【正文】 據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)一步從甲狀腺合成、儲(chǔ)存、釋放、調(diào)控等方面進(jìn)行藥效機(jī)制的研究，并從整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和離體實(shí)驗(yàn)兩個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行毒性機(jī)制的探討，以期闡明海藻玉壺湯臨床應(yīng)用的宜忌條件和作用規(guī)律。一部》中記載的海藻功能主治是“消痰軟堅(jiān)散結(jié)，利水消腫。從實(shí)驗(yàn)研究方面，以相關(guān)疾病模型為載體，方藥結(jié)合研究中藥“十八反”配伍應(yīng)用的宜忌條件（1）以古方海藻玉壺湯為切入點(diǎn)，基于臨床用藥特點(diǎn)，設(shè)計(jì)特定的病理模型，從方藥結(jié)合的角度，探討不同給藥劑量、配伍比例等因素對(duì)方中“十八反”藥對(duì)配伍組合（海藻與甘草）生物效應(yīng)的影響，探索其用藥特點(diǎn)及規(guī)律。（2）從文獻(xiàn)角度進(jìn)行“十八反”配伍及其方劑的治療性臨床研究的療效和安全性的評(píng)價(jià)。從現(xiàn)代臨床研究的角度反映“十八反”藥對(duì)配伍組合及其方劑的臨床治療應(yīng)用的情況現(xiàn)狀。承擔(dān)單位：中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院 中科院長(zhǎng)春應(yīng)化所負(fù) 責(zé) 人：林 娜 研究員科研骨干：劉志強(qiáng) 研究員 彭春龍 研究員 宋鳳瑞 教授 隋峰 副研究員經(jīng)費(fèi)比例：16%課題六 基于臨床應(yīng)用的中藥”“十八反””宜忌條件及配伍關(guān)系研究主要研究?jī)?nèi)容從文獻(xiàn)研究方面分析評(píng)價(jià)中藥“十八反”配伍臨床應(yīng)用的療效和安全性（1）“十八反”配伍及其方劑的臨床應(yīng)用范圍及文獻(xiàn)特征分析。國(guó)內(nèi)外學(xué)術(shù)期刊發(fā)表研究論文20~25篇，其中被SCI收錄5~10篇。預(yù)期目標(biāo)完成研究代表性“十八反”配伍組合的妨害效應(yīng)研究，探索妨害治療的存在條件，從妨害治療角度闡明闡述“十八反”的配伍減效機(jī)制；揭示“十八反”配伍妨害效應(yīng)的化學(xué)實(shí)質(zhì)及其相互作用規(guī)律，并闡明妨害效應(yīng)的生物學(xué)基礎(chǔ)；闡明代表性“十八反”配伍組合及其方劑妨害治療的理論基礎(chǔ)。“十八反”配伍妨害治療作用的化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)研究采用化學(xué)組學(xué)、藥代動(dòng)力學(xué)、藥物代謝組學(xué)研究方法，考察“十八反”配伍前后體外化學(xué)成分的變化規(guī)律及配伍對(duì)入體成分的吸收、分布、代謝、排泄的影響，明確“十八反”代表性組對(duì)配伍妨害藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)。同時(shí)，分析藥物性味歸經(jīng)、升降沉浮等屬性與劑量比例、功效特點(diǎn)、毒性反應(yīng)的配伍關(guān)系，探索“十八反”中藥區(qū)別于其他中藥和藥對(duì)的特殊屬性。我們前期的實(shí)驗(yàn)研究證明：有的相反組對(duì)（或在方劑中）可能干擾或妨害組對(duì)內(nèi)藥物的某些藥效。“十八反”配伍妨害治療作用的文獻(xiàn)挖掘中藥十八反是傳統(tǒng)的中藥配伍禁忌，“相反配伍將致毒性增強(qiáng)或產(chǎn)生劇烈毒性”相沿成為十八反的主要涵義。通過文獻(xiàn)挖掘和知識(shí)發(fā)現(xiàn)尋找中藥“十八反”配伍應(yīng)用時(shí)影響相反組對(duì)（或方劑）內(nèi)藥物療效的數(shù)據(jù)信息及潛在規(guī)律；在病理生理?xiàng)l件下評(píng)估“十八反”代表性反藥藥對(duì)配伍組合及其含相反藥對(duì)方劑是否存在干擾、改變、降低或消除藥效的作用，探索影響因素；考察相關(guān)藥對(duì)反藥配伍前后化學(xué)成分的變化規(guī)律及體內(nèi)相互作用過程，研究相反配伍妨害療效的作用機(jī)理和生物學(xué)基礎(chǔ)。培養(yǎng)4名博士后，博士研究生5名，碩士研究生10名。從分子和蛋白水平上進(jìn)一步探討“十八反”配伍藥物相互作用的可能機(jī)制。闡明“諸參辛芍叛藜蘆”配伍組合的相互作用和分子機(jī)制。闡明“諸參辛芍”與與藜蘆配伍的前后的量毒效關(guān)系，確定不同配比不同劑量下LD50、MTD參數(shù)的變化，確定有毒藥物的安全劑量范圍，提出各藥對(duì)的毒性動(dòng)態(tài)變化范圍。揭示“諸參辛芍叛藜蘆”配伍組合致毒/增毒物質(zhì)基礎(chǔ)。通過在酶活性水平建立毒性評(píng)價(jià)技術(shù)平臺(tái)和蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)，從分子和蛋白水平上揭示“十八反”配伍藥物相互作用的可能機(jī)制；在國(guó)內(nèi)外學(xué)術(shù)核心期刊發(fā)表論文15–20篇，其中SCI收錄5篇以上；培養(yǎng)博士后4名，博士研究生5名，碩士研究生10名。通過現(xiàn)代色譜技術(shù)研究十八反中“諸參辛芍叛藜蘆”的物質(zhì)基礎(chǔ)，并建立相應(yīng)的數(shù)據(jù)庫(kù)；闡明“諸參辛芍”與藜蘆配伍前后的量毒時(shí)效關(guān)系，確定不同配比不同劑量下LD50、MTD參數(shù)的變化，確定有毒藥物的安全劑量范圍，提出各反藥配伍組合的毒性動(dòng)態(tài)變化范圍；選擇代表性配伍組合作為研究范例，進(jìn)行體內(nèi)過程研究，闡明其配伍前后體內(nèi)動(dòng)力學(xué)參數(shù)差異，明確其體內(nèi)過程，闡明其體內(nèi)作用物質(zhì)與毒性的關(guān)系。為臨床合理用藥提供理論依據(jù)。3.、“諸參辛芍”與藜蘆配伍的前后的量毒時(shí)效關(guān)系研究以藥物體內(nèi)ADME各環(huán)節(jié)為研究重點(diǎn)，以人參藜蘆配伍組合作為研究范例，進(jìn)行體內(nèi)過程研究，對(duì)人參藜蘆配伍多成分的體內(nèi)過程進(jìn)行同步定量分析，構(gòu)建體內(nèi)外物質(zhì)的關(guān)聯(lián)網(wǎng)絡(luò)，系統(tǒng)研究人參藜蘆配伍前后化學(xué)成分吸收特點(diǎn)，分布規(guī)律、代謝轉(zhuǎn)化、毒效物質(zhì)排泄及蓄積致毒等，探討人參藜蘆配伍前后體內(nèi)動(dòng)力學(xué)參數(shù)的差異，闡明其體內(nèi)作用物質(zhì)與毒性的關(guān)系。2. 、“諸參辛芍”與藜蘆配伍的致毒/增毒物質(zhì)基礎(chǔ)研究采用現(xiàn)代色譜技術(shù)特別是液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)，建立“諸參辛芍叛藜蘆”中各單藥與藜蘆相互配伍后毒性成分的指紋圖譜及量毒關(guān)系；研究“諸參辛芍叛藜蘆”配伍致毒/增毒的化學(xué)實(shí)質(zhì)；明確藥物配伍在體外發(fā)生的化學(xué)成分變化，發(fā)現(xiàn)藥物進(jìn)入體內(nèi)后藥物發(fā)生的代謝物變化。最終闡明中藥十八反“諸參辛芍叛藜蘆”反與不反、如何反以及為什么反的科學(xué)內(nèi)涵。承擔(dān)單位：南京中醫(yī)藥大學(xué) 中國(guó)藥科大學(xué)負(fù) 責(zé) 人：段金廒 教授科研骨干：唐于平 研究員 劉曉東 教 授 徐 立 教授 郝海平 副教授 宿樹蘭 副研究員 阿基業(yè) 副教授經(jīng)費(fèi)比例：28%課題四 “諸參辛芍叛藜蘆” 配伍關(guān)系與毒效表征的基礎(chǔ)研究主要研究?jī)?nèi)容本課題以十八反中的“諸參辛芍叛藜蘆”為研究對(duì)象，圍繞中藥“十八反”配伍理論的關(guān)鍵科學(xué)問題研究項(xiàng)目總體目標(biāo)，針對(duì)“諸參辛芍叛藜蘆”配伍組合的藥性與功效特點(diǎn)，開展“諸參辛芍叛藜蘆”配伍關(guān)系與毒效表征的基礎(chǔ)研究。在國(guó)內(nèi)外學(xué)術(shù)核心期刊發(fā)表論文30–40篇，其中SCI收錄10–15篇；申請(qǐng)國(guó)家發(fā)明專利1–2項(xiàng)；培養(yǎng)博士后2–3名，博士研究生3–4名，碩士研究生8–10名。研究目標(biāo)建立客觀、適宜、系統(tǒng)的毒性評(píng)價(jià)體系，以確切回答“藻戟遂芫”與甘草配伍反與不反及其致毒/增毒特點(diǎn)；建立涵蓋“藻戟遂芫”與甘草配伍前后提取物、化學(xué)部位、化學(xué)成分的化學(xué)物質(zhì)庫(kù)，以有效支撐和評(píng)價(jià)研究其毒效物質(zhì)變化；通過量毒時(shí)效關(guān)系與體內(nèi)過程變化研究，揭示“藻戟遂芫”與甘草配伍的相互作用機(jī)制；通過系統(tǒng)的毒理學(xué)評(píng)價(jià)，確定人體等效性毒效劑量范圍，為指導(dǎo)臨床安全用藥提供科學(xué)依據(jù)；通過本課題研究，為系統(tǒng)揭示“十八反”中藥配伍禁忌的科學(xué)內(nèi)涵提供支撐，為豐富和發(fā)展中藥配伍禁忌理論提供科學(xué)依據(jù)；建立客觀、適宜、系統(tǒng)的毒性評(píng)價(jià)體系，以確切回答“藻戟遂芫”與甘草配伍反與不反及其致毒/增毒特點(diǎn)；建立涵蓋“藻戟遂芫”與甘草配伍前后提取物、化學(xué)部位、化學(xué)成分的化學(xué)物質(zhì)庫(kù)，以有效支撐和評(píng)價(jià)研究其毒效物質(zhì)變化；通過量毒時(shí)效關(guān)系與體內(nèi)過程變化研究，揭示“藻戟遂芫”與甘草配伍的相互作用機(jī)制；通過系統(tǒng)的毒理學(xué)評(píng)價(jià)，確定人體等效性毒效劑量范圍，為指導(dǎo)臨床安全用藥提供科學(xué)依據(jù)。從炎性因子釋放、細(xì)胞線粒體損傷、胞內(nèi)離子平衡、氧化壓力和凋亡蛋白表達(dá)，多角度、多途徑分析該組反藥誘導(dǎo)細(xì)胞損傷的分子機(jī)制。利用中藥多成分同步定量分析技術(shù)，探討反藥配伍中多成分配伍前后體內(nèi)動(dòng)力學(xué)參數(shù)的差異，分析其配伍致毒增毒的原因及其相互作用；采用體內(nèi)體外方法，研究反藥配伍后吸收轉(zhuǎn)運(yùn)過程及其相互作用機(jī)理；利用常規(guī)組織分布研究方法結(jié)合微透析技術(shù)，分析毒性靶器官與非毒性靶器官中成分差別，與毒效評(píng)價(jià)研究相結(jié)合闡明甘草組反藥配伍毒效物質(zhì)基礎(chǔ)；通過整體、在體、離體等多個(gè)層次，研究反藥配伍組合體內(nèi)外代謝途徑，明確本組藥物配伍對(duì)代謝酶的影響及其相互作用機(jī)理；探討反藥配伍對(duì)藥物排泄相關(guān)蛋白的影響及其體內(nèi)排泄經(jīng)時(shí)變化過程及其相互作用機(jī)理。評(píng)價(jià)反藥配伍前后經(jīng)不同環(huán)節(jié)體外煎煮、體內(nèi)代謝過程、體內(nèi)靶器官等環(huán)節(jié)，毒性物質(zhì)體內(nèi)外的定性定量變化，分析其動(dòng)態(tài)變化過程，闡明配伍毒性物質(zhì)含量毒性間的關(guān)系，定量表征其致毒增毒程度。“藻戟遂芫”與甘草配伍量毒時(shí)效關(guān)系研究基于多劑量、多指標(biāo)優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，考察峻下逐水藥物大戟、甘遂、芫花與甘草配伍，對(duì)胃腸道和肝腎器官的毒性作用及其瀉下、利尿和抗水腫的藥效作用；考察海藻與甘草配伍后藥效變化，以及是否產(chǎn)生其他毒性。圍繞本課題反藥組合可能的毒性特點(diǎn)以及毒性靶部位，采用體外腸管孵育、離體肝臟灌流，胃腸粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)、肝細(xì)胞培養(yǎng)、P糖蛋白、水通道蛋白、P450酶分子等評(píng)價(jià)模型，揭示“藻戟遂芫”與甘草反藥配伍組合致毒/增毒特點(diǎn)。承擔(dān) 位：天津中醫(yī)藥大學(xué) 江西中醫(yī)學(xué)院負(fù) 責(zé) 人：張艷軍 教授 科研骨干：楊世林 教授 何 新 教授 何曉暉 教授 經(jīng)費(fèi)比例：16%課題三 “藻戟遂芫俱戰(zhàn)草”配伍關(guān)系與毒效表征的基礎(chǔ)研究主要研究?jī)?nèi)容圍繞項(xiàng)目總體目標(biāo)，針對(duì)“藻戟遂芫”與甘草反藥配伍組合的各組藥物，開展中藥十八反“藻戟遂芫俱戰(zhàn)草”的系統(tǒng)研究，揭示大戟、甘遂、芫花等峻下逐水類中藥與甘草配伍和海藻類中藥與甘草配伍組對(duì)反與不反？為什么反？以及致毒增毒特點(diǎn)及其機(jī)理；闡明中藥十八反“藻戟遂芫俱戰(zhàn)草”的科學(xué)內(nèi)涵?！鞍胧V貝蘞及攻烏”致毒/增毒物質(zhì)生物學(xué)機(jī)制研究采用代謝組學(xué)及胚胎干細(xì)胞等技術(shù)，考察“半蔞貝蘞及攻烏”相反配伍及其毒性成分引起的代謝組學(xué)變化，明確相反配伍致毒/增毒的生物學(xué)機(jī)制?！鞍胧V貝蘞及攻烏”配伍量毒時(shí)效關(guān)系研究基于多劑量、多指標(biāo)優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，考察半蔞貝蘞及與烏頭配伍，考察其配伍后毒效變化，以及是否產(chǎn)生其他毒性。進(jìn)一步利用毒性快速篩查技術(shù)、潛在毒性發(fā)現(xiàn)技術(shù)等進(jìn)行毒性確認(rèn)，最終明確相反配伍致毒/增毒的物質(zhì)基礎(chǔ)?！鞍胧V貝蘞及攻烏”毒性評(píng)價(jià)研究采用經(jīng)典毒理學(xué)、毒性快速篩查技術(shù)、潛在毒性發(fā)現(xiàn)技術(shù)等相結(jié)合，進(jìn)行“半蔞貝蘞及攻烏”配伍毒性評(píng)價(jià)研究，確認(rèn)已知毒性，發(fā)現(xiàn)潛在毒性。參考臨床用藥習(xí)慣選擇半夏、瓜蔞、浙貝母、川貝母、白蘞、白及、川烏、附子為研究對(duì)象，首先進(jìn)行“半蔞貝蘞及攻烏”相關(guān)配伍毒性評(píng)價(jià)研究，明確“半蔞貝蘞及攻烏”相反配伍的致毒/增毒特點(diǎn)；明確“半蔞貝蘞及攻烏”單味藥材的化學(xué)組成，并考察相反配伍的體內(nèi)外化學(xué)成分變化，明確相反配伍致毒/增毒的物質(zhì)基礎(chǔ)；在體、離體實(shí)驗(yàn)相結(jié)合考察相反配伍致毒/增毒的物質(zhì)間的相互作用規(guī)律及其生物學(xué)基礎(chǔ)。預(yù)期目標(biāo)整合古今文獻(xiàn)信息和實(shí)驗(yàn)結(jié)果，創(chuàng)建我國(guó)中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)庫(kù)； 建立在線的項(xiàng)目研究數(shù)據(jù)匯交管理平臺(tái)；建立適宜的中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)挖據(jù)模型，揭示其配伍特征和毒效內(nèi)在關(guān)系；通過知識(shí)發(fā)現(xiàn)和集成，闡釋基于“十八反”的中藥配伍禁忌理論的科學(xué)內(nèi)涵，豐富發(fā)展中藥配伍理論；培養(yǎng)碩士研究生68名、博士研究生23名；在國(guó)內(nèi)外期刊發(fā)表高質(zhì)量學(xué)術(shù)論文1520篇。通過對(duì)方劑組成、功效、主治病證、配伍關(guān)系等內(nèi)容的比較分析，建立相關(guān)模型，提取特征性關(guān)聯(lián)關(guān)系，分析在不同方劑中的地位和作用，探討“