【正文】 同時檢測，臨界值S/≥1，高值質(zhì)控血清S/≥10，~。以表格式記錄每塊板的外對照實驗結(jié)果，作為QC資料存檔。定量試驗的質(zhì)控方法可參考生化方式。當(dāng)這組數(shù)據(jù)擴(kuò)大到20次有效值時就可以計算RCV的X，s。SI上=（X最小X）/S， SI下=（X最大X）/S，檢查是否出控，SI上、下限≤規(guī)定值，在控；SI上或下限規(guī)定值，失控。【該SOP變動程序】本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的變動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：專業(yè)主管、科主任。這一過程是通過一個反饋環(huán)路進(jìn)行的：；（預(yù)期值）；；；，并說明原因。，解決差異。質(zhì)量控制主要采用質(zhì)控圖進(jìn)行。這種性能數(shù)據(jù)是在按規(guī)程正常進(jìn)行時，按時間順序而抽選出來的，其目的是檢測檢驗過程中變異的可追查性原因。在GLP概念里QC即指IQC，其定義為：由實驗室工作人員采取一定的方法和步驟，連續(xù)評價本室工作的可靠性，旨在監(jiān)測和控制本室常規(guī)工作的精密度，提高批內(nèi)批間樣本檢驗的一致性，以確定檢驗報告是否可靠或可否發(fā)出的一項工作?！净覅^(qū)概念】把定量分析的正常值范圍引入定性分析建立灰區(qū)概念，即將COV值上下的一段區(qū)域定為陽性可疑，需重復(fù)實驗或換試劑重測以確定其陰陽性，如仍落在灰區(qū)范圍內(nèi)則報告+（陽性）。灰區(qū)的設(shè)置有二種：（1177。2s，s為實驗室做室內(nèi)質(zhì)控ROC的s。產(chǎn)生該現(xiàn)象的分子機(jī)理有分子變構(gòu)說和濃度效應(yīng)等推論。【質(zhì)量控制血清】質(zhì)控血清是已有靶值的血清，在每次的常規(guī)檢驗中加入一份或數(shù)份，通過所得結(jié)果來了解本次檢驗的情況。如果出現(xiàn)超過允許誤差范圍的異常結(jié)果，提示該檢驗不合格，應(yīng)尋找原因，糾正后，重檢待測標(biāo)本。衛(wèi)生部臨床檢驗中心制備的乙肝標(biāo)志物質(zhì)控血清，可以在20℃保持半年定值不變。不宜反復(fù)冰融或自行分裝。自制的不定值質(zhì)控血清，在一批質(zhì)控血清將用完之前，需準(zhǔn)備下一批質(zhì)控血清。質(zhì)控制血清分定值和未定值兩種。乙肝標(biāo)志物臨界值的制定，應(yīng)按臨床要求，為臨床提供統(tǒng)一的判斷弱陽性的標(biāo)準(zhǔn)。質(zhì)控血清的制備，每個實驗室可以根據(jù)自己的條件，選用臨床中心提供的質(zhì)控血清，或按以下方法自己制備本室使用的質(zhì)控血清（以乙肝質(zhì)控血清為例）。2. 56℃加熱10小時滅活。4. 用10%的小牛血清或正常人血清（PBS緩沖液）將收集的血清稀釋至所需的濃度。5. 抽濾除菌。不可反復(fù)凍融。如果該試驗還有其它要求，則應(yīng)加所要求濃度的質(zhì)控物。2030次測定結(jié)果刪除177?！臼议g質(zhì)評的方法】，這是目前國內(nèi)外常見的形式，采用定期發(fā)放質(zhì)控物至各實驗室，各實驗室在規(guī)定的日期進(jìn)行檢驗，并將結(jié)果報至組織者（部、省臨檢中心）。其缺點為由于各實驗室吃小灶或互相打電話修改結(jié)果而達(dá)不到真正評價作用。部臨檢中心對乙肝標(biāo)志物ELISA檢驗的室間質(zhì)評采用定期發(fā)放質(zhì)控物至各實驗室，各實驗室在規(guī)定的日期進(jìn)行檢驗，并將檢驗結(jié)果報至部臨檢中心。通過評價，各實驗室了解本室工作質(zhì)量，發(fā)現(xiàn)差距，并設(shè)法改進(jìn)，以不斷提高檢驗質(zhì)量。這就使EQA的結(jié)果不能反映該實驗室日常工作水平。這種方法可以解決實際問題，進(jìn)行現(xiàn)場指導(dǎo)，組織者常因人力、物力的原因而不能經(jīng)常性進(jìn)行?！境煽冇嬎惴椒ā浚簷z驗結(jié)果與預(yù)期結(jié)果一致，得100分，錯誤不得分，總計實驗室的得分。：SI=（實驗室測定值預(yù)期值X）/預(yù)期值的標(biāo)準(zhǔn)差s，SI越小，表明越靠近靶值，成績越好。SI無正負(fù)之分。操作人員 部門主管 質(zhì)量負(fù)責(zé)人姓名 ****** ****** ****** 日期 **年**月**日Ⅶ 免疫金標(biāo)記檢測方法標(biāo)準(zhǔn)操作程序?qū)嶒炇颐Q項目編號制定日期********************年**月**日【目的】保證免疫金標(biāo)技術(shù)檢驗準(zhǔn)確性【本SOP適用范圍】免疫金標(biāo)技術(shù)【該SOP變動程序】本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的變動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：專業(yè)主管、科主任。利用膠體金顆粒的高電子密度及其表面能結(jié)合生物大分子(如抗體、SPA、植物血凝素和刀豆蛋白A等)以 及具有一定顏色等特性，可用光鏡和電鏡對細(xì)胞內(nèi)抗原進(jìn)行定位、定性的研究。試驗單位為三層反應(yīng)盒，第一層為過濾器(濾紙層)，第二層為反應(yīng)膜(NC膜或MC膜)上點加有特異性抗原或抗體，第三層為吸水墊料，有稱此滲濾裝置為滴金反應(yīng)板。試劑盒基本試劑成分有滴金反應(yīng)板、金標(biāo)記試劑及洗滌液。試驗單位為一濾膜條，自上而下分有多個層次。αHCG玻璃纖維—吸尿玻璃纖維。αHCG溶解并帶動它向前移動，結(jié)合尿中HCG至抗βHCG抗體處形成復(fù)合物，并在抗βHCG抗體固定處顯示膠體金特有紅色，提示試驗陽性。試劑盒基本單位僅有一濾膜條，只有一步操作。常采用檸檬酸、抗壞血酸和白磷。目前，有更多的實驗室僅以檸檬酸為還原劑，在檸檬酸還原氯化金時，加入不同量的單寧酸即可獲得大小不同的金顆粒，所制備金顆粒的大小非常一致。[2] 以檸檬酸為還原劑制備8～10 nm直徑的膠體金(Au l0) 125 ml 3 DW煮沸后加入1％ ml，再煮沸5 min， ml％氯化金溶液，100℃水浴15 min，溶液置室溫待用。[4] 白磷為還原劑制備5 nm直徑的膠體金(Au 5) 將120 ml 3DW、 ml％ ml 1 mol/L K2CO3，混合，緩慢攪拌中快速加進(jìn)l ml白磷一乙醚溶液，室溫輕攪拌15 min，100℃水浴30 min后放室溫待用。制備的膠體金其大小和形狀可在電鏡下觀察確定。正常情況下，膠體金溶液應(yīng)清澈而不含任何可見的沉淀或漂浮物，如溶液、試劑、瓶皿等不干凈。因此，為了獲得滿意的膠體金，應(yīng)選擇最純凈的各有關(guān)試劑和液體。制備過程中所用的水以三蒸去離子水最合適，各類器皿均應(yīng)嚴(yán)格清洗，盛膠體金的瓶皿先經(jīng)過硅化則更為理想。4. 膠體金和生物大分子的結(jié)合任何蛋白質(zhì)都能結(jié)合到膠體金顆粒表面，膠體金和蛋白質(zhì)結(jié)合后，并不影響蛋白質(zhì)的反應(yīng)性。[2]膠體金顆粒的包被 以生物大分子包被膠體金顆粒時，首先需要確定其精確用量，即蛋白質(zhì)完全包被膠體金所需蛋白質(zhì)的最小劑量。，(SPA的等電點)待與SPA結(jié)合。然后，分別于每孔中加入250181。1 10％ NaCl，l min后震蕩試管，這時SPA濃度較低的孔中，膠體金由紅色變?yōu)樽仙?，說明SPA的量不足以包被膠體金。[3]膠體金的濃縮純化及儲存 包被好的膠體金可用離心的方法使穩(wěn)定的金顆粒沉淀于管底，而與多余的蛋白分開，使探針得以濃縮和純化。純化2—5nm的金探針時，以125，000g離心45min(4℃)；純化8～15nm直徑金探針時，以60，000g離心45~60min(4℃)。濃縮純化的膠體金探針置4℃保存待用，有效期約6個月。適用范圍一般為定性試驗。定性檢測時單個操作(NC膜條或NC反應(yīng)塊)、檢測快速(膠體金本身為紅色，不需加發(fā)色試劑，陽性反應(yīng)即出現(xiàn)紅色斑點或條帶，整個操只需5—30分鐘)、操作簡便(蘸取或滴加標(biāo)本、試劑即可)、不需特殊設(shè)備(手工)、結(jié)果明確(顯紅色，肉眼觀察)，且金標(biāo)記物穩(wěn)定，冷凍干燥后可在室溫長期保存。金標(biāo)記方法學(xué)的局限性在于不易準(zhǔn)確定量(變異系數(shù)大)、不易自動化分析、試劑成本偏高及質(zhì)量控制困難。，無比較尺度。、重復(fù)性不滿意，試劑盒應(yīng)有低濃度標(biāo)準(zhǔn)測試重復(fù)性。膠體金顯色深淺與被測物濃度有一定相關(guān)性，因此可對被測物進(jìn)行定量檢測。標(biāo)準(zhǔn)色階對比法是以與被測物濃度相對應(yīng)的深淺不同的色帶板與被測反應(yīng)板顯色斑點對比估計被測物濃度；質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)對照法是以質(zhì)控品同時測定對比色澤半定量。質(zhì)控線對比法質(zhì)控線色澤為臨床臨界濃度顯色?！窘饦?biāo)定量】：膜上斑點免疫金標(biāo)顯色終點時用光電比色，：由于反應(yīng)在NC膜上呈橫流推進(jìn)，測定線上反應(yīng)出現(xiàn)的顏色逐漸加深，液流速度、反應(yīng)溫度等為可變因素，很難在規(guī)定時間得到恒定結(jié)