【正文】 研究參考。針對(duì)代謝酶干擾構(gòu)建含CYP3A4 、CYP1ACYP1A2等調(diào)控區(qū)應(yīng)答元件序列的報(bào)告基因細(xì)胞模型，快速篩選藥物配伍對(duì)代謝酶的影響；針對(duì)神經(jīng)毒性，構(gòu)建神經(jīng)軸突生長(zhǎng)、神經(jīng)細(xì)胞毒、神經(jīng)遞質(zhì)、MAO和AChE快速篩選技術(shù)。然而，古人對(duì)于相反涵義還存在著另外一種認(rèn)識(shí)，《本草衍義補(bǔ)遺》稱：“(人參)與藜蘆相反，若服一兩參，入藜蘆一錢，其一兩參虛費(fèi)矣！戒之！”，其他醫(yī)家也有類似這種“相反藥物配伍藥效抵消”的見解。用于癭瘤，瘰疬，睪丸腫痛，痰飲水腫”，因此，選擇反映藥物功效，又有臨床基礎(chǔ)海藻玉壺湯為切入點(diǎn)，研究海藻和甘草配伍應(yīng)用的宜忌條件。本著循證醫(yī)學(xué)系統(tǒng)評(píng)價(jià)的思想，根據(jù)已經(jīng)發(fā)表的臨床研究文獻(xiàn)，系統(tǒng)地評(píng)價(jià)“十八反”藥對(duì)配伍組合及其方劑在臨床治療領(lǐng)域的療效和安全性，為“十八反”藥物使用宜忌的基礎(chǔ)研究及進(jìn)一步的臨床應(yīng)用研究提供證據(jù)。（五）中藥“十八反”各配伍組合體內(nèi)過程及相互作用研究依據(jù)藥物體內(nèi)代謝過程的各環(huán)節(jié)，對(duì)“十八反”各配伍組合所含化學(xué)成分配伍前后吸收特點(diǎn)、分布規(guī)律、代謝轉(zhuǎn)化特征、毒效物質(zhì)排泄及蓄積致毒等進(jìn)行系統(tǒng)研究，闡明其致毒/增毒的毒效表征、體內(nèi)毒效物質(zhì)、相互作用機(jī)制、影響因素及產(chǎn)生條件，以揭示其配伍禁忌的科學(xué)本質(zhì)。快速篩查體系的建立及其反藥配伍毒性篩查（1）基于模式生物的毒性評(píng)價(jià)與快速篩查。一、研究?jī)?nèi)容本項(xiàng)目以古今信息數(shù)據(jù)挖掘?yàn)橹?，以藥物安全性評(píng)價(jià)、毒理毒代、毒效物質(zhì)、藥物相互作用等現(xiàn)代研究方法，揭示“十八反”反藥配伍組合的毒效表征及其機(jī)理；評(píng)價(jià)中醫(yī)臨床常用代表性反藥組合及其同方配伍妨害治療的效應(yīng)機(jī)制與理論基礎(chǔ)；基于臨床從反藥配伍及同方配伍不同層面揭示宜忌條件及配伍關(guān)系，從而對(duì)科學(xué)假說進(jìn)行驗(yàn)證，揭示其科學(xué)內(nèi)涵，提煉形成創(chuàng)新知識(shí)和豐富發(fā)展中藥配伍禁忌理論。；從多角度完善豐富中藥“十八反”配伍禁忌理論，指導(dǎo)臨床合理、安全、有效地使用中藥“十八反”藥對(duì)反藥配伍。探索“十八反”藥對(duì)及其方劑治療腫瘤臨床研究文獻(xiàn)中使用現(xiàn)狀、配對(duì)規(guī)律、使用劑量、適用病癥的關(guān)聯(lián)性。以此闡述“中藥藥對(duì)兩藥配伍使用時(shí)即使既使不發(fā)生毒牲性增強(qiáng)現(xiàn)象也不等于安全有效，妨害治療的藥物也不適宜相互配合使用”的學(xué)術(shù)觀點(diǎn)，為十八反配伍禁忌的新涵義的認(rèn)識(shí)提供科學(xué)依據(jù)，最終從妨害治療角度揭示中藥“十八反”反與不反、如何反以及為什么反的科學(xué)內(nèi)涵。預(yù)期目標(biāo)通過安全性評(píng)價(jià)體系的建立與毒性評(píng)價(jià)，構(gòu)建基于PXR～CYP3A通路的細(xì)胞篩選模型，從動(dòng)物和細(xì)胞兩個(gè)層面建立“諸參辛芍叛藜蘆”各單藥及與藜蘆配伍后毒性成分的毒效關(guān)系，明確回答“諸參辛芍叛藜蘆”配伍反與不反；揭示“諸參辛芍叛藜蘆”配伍組合致毒/增毒物質(zhì)基礎(chǔ)。“藻戟遂芫”與甘草各反藥配伍組合致毒/增毒的分子機(jī)制研究采用細(xì)胞、分子生物學(xué)技術(shù)，研究該組反藥配伍組合對(duì)腸上皮細(xì)胞、肝細(xì)胞功能損傷和凋亡誘導(dǎo)的毒性作用?！鞍胧V貝蘞及攻烏”致毒/增毒物質(zhì)基礎(chǔ)研究采用體外化學(xué)組與藥物代謝物組學(xué)等方法，研究“半蔞貝蘞及攻烏”配伍致毒/增毒的化學(xué)實(shí)質(zhì)；明確藥物配伍在體外發(fā)生的化學(xué)成分變化，發(fā)現(xiàn)藥物進(jìn)入體內(nèi)后藥物發(fā)生的代謝物變化。技術(shù)路線互為補(bǔ)充相互驗(yàn)證 基于“十八反”的中藥配伍禁忌理論基礎(chǔ)研究安全性評(píng)價(jià) 1. 單次給藥毒性評(píng)價(jià) 2. 多次給藥毒性評(píng)價(jià) 3. 安全藥理評(píng)價(jià)快速篩查毒性評(píng)價(jià) 1. 高內(nèi)涵評(píng)價(jià) 2. 高通量篩選 3. 模式生物評(píng)價(jià) 客觀界定中藥“十八反”反藥配伍組合“反”與“不反” 客觀評(píng)價(jià)反藥配伍組合致毒/增毒特點(diǎn)及其毒性程度 揭示中藥“十八反”配伍致毒/增毒的作用機(jī)理 闡明中藥“十八反”妨害治療的效應(yīng)機(jī)制與理論基礎(chǔ) 闡釋含有“十八反”的代表性方劑宜忌條件與配伍關(guān)系物質(zhì)基礎(chǔ)研究1. 毒效物質(zhì)基礎(chǔ)研究 2. 化學(xué)物質(zhì)庫的建立妨害治療基礎(chǔ)研究 1. 妨害作用的藥效學(xué)評(píng)價(jià) 2. 妨害作用的化學(xué)實(shí)質(zhì)研究 3. 妨害作用的生物學(xué)基礎(chǔ)研究“十八反”反藥配伍前后毒效評(píng)價(jià)回答 ☆ “十八反”藥對(duì)反與不反？ ☆ 配伍致毒/增毒/減效程度與特點(diǎn)？量毒效關(guān)系研究1. 量毒關(guān)系研究 2. 量效關(guān)系研究毒效機(jī)制研究1. 體內(nèi)過程研究 2. 藥物相互作用研究反藥配伍的宜忌條件研究 1. 臨床文獻(xiàn)回顧性調(diào)查 2. 適宜病證效應(yīng)評(píng)價(jià) 3. 宜忌條件與配伍關(guān)系揭示課題一 基于 “十八反”的中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)挖掘與知識(shí)發(fā)現(xiàn)研究主要研究?jī)?nèi)容圍繞“十八反”中藥配伍禁忌理論基礎(chǔ)研究的總體目標(biāo)，立足于中醫(yī)藥配伍理論和豐富的歷史經(jīng)驗(yàn)，開展基于“十八反”的中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)挖掘與知識(shí)發(fā)現(xiàn)研究，通過“十八反”中藥文獻(xiàn)數(shù)據(jù)的收集考證，規(guī)范文獻(xiàn)信息，建立基于“十八反”配伍禁忌相關(guān)數(shù)據(jù)庫；整合多種數(shù)據(jù)挖掘技術(shù)，建立適宜有效的數(shù)據(jù)挖掘平臺(tái)，進(jìn)行“十八反”中藥配伍關(guān)系的數(shù)據(jù)挖掘研究，尋求其潛在規(guī)律；通過“十八反”同方配伍的方劑分析，探討配伍禁忌的轉(zhuǎn)化條件和應(yīng)用特點(diǎn)；建立研究數(shù)據(jù)匯交管理平臺(tái)，使各課題之間形成有機(jī)整體，并為整合文獻(xiàn)和實(shí)驗(yàn)信息、形成知識(shí)發(fā)現(xiàn)體系、豐富中藥配伍禁忌理論提供支撐?！笆朔础笔怯袟l件的、動(dòng)態(tài)的配伍禁忌，這是有別于西藥禁忌的一個(gè)重要特點(diǎn)，即在特定的病理?xiàng)l件、特定的配伍關(guān)系和特定的給藥方式下，“十八反”中藥能有限利用。（二）子課題設(shè)置思路圍繞“十八反”配伍關(guān)系研究的關(guān)鍵科學(xué)問題，在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下，創(chuàng)建客觀適宜的研究模式：從古今中醫(yī)藥信息資源中挖掘 以“十八反”為代表的中藥配伍禁忌的配伍關(guān)系特點(diǎn)和毒性反應(yīng)等科學(xué)內(nèi)涵；針對(duì)其致毒、增毒特點(diǎn)，集成毒理學(xué)、化學(xué)、藥效學(xué)、毒代動(dòng)力學(xué)、生物信息學(xué)等多學(xué)科方法，揭示“十八反”烏頭組、甘草組、藜蘆組各反藥組合的毒效表征及其機(jī)理；從妨害治療的角度評(píng)價(jià)“十八反”組合影響藥效的特點(diǎn)，從反藥配伍組合及方劑配伍角度分析反藥配伍應(yīng)用的宜忌條件及配伍關(guān)系。設(shè)計(jì)特征性關(guān)聯(lián)檢索策略，為本項(xiàng)目研究開展提供堅(jiān)實(shí)的數(shù)據(jù)基礎(chǔ)?！鞍胧V貝蘞及攻烏”致毒/增毒物質(zhì)生物學(xué)機(jī)制研究采用代謝組學(xué)及胚胎干細(xì)胞等技術(shù)，考察“半蔞貝蘞及攻烏”相反配伍及其毒性成分引起的代謝組學(xué)變化，明確相反配伍致毒/增毒的生物學(xué)機(jī)制。在國(guó)內(nèi)外學(xué)術(shù)核心期刊發(fā)表論文30–40篇，其中SCI收錄10–15篇；申請(qǐng)國(guó)家發(fā)明專利1–2項(xiàng)；培養(yǎng)博士后2–3名，博士研究生3–4名，碩士研究生8–10名。揭示“諸參辛芍叛藜蘆”配伍組合致毒/增毒物質(zhì)基礎(chǔ)。同時(shí)，分析藥物性味歸經(jīng)、升降沉浮等屬性與劑量比例、功效特點(diǎn)、毒性反應(yīng)的配伍關(guān)系，探索“十八反”中藥區(qū)別于其他中藥和藥對(duì)的特殊屬性。一部》中記載的海藻功能主治是“消痰軟堅(jiān)散結(jié)，利水消腫。第二年基于文獻(xiàn)信息數(shù)據(jù)結(jié)合實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果， 進(jìn)行中藥“十八反”配伍關(guān)系的數(shù)據(jù)挖掘研究；中藥“十八反”在方劑中的應(yīng)用 特點(diǎn)與知識(shí)發(fā)現(xiàn)；基于古今文獻(xiàn)信息和研究結(jié)果信息的集成和分析，初步創(chuàng)建我國(guó)中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)庫；反藥配伍組合致毒/增毒特點(diǎn)及毒性程度研究；中藥“十八反”配伍前后毒效物質(zhì)基礎(chǔ)研究；中藥“十八反”各反藥配伍量毒時(shí)效關(guān)系研究中藥“十八反”體內(nèi)過程研究；“十八反”代表性反藥配伍組合及方劑妨害治療的物質(zhì)基礎(chǔ)研究；選擇含有反藥配伍的代表性方劑海藻玉壺湯，研究其宜忌條件與配伍關(guān)系。收集整理與本項(xiàng)目研究相關(guān)的古今文獻(xiàn)，考證各“十八反”中藥的衍化過程，整理歸納歷代醫(yī)家對(duì)“十八反”中藥的理論闡述、歷代相反藥項(xiàng)的范圍和臨床實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，現(xiàn)代名家醫(yī)案、臨床報(bào)道、醫(yī)院處方和實(shí)驗(yàn)研究文獻(xiàn)，分析提取以“十八反”為代表的配伍禁忌相關(guān)內(nèi)容，探討其來源、范圍、現(xiàn)狀和有爭(zhēng)議的問題。安全藥理學(xué)評(píng)價(jià)體系建立及其反藥配伍毒性評(píng)價(jià)通過安全藥理學(xué)方法評(píng)價(jià)“十八反”配伍前后產(chǎn)生的與治療目的無關(guān)的效應(yīng)，主要包括觀察指標(biāo)：精神神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)等，研究其致毒/增毒類型和毒性程度。我們前期的實(shí)驗(yàn)研究證明：有的相反組對(duì)（或在方劑中）可能干擾或妨害組對(duì)內(nèi)藥物的某些藥效。本課題選擇甲狀腺腫大動(dòng)物模型，通過研究海藻玉壺湯中，海藻和甘草在不同給藥劑量、不同劑量配比、不同炮制品種等條件下，對(duì)模型動(dòng)物的一般生理、血液生化指標(biāo)以及組織器官的影響，探討基于臨床應(yīng)用的海藻與甘草配伍對(duì)動(dòng)物機(jī)體生物效應(yīng)影響的宜忌條件，選擇具有顯著效果的配伍條件組合，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)一步從甲狀腺合成、儲(chǔ)存、釋放、調(diào)控等方面進(jìn)行藥效機(jī)制的研究，并從整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和離體實(shí)驗(yàn)兩個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行毒性機(jī)制的探討，以期闡明海藻玉壺湯臨床應(yīng)用的宜忌條件和作用規(guī)律。（2）從文獻(xiàn)角度進(jìn)行“十八反”配伍及其方劑的治療性臨床研究的療效和安全性的評(píng)價(jià)。評(píng)價(jià)反藥配伍前后經(jīng)不同環(huán)節(jié)體外煎煮、體內(nèi)代謝過程、體內(nèi)靶器官等環(huán)節(jié)，毒性物質(zhì)體內(nèi)外的定性定量變化，分析其動(dòng)態(tài)變化過程，闡明配伍毒性物質(zhì)含量毒性間的關(guān)系，定量表征其致毒增毒程度。通過單次及多次給藥毒性研究，以LD50、血常規(guī)、血生化、尿常規(guī)、尿生化、病理組織學(xué)檢查等指標(biāo)為依據(jù)，獲得毒性評(píng)價(jià)結(jié)果，為進(jìn)一步研究提供依據(jù)與指引。高質(zhì)量完成項(xiàng)目。；建立基于臨床應(yīng)用的中藥“十八反”宜忌條件的研究平臺(tái)，為研究相反藥藥對(duì)配伍組合臨床應(yīng)用宜忌條件提供研究思路與方法。從現(xiàn)代臨床研究的角度反映“十八反”藥對(duì)配伍組合及其方劑的臨床治療應(yīng)用的情況現(xiàn)狀。通過文獻(xiàn)挖掘和知識(shí)發(fā)現(xiàn)尋找中藥“十八反”配伍應(yīng)用時(shí)影響相反組對(duì)（或方劑）內(nèi)藥物療效的數(shù)據(jù)信息及潛在規(guī)律；在病理生理?xiàng)l件下評(píng)估“十八反”代表性反藥藥對(duì)配伍組合及其含相反藥對(duì)方劑是否存在干擾、改變、降低或消除藥效的作用，探索影響因素；考察相關(guān)藥對(duì)反藥配伍前后化學(xué)成分的變化規(guī)律及體內(nèi)相互作用過程，研究相反配伍妨害療效的作用機(jī)理和生物學(xué)基礎(chǔ)。為臨床合理用藥提供理論依據(jù)。利用中藥多成分同步定量分析技術(shù)，探討反藥配伍中多成分配伍前后體內(nèi)動(dòng)力學(xué)參數(shù)的差異，分析其配伍致毒增毒的原因及其相互作用；采用體內(nèi)體外方法，研究反藥配伍后吸收轉(zhuǎn)運(yùn)過程及其相互作用機(jī)理；利用常規(guī)組織分布研究方法結(jié)合微透析技術(shù)，分析毒性靶器官與非毒性靶器官中成分差別，與毒效評(píng)價(jià)研究相結(jié)合闡明甘草組反藥配伍毒效物質(zhì)基礎(chǔ)；通過整體、在體、離體等多個(gè)層次，研究反藥配伍組合體內(nèi)外代謝途徑，明確本組藥物配伍對(duì)代謝酶的影響及其相互作用機(jī)理；探討反藥配伍對(duì)藥物排泄相關(guān)蛋白的影響及其體內(nèi)排泄經(jīng)時(shí)變化過程及其相互作用機(jī)理?！鞍胧V貝蘞及攻烏”毒性評(píng)價(jià)研究采用經(jīng)典毒理學(xué)、毒性快速篩查技術(shù)、潛在毒性發(fā)現(xiàn)技術(shù)等相結(jié)合，進(jìn)行“半蔞貝蘞及攻烏”配伍毒性評(píng)價(jià)研究，確認(rèn)已知毒性，發(fā)現(xiàn)潛在毒性。技術(shù)方法創(chuàng)新 （1）建立適宜于中藥