【正文】 以傳統(tǒng)名方作為切入點(diǎn)，以“十八反”代表性反藥配伍組合及其方劑，研究影響方中“十八反”藥對(duì)生物效應(yīng)的因素，探討其效應(yīng)機(jī)制，揭示其基于臨床應(yīng)用的宜忌條件及規(guī)律特點(diǎn)。；從多角度完善豐富中藥“十八反”配伍禁忌理論，指導(dǎo)臨床合理、安全、有效地使用中藥“十八反”藥對(duì)反藥配伍。承擔(dān)單位：北京中醫(yī)藥大學(xué) 南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院負(fù) 責(zé) 人：鐘贛生 研究員 科研骨干：周學(xué)平 教授 孫紅梅 教授 蔣萌王 旭 教授 洪 纓 教授 馬長(zhǎng)華 教授 經(jīng)費(fèi)比例：16%四、年度計(jì)劃研究?jī)?nèi)容預(yù)期目標(biāo)第一年基于“十八反”的中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)挖掘與知識(shí)發(fā)現(xiàn)研究。 歸納以“十八反”為代表的歷代中藥配伍禁忌理論和臨床經(jīng)驗(yàn)； 建立多屬性、多層次的數(shù)據(jù)挖掘模型； 初步評(píng)價(jià)中藥“十八反”各反藥配伍組合反與不反； 初步明確“十八反”代表性反藥配伍組合及方劑配伍的妨害治療效應(yīng)； 明確臨床應(yīng)用的反藥配伍組合的宜忌條件； 在國(guó)內(nèi)外期刊發(fā)表學(xué)術(shù)論文1015篇，其中SCI收錄24篇； 培養(yǎng)博士研究生12名，碩士研究生46名。 建立適宜的中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)挖據(jù)模型； 初步創(chuàng)建我國(guó)中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)庫(kù)； 明確反藥配伍組合致毒/增毒特點(diǎn)及毒性程度； 初步揭示中藥“十八反”配伍前后毒效物質(zhì)基礎(chǔ)研究； 闡明各反藥配伍組合的量—毒—效關(guān)系與特點(diǎn)； 初步發(fā)現(xiàn)各反藥配伍組合的體內(nèi)吸收、分布、代謝、排泄特點(diǎn)； 初步明確中藥“十八反”代表性配伍組合妨害治療的毒效物質(zhì)基礎(chǔ)； 初步闡釋反藥配伍組合在海藻玉壺湯中的宜忌條件與配伍關(guān)系； 在國(guó)內(nèi)外期刊發(fā)表學(xué)術(shù)論文2025篇，其中SCI收錄57篇；申請(qǐng)專(zhuān)利12項(xiàng)；培養(yǎng)博士后1名，博士研究生23名，碩士研究生68名。 發(fā)現(xiàn)十八反各配伍組合的特征性配伍關(guān)系； 完善中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)庫(kù)； 初步揭示反藥配伍組合致毒/增毒/減效作用機(jī)理； 初步闡明反藥配伍組合致毒/增毒/減效的毒效成分； 分析獲得致毒/增毒/減效相關(guān)化學(xué)物質(zhì)； 初步闡明各反藥配伍組合體內(nèi)相互作用機(jī)制； 初步闡明反藥配伍組合產(chǎn)生妨害治療的體內(nèi)作用機(jī)理； 初步揭示反藥配伍組合同方配伍的宜忌關(guān)系； 在國(guó)內(nèi)外期刊發(fā)表學(xué)術(shù)論文2030篇，其中SCI收錄35篇；申請(qǐng)國(guó)家發(fā)明專(zhuān)利23項(xiàng)；培養(yǎng)博士后23名，博士研究生34名，碩士研究生610名。 建立在線的項(xiàng)目研究數(shù)據(jù)匯交管理平臺(tái)； 完善中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)庫(kù)； 從細(xì)胞分子水平揭示反藥配伍組合致毒/增毒/減效作用機(jī)理； 獲得毒效化學(xué)成分，以供分析；同時(shí)豐富化學(xué)物質(zhì)庫(kù)； 明確十八反配伍組合對(duì)P450酶活性、mRNA及蛋白質(zhì)表達(dá)水平的影響； 揭示“十八反”代表性反藥配伍組合及方劑配伍前后對(duì)相關(guān)成分吸收、分布、排泄等環(huán)節(jié)的變化規(guī)律； 揭示其臨床應(yīng)用的宜忌條件與配伍關(guān)系； 在國(guó)內(nèi)外期刊發(fā)表學(xué)術(shù)論文2030篇，其中SCI收錄68篇； 培養(yǎng)博士研究生46名，碩士研究生810名。 豐富完善在線的項(xiàng)目研究數(shù)據(jù)匯交管理平臺(tái)； 建立較為完善的中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)庫(kù)； 創(chuàng)建中藥配伍禁忌研究模式，為同類(lèi)研究提供示范性； 通過(guò)中藥“十八反”配伍關(guān)系及其科學(xué)實(shí)質(zhì)的系統(tǒng)研究，形成一個(gè)有結(jié)論性的、能夠指導(dǎo)臨床實(shí)踐的、具有理論性的研究成果。 在國(guó)內(nèi)外期刊發(fā)表學(xué)術(shù)論文2530篇，其中SCI收錄58篇； 培養(yǎng)博士后23名，博士研究生35名，碩士研究生810名。一、研究?jī)?nèi)容本項(xiàng)目以古今信息數(shù)據(jù)挖掘?yàn)橹?，以藥物安全性評(píng)價(jià)、毒理毒代、毒效物質(zhì)、藥物相互作用等現(xiàn)代研究方法，揭示“十八反”反藥配伍組合的毒效表征及其機(jī)理；評(píng)價(jià)中醫(yī)臨床常用代表性反藥組合及其同方配伍妨害治療的效應(yīng)機(jī)制與理論基礎(chǔ)；基于臨床從反藥配伍及同方配伍不同層面揭示宜忌條件及配伍關(guān)系，從而對(duì)科學(xué)假說(shuō)進(jìn)行驗(yàn)證，揭示其科學(xué)內(nèi)涵，提煉形成創(chuàng)新知識(shí)和豐富發(fā)展中藥配伍禁忌理論。擬解決關(guān)鍵科學(xué)問(wèn)題客觀界定和明確回答中藥“十八反”各反藥配伍組合“反”與“不反”；系統(tǒng)揭示中藥“十八反”各反藥配伍組合“反”的化學(xué)實(shí)質(zhì)與生物學(xué)基礎(chǔ)；科學(xué)闡明中藥“十八反”代表性反藥組合同方配伍的妨害與宜忌條件； 闡明以十八反為代表的中藥配伍禁忌理論的科學(xué)內(nèi)涵。回顧五十年來(lái)的相關(guān)研究成果和研究經(jīng)驗(yàn)，為項(xiàng)目研究參考。（2）通過(guò)規(guī)范文獻(xiàn)信息，建立基于“十八反”的中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)庫(kù)，主要包含“十八反”中藥相關(guān)的歷史文獻(xiàn)、中藥和方劑資料、臨床案例，以及現(xiàn)代研究獲得的物質(zhì)基礎(chǔ)、效應(yīng)、毒性相關(guān)數(shù)據(jù)信息?！笆朔础敝兴幣湮殛P(guān)系的數(shù)據(jù)挖掘研究探索改進(jìn)更適用于方藥特征的挖掘方法，建立適宜于中藥配伍多屬性、多層次關(guān)系研究的數(shù)據(jù)挖掘模型，進(jìn)行挖掘算法和模型的適應(yīng)性評(píng)價(jià)。“十八反”同方配伍的特征條件和應(yīng)用特點(diǎn) “十八反”中藥的臨床應(yīng)用主要表現(xiàn)為在方劑中與其他藥物配伍共同發(fā)揮功效。建立項(xiàng)目研究數(shù)據(jù)匯交管理平臺(tái)基于項(xiàng)目研究的數(shù)據(jù)特點(diǎn)，建立融數(shù)據(jù)存貯、展示、匯交、共享、分析、管理等功能為一體的數(shù)據(jù)管理平臺(tái)，形成多維、動(dòng)態(tài)、實(shí)時(shí)、在線的EScience項(xiàng)目研究模式，使各課題之間形成有機(jī)整體，并為整合文獻(xiàn)和實(shí)驗(yàn)信息，豐富中藥配伍禁忌理論提供支撐。經(jīng)典毒理學(xué)評(píng)價(jià)體系的建立及其反藥配伍毒性評(píng)價(jià)依據(jù)《中華人民共和國(guó)藥典》的劑量范圍，建立基于整體、器官、細(xì)胞及分子水平的毒性評(píng)價(jià)體系，觀察中藥“十八反“配伍前后毒性發(fā)生與否及其致毒程度，評(píng)價(jià)毒性作用靶部位；考察不同給藥劑量、不同檢測(cè)指標(biāo)配伍毒性的產(chǎn)生及變化?？焖俸Y查體系的建立及其反藥配伍毒性篩查（1）基于模式生物的毒性評(píng)價(jià)與快速篩查。（2）基于體外高通量模型的快速篩查。針對(duì)代謝酶干擾構(gòu)建含CYP3A4 、CYP1ACYP1A2等調(diào)控區(qū)應(yīng)答元件序列的報(bào)告基因細(xì)胞模型，快速篩選藥物配伍對(duì)代謝酶的影響；針對(duì)神經(jīng)毒性，構(gòu)建神經(jīng)軸突生長(zhǎng)、神經(jīng)細(xì)胞毒、神經(jīng)遞質(zhì)、MAO和AChE快速篩選技術(shù)。采用已建立的整體動(dòng)物與體外評(píng)價(jià)方法和模型，系統(tǒng)研究中藥十八反基于常用劑量的單次給藥及多次給藥后產(chǎn)生的毒性效應(yīng)、毒性作用靶器官、靶組織等；利用非線性生物信息學(xué)技術(shù)進(jìn)行毒理數(shù)據(jù)的整合與分析，評(píng)估其致毒增毒的特點(diǎn)及毒性程度，初步判斷其可能的致毒/增毒機(jī)理，客觀界定中藥十八反配伍反與不反，為深入研究其致毒/增毒機(jī)制提供依據(jù)與指引。遵從中醫(yī)臨床主要傳統(tǒng)湯劑/散劑的不同劑型用法，合理設(shè)計(jì)供試樣品的制備方案；在毒效評(píng)價(jià)引導(dǎo)下，逐級(jí)分離/分析毒效物質(zhì)基礎(chǔ)，建立化學(xué)物質(zhì)庫(kù)，為分析其配伍前后毒效物質(zhì)變化及規(guī)律奠定基礎(chǔ)。采用生物效應(yīng)導(dǎo)向的現(xiàn)代化學(xué)物質(zhì)分離技術(shù)、定向剔除技術(shù)及生物分離分析等技術(shù)等開(kāi)展配伍前后變化的毒效物質(zhì)研究。中藥“十八反”配伍致毒/增毒的毒效物質(zhì)相關(guān)性研究采用多因素非線性回歸、人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)、智能機(jī)器學(xué)習(xí)等方法，對(duì)中藥十八反配伍前后化學(xué)物質(zhì)變化與毒效作用進(jìn)行關(guān)聯(lián)研究，分析得到致毒/增毒/減效相關(guān)化學(xué)物質(zhì)，并通過(guò)化學(xué)物質(zhì)分離制備技術(shù)對(duì)其進(jìn)行富集，采用相應(yīng)生物效應(yīng)指標(biāo)進(jìn)行關(guān)聯(lián)關(guān)系研究，以闡明其毒效物質(zhì)，揭示其化學(xué)本質(zhì)及宜忌配伍條件。計(jì)算藥物配伍前后的中毒劑量、有效量和安全范圍，結(jié)合各毒效相關(guān)成分的含量變化，對(duì)其量毒效數(shù)據(jù)進(jìn)行非線性模擬建模，考察和評(píng)價(jià)反藥配伍前后在體內(nèi)致毒物質(zhì)的代謝速率、累積規(guī)律和蓄積致毒的時(shí)空關(guān)系，揭示其量毒時(shí)效關(guān)系及其變化規(guī)律。（五）中藥“十八反”各配伍組合體內(nèi)過(guò)程及相互作用研究依據(jù)藥物體內(nèi)代謝過(guò)程的各環(huán)節(jié)，對(duì)“十八反”各配伍組合所含化學(xué)成分配伍前后吸收特點(diǎn)、分布規(guī)律、代謝轉(zhuǎn)化特征、毒效物質(zhì)排泄及蓄積致毒等進(jìn)行系統(tǒng)研究，闡明其致毒/增毒的毒效表征、體內(nèi)毒效物質(zhì)、相互作用機(jī)制、影響因素及產(chǎn)生條件，以揭示其配伍禁忌的科學(xué)本質(zhì)。應(yīng)用色譜聯(lián)用分析技術(shù)，定性定量研究體液中的毒效成分及內(nèi)源性代謝產(chǎn)物，進(jìn)行同步藥物濃度及藥效作用相關(guān)分析，結(jié)合模式識(shí)別等化學(xué)信息學(xué)技術(shù)，分析生物體給予“十八反”藥物前后代謝指紋圖譜的差異，獲得相應(yīng)的生物標(biāo)志物群，確定藥物毒性的特征代謝模式及其生物標(biāo)志物，確定與某些毒效學(xué)指標(biāo)密切相關(guān)成分，明確其生物學(xué)基礎(chǔ)與化學(xué)本質(zhì)。然而，古人對(duì)于相反涵義還存在著另外一種認(rèn)識(shí)，《本草衍義補(bǔ)遺》稱(chēng)：“(人參)與藜蘆相反，若服一兩參，入藜蘆一錢(qián)，其一兩參虛費(fèi)矣！戒之！”，其他醫(yī)家也有類(lèi)似這種“相反藥物配伍藥效抵消”的見(jiàn)解。為了提供相關(guān)妨害治療研究的理論基礎(chǔ)，本課題擬較全面收集梳理十八反中藥配伍禁忌的古今文獻(xiàn)，基于梳理并提取歷代醫(yī)家、對(duì)“十八反”中藥的臨床實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，現(xiàn)代名家醫(yī)案、臨床報(bào)道、醫(yī)院處方和實(shí)驗(yàn)研究中有關(guān)“十八反”中藥物質(zhì)基礎(chǔ)、療效及藥理效應(yīng)、毒性等妨害治療的相關(guān)信息，通過(guò)數(shù)據(jù)挖掘和知識(shí)發(fā)現(xiàn)尋找其潛在規(guī)律?！笆朔础迸湮榉梁χ委熥饔玫乃幮W(xué)評(píng)價(jià)研究利用能較準(zhǔn)確、客觀反映臨床實(shí)際的動(dòng)物模型及藥效指標(biāo)，觀察“十八反”代表性藥對(duì)配伍組合及其含相反藥對(duì)對(duì)模型動(dòng)物藥效的干預(yù)影響，評(píng)估相反組對(duì)（或和復(fù)方劑）在病理生理?xiàng)l件下是否存在干擾或妨害組對(duì)內(nèi)藥物的藥效作用，探索其可能的影響因素?！笆朔础迸湮榉梁χ委熥饔玫纳飳W(xué)基礎(chǔ)研究根據(jù)上述研究結(jié)果或結(jié)論選擇相應(yīng)的動(dòng)物模型和細(xì)胞模型，結(jié)合形態(tài)和功能，從整體、器官、細(xì)胞、分子和基因等不同層次考察配伍藥物或相關(guān)成分產(chǎn)生妨害治療作用的主要藥理機(jī)理和部分生物學(xué)機(jī)制。從現(xiàn)代臨床研究文獻(xiàn)的角度，鑒定探討是否存在“十八反”反藥藥對(duì)配伍組合的臨床使用情況，再進(jìn)一步分析“十八反”藥對(duì)配伍組合、劑量及其方劑的臨床應(yīng)用范圍（病證及分布趨勢(shì)）、特定適用對(duì)象及使用條件。探索“十八反”藥對(duì)及其方劑治療腫瘤臨床研究文獻(xiàn)中使用現(xiàn)狀、配對(duì)規(guī)律、使用劑量、適用病癥的關(guān)聯(lián)性。本著循證醫(yī)學(xué)系統(tǒng)評(píng)價(jià)的思想，根據(jù)已經(jīng)發(fā)表的臨床研究文獻(xiàn)，系統(tǒng)地評(píng)價(jià)“十八反”藥對(duì)配伍組合及其方劑在臨床治療領(lǐng)域的療效和安全性，為“十八反”藥物使用宜忌的基礎(chǔ)研究及進(jìn)一步的臨床應(yīng)用研究提供證據(jù)。2010年版《中國(guó)藥典用于癭瘤，瘰疬，睪丸腫痛，痰飲水腫”，因此，選擇反映藥物功效，又有臨床基礎(chǔ)海藻玉壺湯為切入點(diǎn)，研究海藻和甘草配伍應(yīng)用的宜忌條件。（2）以古方甘遂半夏湯為切入點(diǎn)，基于臨床用藥特點(diǎn)，設(shè)計(jì)特定的病理模型，從方藥結(jié)合的角度，探討不同給藥劑量、炮制品種、給藥次數(shù)、配伍比例、給藥劑型等因素對(duì)方中“十八反”藥對(duì)配伍組合（甘遂與甘草）生物效應(yīng)的影響，探索其用藥特點(diǎn)及規(guī)律。在各課題組的研究結(jié)果基礎(chǔ)上，基于計(jì)算機(jī)人工智能技術(shù)，對(duì)各種實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析、比較、分類(lèi)研究，提取不同藥對(duì)配伍間共同及差異部分，與中醫(yī)藥配伍理論和藥性理論有機(jī)聯(lián)系與密切關(guān)聯(lián)，形成中藥“十八反”配伍關(guān)系與變化規(guī)律的知識(shí)體系。37 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