【正文】 （ oligonucleotides）類(lèi)疫苗佐劑的研究，咪唑喹啉胺類(lèi)小分子激動(dòng)劑的研究在下面化合物披露后受到限制。在 Pfizer收購(gòu)后，重新作為 治療 HCV藥物進(jìn)行研發(fā)，并進(jìn)入Ⅰ期健康人體上的原理驗(yàn)證階段（ proofofmechanism）。但是在最大劑量（ 9mg）時(shí)，兩個(gè)受試者出現(xiàn)嚴(yán)重副反應(yīng)，表現(xiàn)為似流感癥狀、低血壓、淋巴球減少等現(xiàn)象，這導(dǎo)致進(jìn)一步的臨床實(shí)驗(yàn)終止。一般化合物結(jié)構(gòu)見(jiàn)下圖： 33 、 1取代 吡唑啉酮 （ 1Substituted Pyrazolo(3,4C) Ring） 類(lèi) 在專(zhuān)利 US2020203533A111中， Coley Pharmaceutical Group, 以下骨架： 骨架進(jìn)一步細(xì)化，又分為以下幾種： 編號(hào) 結(jié)構(gòu) 編號(hào) 結(jié)構(gòu) 1 2 3 4 5 6 34 7 8 9 此類(lèi)化合物進(jìn)行了如下生物活性測(cè)試，但并無(wú)結(jié)果公布。 12 35 隨后， Pfizer 公司對(duì)此化合物進(jìn)行了活性?xún)?yōu)化 13，部分結(jié)構(gòu)與活性結(jié)果如下（ EC50， nM）： Comp Series R1 R 8 9 10 A 121 B 125 105 C 586 D 1780 E 2610 F 920 在發(fā)現(xiàn) R 為 10 系列取代 基 活性較好后，對(duì)此部分進(jìn)行了進(jìn)一步優(yōu)化 ，結(jié)果如下表 。 37 專(zhuān)利 US2020197478A114披露了 119 個(gè)化合物結(jié)構(gòu)，部分活性結(jié)果見(jiàn)下表（ 活性結(jié)果 EC50為 TLR7 激動(dòng)劑增加干擾素 IFN 釋放從而使 PBL/HCV 復(fù)制 水平降低 50%時(shí)的濃度）。 編號(hào) 結(jié)構(gòu) 編號(hào) 結(jié)構(gòu) 1 EC50≈110nM 2 EC50≈220nM 3 EC50≈500nM 4 EC50≈2020nM 5 EC50≈1000nM 6 EC50≈3000nM 7 EC50≈200nM 8 EC50≈100nM 、 8羥基腺嘌呤（ 8Hydroxyadenine）類(lèi) 8羥基腺嘌呤類(lèi)化合物來(lái)自 Dainippon Sumitomo Pharmaceuticals Company Ltd 與 AstraZeneca 的合作。其中， SM276001在 2020 年作為 HBV和 HCV的治療藥物處在臨床前研究。在獼猴上的實(shí)驗(yàn)顯示， SM276001 比 瑞喹莫德 （ Resiquimod）表現(xiàn) 出更優(yōu)越的系統(tǒng)性 IFN 誘導(dǎo)反應(yīng)（ systemic IFN induction response）。 之后， Dainippon Sumitomo 公司又覆蓋了此類(lèi)化合物的脂類(lèi)前藥如 SM324405，用于吸入法治療過(guò)敏引起的呼吸道炎癥，并且不會(huì)引起任何系統(tǒng)性 IFNs（見(jiàn)下文分析）。 對(duì)此類(lèi)化合物左側(cè)邊鏈構(gòu)效關(guān)系的探索見(jiàn) 2020 年文獻(xiàn)， 18相關(guān)化合物及活性結(jié)果見(jiàn)下圖： 40 對(duì)此位置進(jìn)行的更多樣性的研究結(jié)果如下 19： 41 42 43 對(duì)此類(lèi)化合物左側(cè)邊鏈構(gòu)效關(guān)系的探索見(jiàn) 2020 年文獻(xiàn) 9，相關(guān)化合物及活性結(jié)果見(jiàn)下圖： 44 45 目前，相關(guān)專(zhuān)利如下： AstraZeneca AB,；和 Dainippon Sumitomo Pharma CO.,LTD 公司（ Aamp。 在專(zhuān)利 US2020087443A120， Aamp。 編號(hào) 結(jié)構(gòu) 編號(hào) 結(jié)構(gòu) 1 pEC50= 2 pEC50= 3 pEC50= 4 pEC50= 5 pEC50= 6 pEC50= 7 pEC50= 8 pEC50= 47 9 pEC50= 10 pEC50= 在專(zhuān)利 US2020200491A121中， Aamp。 編號(hào) 結(jié)構(gòu) 編號(hào) 結(jié)構(gòu) 1 pEC50= 2 pEC50= 3 pEC50= 4 pEC50= 48 5 6 7 而在專(zhuān)利 US2020099870A122中， Aamp?，F(xiàn)將部分化合物活性列出： 編號(hào) 結(jié)構(gòu) 編號(hào) 結(jié)構(gòu) 4 pEC50= 5 pEC50= 49 6 pEC50= 7 pEC50= 8 pEC50= 而在專(zhuān)利 US2020192153A123中， Aamp。現(xiàn)將部分化合物活性列出 （ TLR7 HEK293） ： 編號(hào) 結(jié)構(gòu) 編號(hào) 結(jié)構(gòu) 1 EC50= 3 EC50= 50 15 EC50= 16 EC50= 17 EC50= 18 EC50= 在專(zhuān)利 US2020306610A124中， Aamp。 化合物結(jié)構(gòu)見(jiàn)下表： 編號(hào) 結(jié)構(gòu) 編號(hào) 結(jié)構(gòu) 1 MEC= 2 MEC=3 nM 51 3 MEC=1 nM 4 MEC=1 nM 5 6 MEC=10 nM 7 8 MEC=3 nM 9 MEC=3 nM 10 MEC=1 nM 11 MEC=10 nM 在專(zhuān)利 US2020236348A125中， Gilead Sciences, ： 52 此專(zhuān)利 披露了約 50 個(gè)化合物結(jié)構(gòu)，部分活性結(jié)果見(jiàn)下表 。 化合物結(jié)構(gòu)見(jiàn)下表： 編號(hào) 結(jié)構(gòu) 編號(hào) 結(jié)構(gòu) A C D F J N R W 53 Y AI AJ AQ AS AU AY AW AZ BE BG BH BM 并且，上表中化合物 W的活性在專(zhuān)利 US2020200836A126中被深入報(bào)道?，F(xiàn)將部分代表性結(jié)構(gòu)列出： 編號(hào) 結(jié)構(gòu) 編號(hào) 結(jié)構(gòu) D E F G M O P T X AE 在專(zhuān)利 US2020202484A128中， Gilead Sciences, ： 55 此專(zhuān)利 披露了約 70 個(gè)化合物結(jié)構(gòu)，部分活性結(jié)果見(jiàn)下表 。 編號(hào) 結(jié)構(gòu) 編號(hào) 結(jié)構(gòu) 57 1 ED50=30 nM 2 ED50=5 nM 4 ED50=72 nM 5 ED50=42 nM 6 ED50=17 nM 注：化合物 1228 在 10μM 濃度下對(duì) HCV的復(fù)制都表現(xiàn)出大于 50%的抑制。 部分化合物活性及結(jié)構(gòu)見(jiàn)下表： 項(xiàng)目 活性報(bào)告 58 IFNα PBMCs TLR7 (EC50=the concentration of pound at which 50% of the maximal IFN concentration was achieved) 59 在專(zhuān)利 US2020308609A131中， GlaxoSmithKline LLC 公司披露了以下化合物： 其活性結(jié)果如下表所示： 項(xiàng)目 活性報(bào)告 IFNα PBMCs（冷藏） pEC50 （以 1μM resiquimod作參照） IFNα PBMCs（新鮮） pEC50≥9 （以 1μM resiquimod作參照） TNF PBMCs（新鮮） pEC50≤ （以 1μM resiquimod作參照） AllergenDriven Cytokine Assay PBMCs（新鮮） EC50≈ μM IFNα BALBc mice 鼻內(nèi)給藥 21029 pg/mL Stability testing 在 Q1A 和 Q1B 條件下穩(wěn)定 、 擴(kuò)環(huán) 8羥基腺嘌呤類(lèi) 在專(zhuān)利 US2020203301A13 US2020071354A133中， Gilead Sciences, 司披露了以下骨架： 此專(zhuān)利 披露了約 120 個(gè)化合物結(jié)構(gòu)，并進(jìn)行了比較深入的生物學(xué)活性研究 .60 部分高活性（ IFNα MEC=）化合物結(jié)構(gòu)如下 : TLR7 活性報(bào)告 IFN PMBC Assay (IFNα MEC=引起 IFNα的產(chǎn)生比空白試驗(yàn)高三倍的最低濃度 ) 2 4 9 21 24 37 40 49 56 59 83 89 61 93 96 99 104 110 113 結(jié)構(gòu)多樣性舉例 編號(hào) 結(jié)構(gòu) 編號(hào) 結(jié)構(gòu) 57 64 66 P 62 67 70 80 81 P 其它的生物活性測(cè)試情況見(jiàn)下表： 項(xiàng)目 活性報(bào)告 HCV suppression Assay Cytokine expression induction assay獼猴 Cytokine expression induction assay mice Cytokine expression induction assay healthy woodchucks 抗 WHV血清轉(zhuǎn)化 慢性感染 woodchucks 而在專(zhuān)利 US2020204627A134中， Gilead Sciences, 架： 63 此類(lèi)化合物是 TLR7 或其它 TLR 亞型激動(dòng)劑， 部分化合物活性見(jiàn)下表（ IFNα PBMCs） ： 編號(hào) 結(jié)構(gòu) 編號(hào) 結(jié)構(gòu) A MEC=d B MEC=c C MEC=a D MEC=e E MEC=b F MEC=c G MEC=c 注： a=1nM， b=19nM， c=1099nM， d=1001000nM， e=1000nM， 、 艾沙托立賓（ Isatoribine）衍生物類(lèi) 64 鳥(niǎo)嘌呤核糖核苷類(lèi)似物艾沙托立賓（ ANA245）及其前藥（ ANA975）是目前臨床研究最多的口服 TLR7 激動(dòng)劑。在原理驗(yàn)證階段艾沙托立賓表現(xiàn)出良好的耐受性，以 800mg最大劑量給藥， 8/12 個(gè)病人顯示出統(tǒng)計(jì)性的病毒載量降低，幅度 ，并且在此過(guò)程中伴隨著劑 量依賴(lài)的 IFN刺激的 2,5OAS和 ISG15產(chǎn)生的系統(tǒng)性增加。 Anadys 聯(lián)合 Novartis 開(kāi)發(fā)了 ANA975 作為口服制劑。但隨后，由于在動(dòng)物毒性研究中發(fā)現(xiàn)其會(huì)劑量依賴(lài)導(dǎo)致強(qiáng)烈的免疫刺激， Anadys 終止了針對(duì) HCV 病人的一個(gè) 28 天的Ⅰ b 期臨床項(xiàng)目。 但是艾沙托立賓的另一個(gè)前藥（ ANA773）也在被研發(fā)作為 HCV治療藥物，并且看上去其效果好于 ANA975。 在專(zhuān)利 US2020054590A135中， Anadys 公司披露了以下骨架： 編號(hào) 結(jié)構(gòu) 編號(hào) 結(jié)構(gòu) 1 2 65 3 4 5 6 7 8 活性結(jié)果未見(jiàn)。 部分化合物 活性見(jiàn)下表： No. R7 R8 EC90（ μM） No. R4 R8 EC90（ μM） 15 Me 11 iPr OMe 16 Me OEt 12 Me 17 iPr OEt 14 cPn OH 23 cBu OMe 24 cPn OMe 、 Bitriazolyl Acyclonucleoside類(lèi) 另一類(lèi) 鳥(niǎo)嘌呤核糖核苷類(lèi)似物是 Peng38等報(bào)道的如下所示雙三氮雜環(huán)類(lèi)化合物。 68 其活性結(jié)果如下表所示： 項(xiàng)目 活性報(bào)告 人 TLR7 HEK293 EC50= 52377 EC50= 52378 人 TLR8 HEK293 EC50=？ 52