【正文】 訓(xùn) 。 ? ② 流式細(xì)胞儀檢測(cè)區(qū)：流式細(xì)胞儀 ? 3） 功能分區(qū) ? 實(shí)驗(yàn)室原則上應(yīng)分為樣品處理區(qū)和流式細(xì)胞儀檢測(cè)區(qū) ,各區(qū)的功能是： ? ① 樣品處理區(qū)應(yīng)達(dá)到生物安全 Ⅱ 級(jí) （ BSL2）實(shí)驗(yàn)室要求 ， 用于樣品處理 、 流式檢測(cè)樣品制備 。 （ 2） 樣品采集 、 運(yùn)輸和接收 1） 樣品的采集 選擇合適的抗凝劑 ， 分別用于血液學(xué)檢測(cè)和流式細(xì)胞儀的免疫表型檢測(cè) 。 ） 。 ② 用于流式細(xì)胞儀免疫表型檢測(cè)的抗凝劑 用 K3EDTA抗凝 ， 收集樣品應(yīng)在 30h以?xún)?nèi) ， 盡早 （ 8h以?xún)?nèi)） 處理；用 ACD或肝素抗凝 ， 收集樣品在 48h以?xún)?nèi) ， 盡早（ 8h以?xún)?nèi) ） 處理 。 ①當(dāng)收集兒童樣品時(shí)，采用兒童用注射器、小試管。 準(zhǔn)備適當(dāng)數(shù)量的樣品管 ?①當(dāng)同一樣品的血球檢測(cè)和流式細(xì)胞儀免疫表型檢測(cè)在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行時(shí)，用 1個(gè)裝有 K3EDTA的試管即可。 ?對(duì)所有樣品編號(hào)，并寫(xiě)明日期和收集時(shí)間。超過(guò) 37℃ 的溫度會(huì)破壞細(xì)胞，對(duì)血液學(xué)和流式細(xì)胞儀的檢測(cè)有影響。這種方法有助樣品的保存。 ?③如需運(yùn)送樣品到其它地點(diǎn)時(shí)，應(yīng)將裝樣品的試管放于一個(gè)防漏的容器中，并將此容器放于一個(gè)裝有充足的吸水性物質(zhì)的紙罐中，以防止震動(dòng)并可吸收所有因試管破裂漏出的血液。 ?④應(yīng)選擇特定的方案，并且安排合適的時(shí)間收集和運(yùn)輸樣品。如有以下現(xiàn)象發(fā)生，采取正確的方法處理： ?①如果樣品較熱或較冷，但沒(méi)有明顯的溶血或結(jié)冰， 可以處理樣品，但要在工作表的報(bào)告上注明溫度條件。 ?②不可檢測(cè)溶血或結(jié)冰的樣品。 ?④如果樣品的采集時(shí)間已超出 48h，不可檢測(cè)。 如有以下現(xiàn)象發(fā)生 ， 采取正確的方法處理： ① 如果樣品較熱或較冷 ， 但沒(méi)有明顯的溶血或結(jié)冰 ，可以處理樣品 ， 但要在工作表的報(bào)告上注明溫度條件 。 ② 不可檢測(cè)溶血或結(jié)冰的樣品 。 ④ 如果樣品的采集時(shí)間已超出 48h， 不可檢測(cè) 。 自動(dòng)檢測(cè)方法包括流式細(xì)胞儀 （ 主要有多平臺(tái)三級(jí)程序法和單平臺(tái)一步法 ） 和專(zhuān)門(mén)的細(xì)胞計(jì)數(shù)儀 。 （ 3）方法 ? （ 5） 結(jié)果報(bào)告 ? 1） 按照實(shí)驗(yàn)結(jié)果填寫(xiě) CD4+ 和 CD8+ T淋巴細(xì)胞檢測(cè)報(bào)告單 ， 檢測(cè)人員簽字 。 注意： CD4+T細(xì)胞是指輔助性 T細(xì)胞 。 同樣地 ， CD8+ T細(xì)胞是 Tsuppressor/cytotoxic細(xì)胞 ， 為 CD3+ 和 CD8+ 雙陽(yáng)性的細(xì)胞 。 ? 3） 以全部淋巴細(xì)胞的百分比報(bào)告數(shù)據(jù) ， 并且修正門(mén)內(nèi)淋巴細(xì)胞純度 。 ? 4） 為檢測(cè)免疫亞群而取血的同時(shí) ， 用該血樣作自動(dòng)測(cè)定全血細(xì)胞 （ CBC） 計(jì)數(shù)白細(xì)胞 （ WBC） 及分類(lèi)測(cè)定 ，報(bào)告淋巴細(xì)胞亞群絕對(duì)數(shù)值 。 ? ② 如可能 ， 應(yīng)報(bào)告計(jì)數(shù)的百分率和絕對(duì)值 。 表 3 BD公司應(yīng)用單平臺(tái)一步法建立的正常參考值范圍表 項(xiàng) 目 單 位 參考正常值范圍 CD3+/ CD45+ % 56%?85% CD3+絕對(duì)數(shù) 個(gè) /μ l 1027?2086 CD3++ CD8+/ CD45+ % 15%?34% CD3++ CD8+絕對(duì)數(shù) 個(gè) /μ l 323?836 CD3++ CD4+/ CD45+ % 30%?54% CD3++ CD4+絕對(duì)數(shù) 個(gè) /μ l 706?1125 CD4+/ CD8+比值 1?2* ? （ 6） 檢測(cè) CD4+、 CD8+ T淋巴細(xì)胞的意義 ? T淋巴細(xì)胞是機(jī)體免疫系統(tǒng)內(nèi)功能最重要的一群細(xì)胞 。 當(dāng)不同淋巴細(xì)胞亞群的數(shù)量和功能發(fā)生異常時(shí) ，可導(dǎo)致機(jī)體免疫功能紊亂并發(fā)生一系列病理變化 。 AIDS是由 HIV引起的一組綜合征 ， HIV主要侵犯人 CD4+ T淋巴細(xì)胞 ， 導(dǎo)致其數(shù)量上的減少和功能缺陷 ，使機(jī)體免疫平衡被打破造成免疫功能低下 ， 最終導(dǎo)致各種機(jī)會(huì)感染和腫瘤 。主要表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面： ? 1）了解機(jī)體的免疫狀態(tài)以進(jìn)行疾病分期，如美國(guó) CDC就是以此為基礎(chǔ)制訂了 HIV感染者 /AIDS病人的診斷和分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)（見(jiàn)表 4），目前國(guó)內(nèi)外仍被采納應(yīng)用。如判斷 HIV感染者的臨床合并癥（當(dāng) CD4+ T淋巴細(xì)胞細(xì)胞＜ 200/?l時(shí)，很容易發(fā)生卡氏肺孢子蟲(chóng)肺炎；當(dāng) CD4+ T淋巴細(xì)胞 50時(shí)，易發(fā)生 CMV感染＝。 ? 4）是用來(lái)評(píng)價(jià)一些新的、針對(duì) HIV的治療方法和治療藥物療效的重要指標(biāo)。 ? 5．艾滋病實(shí)驗(yàn)室的安全防護(hù)和職業(yè)暴露預(yù)防 ? （ 1）由于甲醛有致癌作用，不宜用于生物安全柜和實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)空氣消毒?！旧锇踩瘢?25ml福爾馬林和等量水混合后放在一個(gè)蒸發(fā)皿中使其在密封的生物安全柜中蒸發(fā)，保持至少 6h，最好過(guò)夜。具體操作可按說(shuō)明書(shū)執(zhí)行。 穿防護(hù)服，被濺的地方用經(jīng)消毒劑浸泡的吸水物質(zhì)覆蓋；消毒劑起作用 10－ 15分鐘后清理該地方。 ? （ 2）艾滋病的職業(yè)暴露后預(yù)防： ? 艾滋病的職業(yè)暴露：是指醫(yī)務(wù)工作者、實(shí)驗(yàn)室工作人員及有關(guān)監(jiān)管人員在從事 HIV/AIDS診斷、治療、護(hù)理、預(yù)防、檢驗(yàn)、管理工作過(guò)程中，暴露于含有 HIV的血液、體液和實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)液，即暴露于含有 HIV的液體等引起的危害。 ? 1）急救處理 ? ①刺激出血：職業(yè)暴露的緊急處理，只要情況允許，應(yīng)實(shí)行急救。 ? ②肥皂和清水沖洗傷口或沾污的皮膚。 ? ③受傷部位的消毒與包扎：傷口應(yīng)用消毒液（如 70%酒精、%次氯酸鈉、 %?%過(guò)氧乙酸、 %碘伏等）浸泡或涂抹消毒，并包扎傷口。 ? ⑤可介紹已發(fā)生職業(yè)暴露的人員到艾滋病防治機(jī)構(gòu)進(jìn)一步咨詢(xún)和處理。 暴露物是否是傳染性物質(zhì)，如血液、含血體液、其它傳染性物質(zhì)或被其污染的器械 是 否 其它潛在傳染性物質(zhì) 血液或含血液體 暴 露 的 類(lèi) 型 不需預(yù)防性治療 粘膜或可能有損傷的皮膚 暴露量 量小 暴露時(shí)間短 1 級(jí)暴露 量大 暴露時(shí)間長(zhǎng) 2 級(jí)暴露 只沾染完整的皮膚 刺、割傷皮膚 不需 PE P 危險(xiǎn)度 低危 如：表皮 擦傷、針刺等 高危 如：傷口較深、儀器上可見(jiàn)血液等 2 級(jí)暴露 3 級(jí)暴露 確定 HIV 暴露源頭嚴(yán)重程度，分為輕度、重度和不明 HIV 陰性 HIV 陽(yáng)性 暴露源的 HIV 情況 無(wú)需 PE P 暴露源不明 HIV 暴露源級(jí)別1 （輕度） 暴露源的 H IV 滴度低（無(wú)癥狀、 CD4計(jì)數(shù)高） 暴露源的 H IV 滴度高（有癥狀、 CD4計(jì)數(shù)低） H IV 暴露源級(jí)別 2 （重度） H IV 暴露源級(jí)別不明 4 ）根據(jù)暴露級(jí)別和暴露源病毒載量水平預(yù)防性用藥的推薦處理方案（表 5 ） 表 5 職業(yè)暴露后預(yù)防性用藥的處理方案 暴露級(jí)別 暴露源級(jí)別 預(yù)防性用藥推薦處理方案 1 １ 不一定使用ＰＥＰ，可由職業(yè)暴露者本人根據(jù)利害比較作出決定 1 2 使用基本用藥程序（ 1 ） 2 1 使用基本用藥程序 2 2 使用強(qiáng)化用藥程序（ 2 ） 3 1 或 2 使用強(qiáng)化用藥程序 不明 暴露源級(jí)別不明 使用基本用藥程序 注 : （ 1 ）基本用藥程序：兩種逆轉(zhuǎn)錄酶制劑，使用常規(guī)治療劑量， AZT （每次 200mg ，每日 3 次， 或每次 300mg ，每日 2 次） + 拉米夫定（每次 1 50mg 每日 2 次），連續(xù)使用 28d 。 （ 2 ）強(qiáng)化用藥程序：基本用藥程序加一種蛋白酶抑制劑，茚地那韋（ 8 00mg ， tid ，飯前 1h 及飯后 2h 服用），均使用常規(guī)治療劑量。雖然動(dòng)物研究顯示 24?36h之后再進(jìn)行預(yù)防性用藥可能已無(wú)效，但是還不確定對(duì)人類(lèi)無(wú)效。由于服用 4周 AZT才有一定保護(hù)作用，如果無(wú)很大的副作用，預(yù)防性治療用藥時(shí)間應(yīng)持續(xù) 4周。因此具體建議如下： ①如果存在用藥指征，則應(yīng)當(dāng)在暴露后盡快開(kāi)始 PEP。 ③在患者可耐受的前提下，給予 4周的 PEP。 3 如果出現(xiàn)主觀的或客觀的毒副作用，應(yīng)在專(zhuān)家的指導(dǎo)下，減少劑量或換用藥物，并詳細(xì)記錄藥物毒副作用情況。 6） 登記、監(jiān)測(cè)、報(bào)告與保密 1 建立職業(yè)暴露登記和監(jiān)測(cè)制度 ①職業(yè)暴露登記制度：職業(yè)暴露事故的事故發(fā)生單位應(yīng)建立“艾滋病職業(yè)暴露人員個(gè)案登記表”（附表 7），對(duì)職業(yè)暴露情況進(jìn)行登記、保存和上報(bào)。 ②當(dāng)?shù)丶膊】刂撇块T(mén)為職業(yè)暴露處理單位，重大職業(yè)暴露發(fā)生單位應(yīng)及時(shí)與當(dāng)?shù)丶部刂行娜〉寐?lián)系。 ③監(jiān)測(cè)暴露源：如果暴露源沒(méi)有陽(yáng)性或陰性的血清學(xué)化驗(yàn)結(jié)果應(yīng)立即檢測(cè)，最好做快速試驗(yàn)，因其結(jié)果可在幾十分鐘內(nèi)得到。 ④監(jiān)測(cè)職業(yè)暴露者：由本省 HIV監(jiān)測(cè)（或確認(rèn)）中心抽血檢測(cè)職業(yè)暴露者的 HIV1/2抗體（包括做快速試驗(yàn)），該血清留樣備用。暴露后 1年內(nèi)要定期監(jiān)測(cè) HIV抗體，即分別在暴露后 4周、 8周、12周、 6個(gè)月監(jiān)測(cè)。 ⑤使用預(yù)防性用藥，應(yīng)注意監(jiān)測(cè)藥物的毒副作用，包括使用預(yù)防性治療時(shí)和服藥兩周后的全血檢測(cè)、腎和肝功檢測(cè)。不采取暴露后預(yù)防用藥者，也要定期檢測(cè) HIV抗體，檢測(cè)時(shí)間同前。每一個(gè)得到信息的機(jī)構(gòu)或個(gè)人均應(yīng)做好保密工作。每年 1月 10日和 7月 10日前，省疾控中心匯總本省職業(yè)暴露情況，填寫(xiě)“艾滋病防治工作人員職業(yè)暴露事故匯總表”（附表 8），匯總后報(bào)至本?。ㄖ陛犑?、自治區(qū)）衛(wèi)生廳（局），抄報(bào)中國(guó)疾控中心性艾中心。 ②各省藥物貯備點(diǎn)可設(shè)在省疾控中心，或衛(wèi)生行政及其它系統(tǒng)的主管部門(mén)指定的單位。 ④職業(yè)暴露安全藥品由國(guó)家免費(fèi)抗病毒治療藥品庫(kù)統(tǒng)一調(diào)配。 ⑥各省藥物儲(chǔ)備點(diǎn)應(yīng)嚴(yán)格按照本規(guī)范的要求做好藥品的使用、發(fā)放、更新和管理以及事故的登記、處理和跟蹤檢測(cè)等工作。 , March 7, 2023 ? 雨中黃葉樹(shù)，燈下白頭人。 :00:5619:00Mar237Mar23 ? 1故人江海別，幾度隔山川。 :00:5619:00:56March 7, 2023 ? 1他鄉(xiāng)生白發(fā)，舊國(guó)見(jiàn)青山。 。 2023年 3月 7日星期二 7時(shí) 0分 56秒 19:00:567 March 2023 ? 1做前，能夠環(huán)視四周；做時(shí)，你只能或者最好沿著以腳為起點(diǎn)的射線向前。 , March 7, 2023 ? 很多事情努力了未必有結(jié)果，但是不努力卻什么改變也沒(méi)有。 :00:5619:00Mar237Mar23 ? 1世間成事，不求其絕對(duì)圓滿(mǎn)，留一份不足，可得無(wú)限完美。 :00:5619:00:56March 7, 2023 ? 1意志堅(jiān)強(qiáng)的人能把世界放在手中像泥塊一樣任意揉捏。 。 2023年 3月 7日星期二 7時(shí) 0分 56秒 19:00:567 March 2023 ? 1空山新雨后，天氣晚來(lái)秋。 , March 7, 2023 ? 閱讀一切好書(shū)如同和過(guò)去最杰出的人談話。 :00:5619:00Mar237Mar23 ? 1越是無(wú)能的人，越喜歡挑剔別人的錯(cuò)兒。勝人者有力，自勝者強(qiáng)。 2023年 3月 7日星期二 下午 7時(shí) 0分 56秒 19:00: ? 1最具挑戰(zhàn)性的挑戰(zhàn)莫過(guò)于提升自我。 2023年 3月 7日星期二 7時(shí) 0分 56秒 19:00:567 March 2023 ? 1一個(gè)人即使已登上頂峰，也仍要自強(qiáng)不息