【正文】 結(jié)果只能作為輔助診斷依據(jù) ， 確認(rèn)報(bào)告要依據(jù)血清學(xué)隨訪結(jié)果 。 ? 省艾滋病確認(rèn)中心實(shí)驗(yàn)室難以確認(rèn)的樣品 ，送國家艾滋病參比實(shí)驗(yàn)室確認(rèn) 。 ? 同一受檢對(duì)象的樣品在不同實(shí)驗(yàn)室得到不一致的確認(rèn)結(jié)果時(shí) ， 由國家艾滋病參比實(shí)驗(yàn)室和艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室審評(píng)及技術(shù)指導(dǎo)專家組予以仲裁 。 3． HIV P24抗原的檢測(cè) 規(guī)定了 P24抗原的檢測(cè)方法 、 適用 范圍和 規(guī)范性引用文件 。 ? （ 1） 適用范圍： ? HIV1抗體不確定或窗口期的輔助診斷 。 ? HIV1抗體陽性母親所生嬰兒早期的輔助鑒別診斷 。 ? 第四代 HIV1抗原 /抗體 ELISA試劑檢測(cè)呈陽性反應(yīng) ， 但 HIV1抗體確認(rèn)陰性者的輔助診斷 。 ? 監(jiān)測(cè)病程進(jìn)展和抗病毒治療效果 。 ? （ 2） HIV P24抗原檢測(cè)方法 ? P24抗原的檢測(cè)通常是采用 ELISA夾心法 ， 已知抗體包被固相反應(yīng)板孔底 ， 加入待測(cè)血清 ， 若血清中含有 P24抗原則與包被抗體形成抗原 抗體復(fù)合物 ， 再加入酶 （ HRP） 標(biāo)記的 HIV1抗體與抗原結(jié)合 ， 加底物顯色 ， 在酶標(biāo)儀上讀結(jié)果 。 ? 為了提高檢測(cè)血清中 P24抗原的敏感性 ， 需先將血清中免疫復(fù)合物解離后再進(jìn)行測(cè)定 ， 目前已發(fā)展了 ICD P24抗原 （ immunplex disassociate，免疫復(fù)合物解離 ， ICD） 測(cè)定試劑 ， 用于 HIV1 P24抗原測(cè)定 。 ? 即使將復(fù)合物解離 ， 敏感性提高 ， 也只能在大約50%無癥狀感染者中檢出 P24抗原 。 ? 4） 結(jié)果報(bào)告和解釋 ? HIV1 P24抗原的陽性結(jié)果必須經(jīng)過中和試驗(yàn)確認(rèn) ，若陽性標(biāo)本的 OD值比中和反應(yīng)前減少 50%以上 ， 才確定為 HIV P24抗原結(jié)果陽性 。 ? HIV1 P24抗原陽性僅作為 HIV感染窗口期的輔助診斷依據(jù) ， 不能據(jù)此確診 。 ? HIV1P24抗原檢測(cè)的敏感性為 30?90％ ， 低于病毒載量測(cè)定 。 HIV1P24抗原陰性結(jié)果只表示在本試驗(yàn)中無反應(yīng) ， 不能排除 HIV感染 。 ? 嬰幼兒經(jīng)過胎盤或哺乳從母親獲得的 HIV抗體不能用于診斷是否經(jīng)母嬰傳播感染 HIV。 嬰幼兒體內(nèi)從母親得到的 HIV抗體持續(xù)存在時(shí)間最長不超過 18個(gè)月 。 ? 在 18月齡以前可以用多種不同的非抗體依賴性的檢驗(yàn)方法對(duì)新生兒 HIV感染進(jìn)行輔助診斷 ， 包括：HIV P24抗原檢測(cè) 、 病毒分離培養(yǎng) 、 RNA或 DNA測(cè)定 。 4．艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù) ? 規(guī)規(guī)定了全國各級(jí)各類艾滋病實(shí)驗(yàn)室的安全防護(hù) ，規(guī)范性引用文件 ? （ 1） 實(shí)驗(yàn)室生物安全級(jí)別 ? 1） 艾滋病血清學(xué)檢測(cè) ? 艾滋病血清學(xué)檢測(cè) （ 包括篩查和確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室 ） 、免疫學(xué)和核酸檢測(cè)應(yīng)在符合 Ⅱ 級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室（ BSL2） 要求的艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行 。 ? 2） HIV分離 、 研究 ? HIV分離 、 細(xì)胞培養(yǎng)及研究工作應(yīng)在 Ⅲ 級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室 （ BSL3） 中進(jìn)行 。 ? （ 2） 實(shí)驗(yàn)室管理要求 ? 1） 建立安全制度 ? ① 實(shí)驗(yàn)室的儀器設(shè)備 、 建筑和設(shè)施的安全性應(yīng)符合 《 實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求 》 GB 194892023和本 《 規(guī)范 》 要求 。 ? ② 根據(jù)本 《 規(guī)范 》 制訂本實(shí)驗(yàn)室的安全工作制度或安全標(biāo)準(zhǔn)操作程序 （ SSOP） ， 該制度或程序應(yīng)適用于現(xiàn)有的實(shí)驗(yàn)條件 ， 并與實(shí)驗(yàn)室其它規(guī)定相一致 。 ? ③ 無論是否發(fā)生意外事故 ， 每年都要對(duì)安全工作制度或安全標(biāo)準(zhǔn)操作程序及其實(shí)施情況進(jìn)行檢查和修訂 ， 并有記錄 。 ? ④ 制定意外事故處理預(yù)案 。 建立意外事故的登記和報(bào)告制度 。 ? ⑤ 實(shí)驗(yàn)室主任負(fù)責(zé)組織對(duì)突發(fā)事件和職業(yè)暴露事故進(jìn)行調(diào)查 、 登記 、 處理和報(bào)告 。 ? 2） 人員培訓(xùn)和管理 ? ① 向管理人員和所有檢測(cè)人員提供并完成與工作相關(guān)的充足有效的技術(shù)培訓(xùn) 。 強(qiáng)化全員安全培訓(xùn)和 “ 普遍性防護(hù)原則 ” 安全意識(shí) 。 所有工作人員必須經(jīng)過 HIV檢測(cè)技術(shù)和省級(jí)以上艾滋病實(shí)驗(yàn)室安全培訓(xùn) ， 包括上崗培訓(xùn)和復(fù)訓(xùn) ， 并接受實(shí)驗(yàn)室管理人員的監(jiān)督 。 實(shí)驗(yàn)室的安全責(zé)任人要對(duì)工作和環(huán)境的安全負(fù)責(zé) ， 所有工作人員都有責(zé)任保護(hù)自己和他人的安全 。 ? ② 必須告知新上崗人員實(shí)驗(yàn)室工作的潛在危險(xiǎn) ，進(jìn)行安全教育 ， 直至有能力后方可單獨(dú)工作 。 ? ③ 實(shí)驗(yàn)室主任應(yīng)了解所有工作人員 。 在安排工作區(qū)域時(shí) ， 要根據(jù)人員的工作種類和所涉及的生物材料 ， 對(duì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境做好安全檢查 。 ? ④ 新調(diào)入人員 、 外來合作 、 進(jìn)修和學(xué)習(xí)的人員在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室之前必須經(jīng)過實(shí)驗(yàn)室主任的批準(zhǔn) 。 非實(shí)驗(yàn)室人員和非實(shí)驗(yàn)室物品不得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室 。 ? ⑤ 嚴(yán)格執(zhí)行實(shí)驗(yàn)室工作人員年度采血檢測(cè) HIV抗體和備案制度 ， 工作人員血清應(yīng)長期保留 。 實(shí)驗(yàn)室工作人員從事工作前必須進(jìn)行 HIV抗體和乙肝 、 丙肝等肝炎病毒標(biāo)記物的檢測(cè)；注射乙肝疫苗；每半年 1年進(jìn)行 1次 HIV抗體檢測(cè) ， 并保留血清樣品 。 ? 3） 建立嚴(yán)格的保密制度并定期檢查 ? ① 與 HIV/AIDS相關(guān)檢測(cè)項(xiàng)目的所有資料均應(yīng)嚴(yán)格保密 ， 包括送檢單與檢測(cè)記錄的保管 、 報(bào)告單的發(fā)放和工作人員年度采血檢測(cè)等 。 ? ② 艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室所有人員應(yīng)具有高度的保密意識(shí) 。 不可對(duì)無關(guān)人員透露檢測(cè)結(jié)果 。 ? ③ 保密制度納入年度考核 ， 發(fā)現(xiàn)問題及時(shí)處理并根據(jù)情況修訂保密制度 。 ? 4） 嚴(yán)格質(zhì)量管理 ? ① 按要求做好安全操作的管理以及檢測(cè)試劑的選擇 、 檢測(cè)工作的室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評(píng) 。 ? ② 對(duì)所有檢測(cè)報(bào)告嚴(yán)格把關(guān) ， 杜絕漏報(bào) 、 誤報(bào)現(xiàn)象的發(fā)生 。 ? 5） 對(duì)存放試劑和有毒物區(qū)域的監(jiān)控 ? ① 冷藏柜 、 冰箱 、 培養(yǎng)箱和存放生物試劑 、 化學(xué)危險(xiǎn)品 、 放射性物質(zhì)的容器置于工作人員視線之外的地點(diǎn)時(shí)應(yīng)上鎖 。 ? ② 應(yīng)設(shè)有專門儲(chǔ)存陽性血清 、 質(zhì)控品的低溫冰柜和 /或血清庫毒種庫 ， 并應(yīng)上鎖 ， 專人管理 。 ? 各級(jí)實(shí)驗(yàn)室血清庫 /毒種庫的設(shè)置按有關(guān)規(guī)定執(zhí)行 。 ? 6） 建立應(yīng)付突發(fā)事件的措施 ? ① 在緊急預(yù)案中要包括在緊急事件發(fā)生時(shí)通知實(shí)驗(yàn)室主任 、 設(shè)備管理員 、 實(shí)驗(yàn)室工作人員和設(shè)備安全員 。 ? ② 實(shí)驗(yàn)室主任和設(shè)備安全員要遵循有關(guān)規(guī)定 ， 報(bào)告 、 調(diào)查和處理突發(fā)事件以及可能發(fā)生的意外職業(yè)暴露 。 （ 3）廢棄物處置和消毒 ? 1） 廢棄物處置： ? ① 廢棄物處置應(yīng)符合 《 實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求 》（ GB 194892023） 。 ? ② 從艾滋病實(shí)驗(yàn)室出來的所有廢棄物 ， 包括不再需要的樣品 、 培養(yǎng)物和其它物品 ， 均應(yīng)視為感染性廢棄物 ， 應(yīng)置于專用的密封防漏容器中 ， 安全運(yùn)至消毒室 ， 并在高壓消毒后再進(jìn)行處理或廢棄 。 ? 2） HIV常用的消毒方法 ? 物理消毒方法： ? ① 高壓蒸汽消毒 ， 121℃ ， 保持 15?20min。 ? ② 干燥空氣烘箱消毒 （ 干烤消毒 ） ， 140℃ ， 保持2?3h。 ? HIV常用的化學(xué)消毒方法： ? HIV最常用的化學(xué)消毒劑是 %次氯酸鈉 、 70%乙醇和 2%戊二醛 ， 保持 10?30 min。 ? ① 廢棄物缸： %次氯酸鈉 。 ? ② 生物安全柜工作臺(tái)面和儀器表面： 70%乙醇 。 ? ③ 溢出物： %次氯酸鈉 。 ? ④ 污染的臺(tái)面和器具： 40%甲醛水溶液 ， 也可以用過氧化氫或過氧乙酸 。 器械可用 2%戊二醛消毒 。 一、 配合 VCT(自愿咨詢檢測(cè) )和當(dāng)前防治 工作的需求， 新增有關(guān)內(nèi)容 : ? ? 除常規(guī)檢測(cè)程序以外 ， 可以根據(jù)不同的目的 ， 對(duì) HIV流行強(qiáng)度不同的地區(qū)和不同人群采用不同的替代策略 ， 見表 1。 表 1 HIV 抗體檢測(cè)的替代策略 目的 地區(qū) 人群 替代策略 艾滋病疫情報(bào)告 任何地區(qū) 任何人群 替代策略Ⅰ 高流行地區(qū) 高危人群 替代策略Ⅱ 高流行地區(qū) 一般人群 替代策略Ⅲ VCT 其它地區(qū) 任何人群 替代策略Ⅲ ? （ 1） 替代策略 Ⅰ （ 全國 HIV感染疫情報(bào)告檢測(cè)策略 ） ? 檢測(cè)程序及結(jié)果報(bào)告 ? ① 先用一種篩查試劑檢測(cè) ， 出現(xiàn)陰性反應(yīng)則報(bào)告“ HIV抗體陰性 （ ） ” 。 出現(xiàn)陽性反應(yīng)則用兩種不同原理或不同廠家的試劑復(fù)測(cè) （ 其中包括進(jìn)口第三代 ELISA試劑 ） 。 ? ② 兩種試劑復(fù)測(cè)均為陽性 ， 且其中第三代 ELISA試劑復(fù)測(cè)樣品 OD值與臨界值 （ Cutoff） 的比值（ S/CO） ≥ ， 上報(bào)疫情 （ 附表 4） 。 兩種試劑復(fù)測(cè)結(jié)果均為陽性 ， 但第三代ELISA試劑復(fù)測(cè) S/CO比值在 ? ， 或兩種試劑復(fù)測(cè)結(jié)果呈一陰一陽 ， 應(yīng)進(jìn)一步作確認(rèn)試驗(yàn) ，按照確認(rèn)試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)判斷結(jié)果 （ 圖 3） 。 送檢樣品 用兩種不同原理或不同廠家的試劑復(fù)測(cè)（其中包括進(jìn)口第三代 EL I SA 試劑） 進(jìn)口第三代 EL I SA 試劑復(fù)測(cè) S/ CO 比值≥ 進(jìn)口第三代 EL I SA 試劑復(fù)測(cè)S/ CO 比值 ~ 確認(rèn)試驗(yàn) 判定陽性，上報(bào)疫情 兩種均陽性 兩種均陰性 一陰一陽 陽性反應(yīng) 陰性反應(yīng) 選用篩查試劑 陽性 陰性 不確定，隨訪 判定陰性 圖 3 替代策略 Ⅰ （ HIV感染疫情報(bào)告檢測(cè)策略）檢測(cè)流程 ? 2） 替代策略 Ⅱ （ HIV感染高流行地區(qū)高危人群VCT檢測(cè)策略 ） ? 應(yīng)在確認(rèn)中心實(shí)驗(yàn)室和確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室或以上實(shí)驗(yàn)室指定的篩查實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行 ， 用高質(zhì)量篩查試劑檢測(cè)及判斷結(jié)果 （ 見 ） 。 使用該策略判斷結(jié)果 ， 陽性報(bào)告須由確認(rèn)中心實(shí)驗(yàn)室和確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室或以上實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可的篩查實(shí)驗(yàn)室出具 。 ? 檢測(cè)程序及結(jié)果報(bào)告： ? ① 先用第一種篩查試劑 （ ELISA1） 檢測(cè) ， 出現(xiàn)陰性反應(yīng)報(bào)告 HIV抗體陰性；出現(xiàn)陽性反應(yīng)則報(bào)告 “ HIV抗體待復(fù)查 ” ， 并用第一種和第二種酶聯(lián)試劑 （ ELISA1和 ELISA2） 復(fù)檢 。 ? ② 兩種 ELISA試劑檢測(cè)結(jié)果均陰性則報(bào)告 HIV抗體陰性；兩種 ELISA試劑檢測(cè)結(jié)果均陽性 ， 且S/CO比值均大于或等于 ， 用第三種篩查試劑 （ 高特異性篩查試劑 ） 檢測(cè) ， 如果第三種試劑檢測(cè)結(jié)果為陽性 ， 在符合使用該策略條件的地區(qū)和人群中可以出具 “ HIV1抗體陽性（ +） ” 報(bào)告 ， 使用 “ HIV抗體替代策略檢測(cè)報(bào)告單 ” （ 附表 5） 。 ? ③ 下列情況均需做確認(rèn)試驗(yàn) ， 按照確認(rèn)試驗(yàn)的結(jié)果出報(bào)告：兩種 ELISA試劑檢測(cè)結(jié)果一陰一陽 、 兩種 ELISA試劑檢測(cè)結(jié)果均陽性但一種或二種 S/CO在 ～ 、 第三種篩查試劑檢測(cè)結(jié)果為可疑或陰性 。 陽性 不確定 樣品 EL I SA 1 陽性 兩種均陽性 確認(rèn)試驗(yàn) 陰性 二種 S / CO 均≥ 6 一種或二種 S / C O 1 ~ 5 . 9 陽性 陰性或可疑 高特異性篩查試劑 提供陽性咨詢 出具“ H I V 抗體陽性”報(bào)告 提供咨詢 隨