積之和比較 ,不得大于 5倍 (%)? 注射用氨芐西林鈉 /舒巴坦鈉 HPLC法 ,單個雜質(zhì)峰面積與對照溶液中二個主成分峰面積之和比較 ,不得大于 (%)各雜質(zhì)峰面積的和與對照溶液中二個主成分峰面積之和比較 ,不得大于 (%)中國藥典與美國藥典對復方制劑中雜質(zhì)控制規(guī)定的比較品 名 雜質(zhì)檢查項 目 中國 藥 典 規(guī) 定 美國 藥 典 規(guī) 定復方卡托普利片 卡托普利二硫化物4氨基 6氯 1,3苯二磺胺無控制要求無控制要求HPLC法 測 定 ,其含量小于或等于%HPLC法 測 定 ,其含量小于或等于%復方泛影葡胺注射液 游離碘碘化物游離芳香胺重金屬細 菌內(nèi)毒素淀粉指示 劑 法 測 定 ,供 試液不得即 時顯藍 色目 視 比色法 測 定 ,供 試 液的 顏 色不得比 對 照液更深無控制要求無控制要求無控制要求指示 劑 法 測 定 ,供 試 液的 顏 色不得比對 照液更深指示 劑 法 測 定 ,