【正文】 。[8]淮山多糖是由鼠李糖，阿拉伯糖，甘露糖，葡萄糖和半乳糖組成的雜多糖，水溶性活性多糖。再將已烘干的淮山放進(jìn)粉碎機(jī)里面粉碎，成固體粉末。使淮山固體粉末與水形成糊狀。用95%的乙醇洗滌，使混合液的乙醇含量大于80%。將收集得到的白色沉淀分別加入無水甲醇、丙酮、乙醚洗滌，在6000r/min下離心，并取上清液，收集沉淀。 將水提多糖粗品置于索氏提取器中．加入石油醚90℃回流提取1 h．揮干溶劑后．溶于適量蒸餾水配成多糖水溶液；采用三氯乙酸法去除粗多糖中大量蛋白質(zhì)后，再經(jīng)兩次Sevage法去除少量的殘留蛋白質(zhì)；然后用活性炭脫色、脫蛋白、脫色后多糖液裝入透析袋中．用自來水流水透析24～72 h。將透析后多糖液濃縮配成1 溶液．上凝膠柱2．6 cm70 cm．用0．1 mol／I NaC1洗脫．上樣量為5 mL．流速為0．5 mL／min．每管收集5 mL．苯酚一硫酸法檢測(cè)。新華中速濾紙(3．5 cm30 cm)．點(diǎn)樣量為0．5 DFPN—I和DFPA—I水溶液各20μl，展開劑為分析純正丙醇、濃氨水、水(60：45：j)．飽和2 h．室溫展開6 h，取出后吹干．用苯胺一鄰苯二甲酸顯色劑染色，吹干后105 ℃ 烘烤10min至斑點(diǎn)出現(xiàn)。 采用WZZ一2A型自動(dòng)數(shù)顯旋光儀。用100 mm試管。按下列公式計(jì)算出比旋光度：[α]D2u=α(LC)式中：a 測(cè)得的旋光度；C一溶液的質(zhì)量濃度，g／mI ；J 試管的長(zhǎng)度，dm。測(cè)定：將Sephadex G一200層析柱(2．0 cm56 cm)先用0．1 mol／I NaC1溶液以3 mL／h平衡3 d。流速為6 mL／h，流出液按每管1 mI 體積分步收集．用苯酚一硫酸法檢測(cè)多糖，分別求得洗脫體積 。以 為縱坐標(biāo)。分別取待測(cè)分子質(zhì)量DFPN I和DFPA I 5 mg上樣．按與Dextran標(biāo)準(zhǔn)品層析相同的條件操作．求得相應(yīng)的洗脫體積查標(biāo)準(zhǔn)曲線可求得多糖的平均分子質(zhì)量。溶解性測(cè)定．苯酚硫酸反應(yīng)．斐林試劑反應(yīng)，三氯化鐵反應(yīng)．十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)絡(luò)合反應(yīng)．雙縮脲反應(yīng)．考馬斯亮藍(lán)染色反應(yīng)．碘一碘化鉀反應(yīng)．硫酸咔唑反應(yīng)。測(cè)定半乳糖醛酸含量。對(duì)此，會(huì)經(jīng)常買一些保健食品，用于調(diào)節(jié)自身的身體環(huán)境，促進(jìn)新陳代謝，去除自由基，延緩衰老。植物多糖及其衍生物因具有特殊生理活性的，都成為近些年的一些研究的對(duì)象，人們?cè)噺奶烊凰幬镏刑崛〕銎溆行С煞?，并制成具有特定種功能的功能食品。本文是以淮山作為實(shí)驗(yàn)材料，對(duì)于淮山多糖的提取工藝以及其抗氧化性做了研究，以其對(duì)淮山多糖進(jìn)行功能活性和應(yīng)用等更深入的研究。是藥同源植物，具有較高的藥用價(jià)值和食用價(jià)值，而且資源豐富，價(jià)格低廉。能祛風(fēng)濕、止痛、舒筋活血、止咳平喘祛痰等功效。作為藥物能調(diào)節(jié)免疫能力、降血糖、降血脂、調(diào)節(jié)腸胃功能、預(yù)防腫瘤等。葉仲林、王學(xué)超等通過實(shí)驗(yàn)對(duì)薯蕷皂元的衍生物進(jìn)行研究, 以薯蕷昔丁二酸單醋及薯蕷皂元為原料, 分別經(jīng)過氨基縮合, 相應(yīng)合成了5種及6 種新化合物, 結(jié)果表明這n 種化合物對(duì)大鼠均具有抗心肌梗死活性?；瓷接纸惺硎殻渲写埵硎毢投苋~薯蕷有悠久的應(yīng)用歷史, 但古書中所收載的方劑均以穿龍薯蕷為主, 然而, 近些年來主產(chǎn)東北地區(qū)的穿龍薯蕷種植、化學(xué)、藥理等各方面的研究和開發(fā)相對(duì)緩慢。盾葉薯蕷根狀莖富含淀粉、纖維素, 薯蕷淀粉含量較高, 可成為葡萄糖液、生產(chǎn)酒精、酵母粉、畜禽飼料及其他多種化工原料。中科院成都生物研究所、成都地奧集團(tuán)利用薯蕷加工廢料淀粉生產(chǎn)酒精、生產(chǎn)菌體蛋白飼料、酶酸水解生產(chǎn)皂素的新工藝、薯蕷發(fā)酵生產(chǎn)氫氣等進(jìn)行了開發(fā)利用為穿龍薯蕷的深入開發(fā)開辟了先河。根據(jù)上述研究資料, 薯蕷皂苷在抗腫瘤、改善心血管功能、調(diào)節(jié)免疫、鎮(zhèn)咳平喘、抗炎鎮(zhèn)痛等方面都有著明顯的優(yōu)勢(shì), 但在實(shí)際的研究過程中仍存在一些問題: 其藥理作用機(jī)制有很多方面至今尚不清楚, 仍需進(jìn)一步研究。個(gè)案研究報(bào)道較多, 缺乏大規(guī)模的樣本研究, 實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性較差。對(duì)其藥理作用的研究比較局限, 除抗腫瘤作用之外, 其他藥理作用的研究仍不夠深入等。將粉碎后的干淮山水浴加熱，離心。再干燥。2實(shí)驗(yàn)部分本實(shí)驗(yàn)旨在淮山多糖的提取工藝研究及淮山多糖在清除羥基自由基、超氧自由基和DPPH自由基能力和還原能力方面的研究，進(jìn)一步拓展其生物學(xué)功能性質(zhì)研究。以上試劑均為分析純。將買來的鮮淮山清洗干凈，放在60℃的干燥箱干燥24h，使其自由水分蒸發(fā)干。在上清液加入95%的乙醇，并使其含量在80%以上，再離心，去上清液，取沉淀。 ,5ml95% 乙醇,5ml ()和30μl 亞油酸于50 恒溫水浴搖床上振蕩2h 轉(zhuǎn)速。多糖清除?OH 的測(cè)定，利用H2O2 與Fe2+ 混合產(chǎn)生?OH，但由于?OH具有很高的反應(yīng)活性存活時(shí)間短，若在體系中加入水楊酸就能有效地捕捉?OH并產(chǎn)生有色產(chǎn)物，該產(chǎn)物在波長(zhǎng)510nm 處有強(qiáng)吸收，若在反應(yīng)體系中加入具有清除?OH功能的被測(cè)物便會(huì)與水楊酸競(jìng)爭(zhēng)?OH，而使有色產(chǎn)物生成量減少采用固定反應(yīng)時(shí)間法在相同體積的反應(yīng)體系(，9mmol/L Fe2+ 9mmol/L 水楊酸 )中加入一系列不同濃度的多糖溶液并以蒸餾水為參比與試劑空白液比較在510nm 處測(cè)量各濃度下的吸光度Ax 便能測(cè)定被測(cè)物對(duì)?OH的清除作用。利用DPPH溶液的特征紫紅色團(tuán)的吸收峰，以分光光度法測(cè)定加抗氧化劑或植物提取液后,吸收的下降表示其對(duì)有機(jī)自由基消除能力，反應(yīng)體積2ml，DPPH溶于少量甲醇后，以50%乙醇配制為120μmol/L。室溫下靜置20min后測(cè)吸光度變化，樣品對(duì)DPPH的清除百分比，這里A0為未加樣的DPPH（+%乙醇）的吸光度，Ax為樣品與DPPH( 反應(yīng)后的吸光度，B為樣品的空白（+%乙醇）的吸光度,然后用公式求出清除率。將糊狀液體加入50ml離心管，在6000r/min離心10min，到出上清液，約50ml，并加入300ml95%乙醇，攪拌，出現(xiàn)白色沉淀。倒掉上清液，加小量水食用漩渦分離器使沉淀溶解，再分別用無水甲醇、丙酮、乙醚洗滌，重復(fù)乙醇洗滌步驟。，溶解于水中。將不同濃度的2ml的樣液和模型溶液混合，以加同體積的蒸餾水作為對(duì)照組。106mol/L RFV 、 104mol/L NBT ()的模型溶液。將兩組混合溶液分別用分光光度計(jì)測(cè)定在560nm出的吸收狀況。采用VitC作為陽(yáng)性對(duì)照組按照同法進(jìn)行測(cè)試。曾有不少報(bào)道表示某些多糖經(jīng)逐步純化后，其抗氧化能力并不會(huì)因?yàn)榧兌雀叨饾u增加。由此可見，天然產(chǎn)物中多糖的生物活性尚需深入研究，才能合理應(yīng)用才能闡明結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系。故該反應(yīng)體系只能用來定性說明或篩選某種物質(zhì)是否具有抗氧化活性。 不同濃度樣液對(duì)不同自由基的清除率樣液濃度 （μg/ml）?OH清除率%O 2清除率%DPPH?清除率%12610100 淮山多糖對(duì)超氧陰離子自由基和羥自由基的清除作用3結(jié)論通過研究O 2?OH和DPPH產(chǎn)生的的3個(gè)反應(yīng)體系，結(jié)果發(fā)現(xiàn)淮山多糖具有清除氧自由基活性的能力，而氧自由基與機(jī)體衰老有很密切的關(guān)系，因此淮山多糖的抗衰老可能與清除氧自由基活性有關(guān)，淮山多糖具有清除活性氧自由基的功能實(shí)驗(yàn)結(jié)果將為其合理開發(fā)利用提供理論依據(jù)。由于她嚴(yán)肅的科學(xué)態(tài)度，嚴(yán)謹(jǐn)?shù)闹螌W(xué)精神，精益求精的工作作風(fēng)，深深地感染和激勵(lì)著我。陶老師不僅對(duì)學(xué)生嚴(yán)格要求淳淳教誨使我受益終生，同時(shí)激勵(lì)著我在今后的人生道路上不斷進(jìn)取，在此謹(jǐn)向陶老師致以誠(chéng)摯的謝意和崇高的敬意。再次，要感謝我的父母，是他們提供了一個(gè)機(jī)會(huì)使我能體現(xiàn)人生。在此向你們表示衷心的感謝。也要感謝我的朋友，正由于他們的存在，無論在學(xué)習(xí)上，生活上我都得到他們不少的幫助。從課題的選擇，實(shí)驗(yàn)方案的確立，到最終的定搞，在此期間，也遇到了很多很多的困難和疑惑，但是通過老師和同學(xué)們的悉心幫助，最終得以