【正文】 研骨干：唐于平 研究員 劉曉東 教 授 徐 立 教授 郝海平 副教授 宿樹蘭 副研究員 阿基業(yè) 副教授經(jīng)費比例：28%課題四 “諸參辛芍叛藜蘆” 配伍關(guān)系與毒效表征的基礎(chǔ)研究主要研究內(nèi)容本課題以十八反中的“諸參辛芍叛藜蘆”為研究對象，圍繞中藥“十八反”配伍理論的關(guān)鍵科學(xué)問題研究項目總體目標(biāo)，針對“諸參辛芍叛藜蘆”配伍組合的藥性與功效特點，開展“諸參辛芍叛藜蘆”配伍關(guān)系與毒效表征的基礎(chǔ)研究。為臨床合理用藥提供理論依據(jù)。闡明“諸參辛芍”與與藜蘆配伍的前后的量毒效關(guān)系，確定不同配比不同劑量下LD50、MTD參數(shù)的變化，確定有毒藥物的安全劑量范圍，提出各藥對的毒性動態(tài)變化范圍。通過文獻(xiàn)挖掘和知識發(fā)現(xiàn)尋找中藥“十八反”配伍應(yīng)用時影響相反組對（或方劑）內(nèi)藥物療效的數(shù)據(jù)信息及潛在規(guī)律；在病理生理條件下評估“十八反”代表性反藥藥對配伍組合及其含相反藥對方劑是否存在干擾、改變、降低或消除藥效的作用，探索影響因素；考察相關(guān)藥對反藥配伍前后化學(xué)成分的變化規(guī)律及體內(nèi)相互作用過程，研究相反配伍妨害療效的作用機(jī)理和生物學(xué)基礎(chǔ)?！笆朔础迸湮榉梁χ委熥饔玫幕瘜W(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)研究采用化學(xué)組學(xué)、藥代動力學(xué)、藥物代謝組學(xué)研究方法，考察“十八反”配伍前后體外化學(xué)成分的變化規(guī)律及配伍對入體成分的吸收、分布、代謝、排泄的影響，明確“十八反”代表性組對配伍妨害藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)。從現(xiàn)代臨床研究的角度反映“十八反”藥對配伍組合及其方劑的臨床治療應(yīng)用的情況現(xiàn)狀。本課題選擇甲狀腺腫大動物模型，通過研究海藻玉壺湯中，海藻和甘草在不同給藥劑量、不同劑量配比、不同炮制品種等條件下，對模型動物的一般生理、血液生化指標(biāo)以及組織器官的影響，探討基于臨床應(yīng)用的海藻與甘草配伍對動物機(jī)體生物效應(yīng)影響的宜忌條件，選擇具有顯著效果的配伍條件組合，根據(jù)實驗結(jié)果進(jìn)一步從甲狀腺合成、儲存、釋放、調(diào)控等方面進(jìn)行藥效機(jī)制的研究，并從整體動物實驗和離體實驗兩個環(huán)節(jié)進(jìn)行毒性機(jī)制的探討，以期闡明海藻玉壺湯臨床應(yīng)用的宜忌條件和作用規(guī)律。；建立基于臨床應(yīng)用的中藥“十八反”宜忌條件的研究平臺，為研究相反藥藥對配伍組合臨床應(yīng)用宜忌條件提供研究思路與方法。第三年 以文獻(xiàn)資料結(jié)合實驗數(shù)據(jù)，針對不同病證發(fā)現(xiàn)反藥配伍特征性關(guān)聯(lián)關(guān)系； 采用整體、器官組織等評價指標(biāo)，對反藥配伍組合致毒/增毒/減效的作用機(jī)理進(jìn)行研究； 中藥“十八反”配伍前后毒效化學(xué)成分群研究； 采用多因素非線性回歸、人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)、智能機(jī)器學(xué)習(xí)等方法，對中藥十八反配伍前后化學(xué)物質(zhì)變化與毒效作用進(jìn)行關(guān)聯(lián)研究； 中藥“十八反”體內(nèi)相互作用研究； “十八反”妨害治療代表性反藥配伍組合體內(nèi)過程研究； 含有反藥配伍的代表性方劑甘遂半夏湯的宜忌條件和配伍關(guān)系研究。高質(zhì)量完成項目。設(shè)計特征性關(guān)聯(lián)檢索策略，為本項目研究開展提供堅實的數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。通過單次及多次給藥毒性研究，以LD50、血常規(guī)、血生化、尿常規(guī)、尿生化、病理組織學(xué)檢查等指標(biāo)為依據(jù)，獲得毒性評價結(jié)果，為進(jìn)一步研究提供依據(jù)與指引。（三）中藥“十八反”毒效物質(zhì)基礎(chǔ)研究中藥“十八反”反藥配伍組合樣品制備及化學(xué)物質(zhì)庫的建立“十八反”涉及藥材均統(tǒng)一基源、產(chǎn)地、飲片規(guī)格等，質(zhì)量符合2010版《中華人民共和國藥典》項下標(biāo)準(zhǔn)。評價反藥配伍前后經(jīng)不同環(huán)節(jié)體外煎煮、體內(nèi)代謝過程、體內(nèi)靶器官等環(huán)節(jié)，毒性物質(zhì)體內(nèi)外的定性定量變化，分析其動態(tài)變化過程，闡明配伍毒性物質(zhì)含量毒性間的關(guān)系，定量表征其致毒增毒程度。同時，分析藥物性味歸經(jīng)、升降沉浮等屬性與劑量比例、功效特點、毒性反應(yīng)的配伍關(guān)系，探索“十八反”中藥區(qū)別于其他中藥和藥對的特殊屬性。（2）從文獻(xiàn)角度進(jìn)行“十八反”配伍及其方劑的治療性臨床研究的療效和安全性的評價。（八）基于信息數(shù)據(jù)挖掘與知識發(fā)現(xiàn)，總結(jié)歸納中藥“十八反”配伍禁忌的科學(xué)內(nèi)涵、提煉形成和豐富完善中藥配伍理論。本課題選擇甲狀腺腫大動物模型，通過研究海藻玉壺湯中，海藻和甘草在不同給藥劑量、不同劑量配比、不同炮制品種等條件下，對模型動物的一般生理、血液生化指標(biāo)以及組織器官的影響，探討基于臨床應(yīng)用的海藻與甘草配伍對動物機(jī)體生物效應(yīng)影響的宜忌條件，選擇具有顯著效果的配伍條件組合，根據(jù)實驗結(jié)果進(jìn)一步從甲狀腺合成、儲存、釋放、調(diào)控等方面進(jìn)行藥效機(jī)制的研究，并從整體動物實驗和離體實驗兩個環(huán)節(jié)進(jìn)行毒性機(jī)制的探討，以期闡明海藻玉壺湯臨床應(yīng)用的宜忌條件和作用規(guī)律。從現(xiàn)代臨床研究的角度反映“十八反”藥對配伍組合及其方劑的臨床治療應(yīng)用的情況現(xiàn)狀。我們前期的實驗研究證明：有的相反組對（或在方劑中）可能干擾或妨害組對內(nèi)藥物的某些藥效。（四）中藥“十八反”配伍的量—毒—時效關(guān)系研究基于劑量梯度、多指標(biāo)優(yōu)化的實驗設(shè)計，考察“十八反”配伍的毒性作用及其相關(guān)的效應(yīng)表現(xiàn)。安全藥理學(xué)評價體系建立及其反藥配伍毒性評價通過安全藥理學(xué)方法評價“十八反”配伍前后產(chǎn)生的與治療目的無關(guān)的效應(yīng)，主要包括觀察指標(biāo)：精神神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)等，研究其致毒/增毒類型和毒性程度。（二）中藥“十八反”毒性評價體系的建立與毒性評價研究以安全性評價經(jīng)典方法為主，結(jié)合體外及快速篩查體系，對中藥十八反配伍致毒/增毒特點及其毒性程度進(jìn)行系統(tǒng)評價，科學(xué)界定其“反”與“不反”。收集整理與本項目研究相關(guān)的古今文獻(xiàn)，考證各“十八反”中藥的衍化過程，整理歸納歷代醫(yī)家對“十八反”中藥的理論闡述、歷代相反藥項的范圍和臨床實踐經(jīng)驗，現(xiàn)代名家醫(yī)案、臨床報道、醫(yī)院處方和實驗研究文獻(xiàn)，分析提取以“十八反”為代表的配伍禁忌相關(guān)內(nèi)容，探討其來源、范圍、現(xiàn)狀和有爭議的問題。為我國中藥配伍禁忌和藥物安全性研究提供示范，為臨床安全用藥提供指導(dǎo)，為制定我國中醫(yī)臨床用藥配伍禁忌指南和安全用藥指導(dǎo)原則奠定基礎(chǔ)，豐富和發(fā)展中醫(yī)藥配伍理論，服務(wù)于經(jīng)濟(jì)社會發(fā)展和人口健康需求做出應(yīng)有的貢獻(xiàn)。第二年基于文獻(xiàn)信息數(shù)據(jù)結(jié)合實驗研究結(jié)果， 進(jìn)行中藥“十八反”配伍關(guān)系的數(shù)據(jù)挖掘研究；中藥“十八反”在方劑中的應(yīng)用 特點與知識發(fā)現(xiàn)；基于古今文獻(xiàn)信息和研究結(jié)果信息的集成和分析，初步創(chuàng)建我國中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)庫；反藥配伍組合致毒/增毒特點及毒性程度研究；中藥“十八反”配伍前后毒效物質(zhì)基礎(chǔ)研究；中藥“十八反”各反藥配伍量毒時效關(guān)系研究中藥“十八反”體內(nèi)過程研究；“十八反”代表性反藥配伍組合及方劑妨害治療的物質(zhì)基礎(chǔ)研究；選擇含有反藥配伍的代表性方劑海藻玉壺湯，研究其宜忌條件與配伍關(guān)系。研究目標(biāo)基于中藥“十八反”臨床應(yīng)用，對的中藥“十八反”相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行收集整理，探討中藥“十八反”藥對配伍臨床應(yīng)用的宜忌條件及其規(guī)律，并在文獻(xiàn)研究的基礎(chǔ)上，本著循證醫(yī)學(xué)系統(tǒng)評價的思想，對其療效和安全性進(jìn)行評價。一部》中記載的海藻功能主治是“消痰軟堅散結(jié)，利水消腫。承擔(dān)單位：中國中醫(yī)科學(xué)院 中科院長春應(yīng)化所負(fù) 責(zé) 人：林 娜 研究員科研骨干：劉志強(qiáng) 研究員 彭春龍 研究員 宋鳳瑞 教授 隋峰 副研究員經(jīng)費比例：16%課題六 基于臨床應(yīng)用的中藥”“十八反””宜忌條件及配伍關(guān)系研究主要研究內(nèi)容從文獻(xiàn)研究方面分析評價中藥“十八反”配伍臨床應(yīng)用的療效和安全性（1）“十八反”配伍及其方劑的臨床應(yīng)用范圍及文獻(xiàn)特征分析。同時，分析藥物性味歸經(jīng)、升降沉浮等屬性與劑量比例、功效特點、毒性反應(yīng)的配伍關(guān)系，探索“十八反”中藥區(qū)別于其他中藥和藥對的特殊屬性。培養(yǎng)4名博士后，博士研究生5名，碩士研究生10名。揭示“諸參辛芍叛藜蘆”配伍組合致毒/增毒物質(zhì)基礎(chǔ)。3.、“諸參辛芍”與藜蘆配伍的前后的量毒時效關(guān)系研究以藥物體內(nèi)ADME各環(huán)節(jié)為研究重點，以人參藜蘆配伍組合作為研究范例，進(jìn)行體內(nèi)過程研究，對人參藜蘆配伍多成分的體內(nèi)過程進(jìn)行同步定量分析，構(gòu)建體內(nèi)外物質(zhì)的關(guān)聯(lián)網(wǎng)絡(luò)，系統(tǒng)研究人參藜蘆配伍前后化學(xué)成分吸收特點，分布規(guī)律、代謝轉(zhuǎn)化、毒效物質(zhì)排泄及蓄積致毒等，探討人參藜蘆配伍前后體內(nèi)動力學(xué)參數(shù)的差異，闡明其體內(nèi)作用物質(zhì)與毒性的關(guān)系。在國內(nèi)外學(xué)術(shù)核心期刊發(fā)表論文30–40篇，其中SCI收錄10–15篇；申請國家發(fā)明專利1–2項；培養(yǎng)博士后2–3名，博士研究生3–4名，碩士研究生8–10名。評價反藥配伍前后經(jīng)不同環(huán)節(jié)體外煎煮、體內(nèi)代謝過程、體內(nèi)靶器官等環(huán)節(jié)，毒性物質(zhì)體內(nèi)外的定性定量變化，分析其動態(tài)變化過程，闡明配伍毒性物質(zhì)含量毒性間的關(guān)系，定量表征其致毒增毒程度。“半蔞貝蘞及攻烏”致毒/增毒物質(zhì)生物學(xué)機(jī)制研究采用代謝組學(xué)及胚胎干細(xì)胞等技術(shù)，考察“半蔞貝蘞及攻烏”相反配伍及其毒性成分引起的代謝組學(xué)變化，明確相反配伍致毒/增毒的生物學(xué)機(jī)制。參考臨床用藥習(xí)慣選擇半夏、瓜蔞、浙貝母、川貝母、白蘞、白及、川烏、附子為研究對象，首先進(jìn)行“半蔞貝蘞及攻烏”相關(guān)配伍毒性評價研究，明確“半蔞貝蘞及攻烏”相反配伍的致毒/增毒特點；明確“半蔞貝蘞及攻烏”單味藥材的化學(xué)組成，并考察相反配伍的體內(nèi)外化學(xué)成分變化，明確相反配伍致毒/增毒的物質(zhì)基礎(chǔ)；在體、離體實驗相結(jié)合考察相反配伍致毒/增毒的物質(zhì)間的相互作用規(guī)律及其生物學(xué)基礎(chǔ)。設(shè)計特征性關(guān)聯(lián)檢索策略，為本項目研究開展提供堅實的數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。研究思路創(chuàng)新 （1）以古今信息數(shù)據(jù)挖掘為支撐，集成藥物安全性評價、毒理毒代、毒效物質(zhì)、藥物相互作用等現(xiàn)代研究方法，創(chuàng)建客觀表征中藥配伍禁忌量毒時效關(guān)系的研究模式。（二）子課題設(shè)置思路圍繞“十八反”配伍關(guān)系研究的關(guān)鍵科學(xué)問題，在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下，創(chuàng)建客觀適宜的研究模式：從古今中醫(yī)藥信息資源中挖掘 以“十八反”為代表的中藥配伍禁忌的配伍關(guān)系特點和毒性反應(yīng)等科學(xué)內(nèi)涵；針對其致毒、增毒特點，集成毒理學(xué)、化學(xué)、藥效學(xué)、毒代動力學(xué)、生物信息學(xué)等多學(xué)科方法，揭示“十八反”烏頭組、甘草組、藜蘆組各反藥組合的毒效表征及其機(jī)理；從妨害治療的角度評價“十八反”組合影響藥效的特點，從反藥配伍組合及方劑配伍角度分析反藥配伍應(yīng)用的宜忌條件及配伍關(guān)系。為我國中藥配伍禁忌和藥物安全性研究提供示范，為臨床安全用藥提供指導(dǎo)，為制定我國中醫(yī)臨床用藥配伍禁忌指南和安全用藥指導(dǎo)原則奠定基礎(chǔ)，豐富和發(fā)展中醫(yī)藥配伍理論，服務(wù)于經(jīng)濟(jì)社會發(fā)展和人口健康需求做出應(yīng)有的貢獻(xiàn)?！笆朔础笔怯袟l件的、動態(tài)的配伍禁忌，這是有別于西藥禁忌的一個重要特點，即在特定的病理條件、特定的配伍關(guān)系和特定的給藥方式下，“十八反”中藥能有限利用。技術(shù)方法可行本項目集成藥物安全性評價、毒理毒代、毒效物質(zhì)、藥物相互作用等現(xiàn)代研究方法，創(chuàng)建客觀表征中藥配伍禁忌量毒時效關(guān)系的研究模式，以揭示“十八反”配伍毒效表征及其機(jī)理，闡明其科學(xué)內(nèi)涵。技術(shù)路線互為補(bǔ)充相互驗證 基于“十八反”