【正文】 行。④待平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置?！妓伎?〗倒平板的目的是防止培養(yǎng)基冷卻過程中形成的水滴落到培養(yǎng)基表面?？諝庵须s菌會(huì)在這些粘附培養(yǎng)基上繁殖，并污染皿內(nèi)培養(yǎng)基。〖思考5〗試管培養(yǎng)基形成斜面的作用是增大接種面積。2．7．2平板劃線法：通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面。②在酒精燈火焰旁冷卻接種環(huán)，并打開大腸桿菌的菌種試管的棉塞。④將冷卻的接種環(huán)伸入到菌液中取出一環(huán)菌種。⑥將皿蓋打開一條縫隙，把接種環(huán)伸入平板內(nèi)劃3～5條平行線，蓋上皿蓋，不要?jiǎng)澠婆囵B(yǎng)基。重復(fù)上述過程，完成三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。⑧將平板倒置放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。〖思考7〗在第1次劃線后都從上次劃線末端開始的目的是獲得由單個(gè)細(xì)菌形成的標(biāo)準(zhǔn)菌落。當(dāng)稀釋倍數(shù)足夠高時(shí)，即可獲得單個(gè)細(xì)菌形成的標(biāo)準(zhǔn)菌落。②用灼燒冷卻的移液管吸取1mL菌液注入編號(hào)為101試管中，并吹打3次，使之混勻。依此類推。整個(gè)操作過程中使用了1支移液管。3．2　在肉湯培養(yǎng)基上，大腸桿菌菌落呈白色，為圓形，光滑有光澤，邊緣整齊。原因是時(shí)間越長，菌落中細(xì)菌繁殖越多，菌落體積越大；菌落的位置不動(dòng)，但菌落數(shù)增多?！妓伎?0〗頻繁使用的菌種利用臨時(shí)保藏法保存，長期保存菌種的方法是甘油管藏法。（四）課堂總結(jié)、點(diǎn)評(píng)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)培養(yǎng)基無菌技術(shù)純化大腸桿菌培養(yǎng)基的配制配制培養(yǎng)基的原則配制培養(yǎng)基的方法計(jì)算→稱量→溶化→調(diào)pH→分裝→加棉塞→滅菌→倒平板平板劃線法稀釋涂布法系列稀釋平板涂布 課題1 菊花的組織培養(yǎng) 【教學(xué)目標(biāo)】（一）知識(shí)與技能熟悉植物組織培養(yǎng)的基本過程理解細(xì)胞分化的概念及離體植物細(xì)胞的脫分化和再分化通過聯(lián)系農(nóng)業(yè)生產(chǎn)實(shí)際，培養(yǎng)學(xué)生活學(xué)活用，理論聯(lián)系實(shí)際的能力（二）過程與方法,歸納MS培養(yǎng)基的配制方法，并設(shè)計(jì)表格比較微生物培養(yǎng)基與MS培養(yǎng)基的配方的異同?！窘虒W(xué)重點(diǎn)】植物組織培養(yǎng)過程中使用的無菌技術(shù)【教學(xué)難點(diǎn)】植物組織培養(yǎng)過程中使用的無菌技術(shù)【教學(xué)方法】啟發(fā)式教學(xué)【教學(xué)工具】多媒體課件【教學(xué)過程】（一）引入新課上節(jié)課我們探討學(xué)習(xí)了如何從土壤中分離出尿素分解菌和纖維素分解微生物及其計(jì)數(shù)方法。（二）進(jìn)行新課1．基礎(chǔ)知識(shí)知識(shí)回顧：聯(lián)系“植物細(xì)胞工程”，回答下列問題：1．1具有某種生物全套遺傳信息的任何一個(gè)活細(xì)胞，都具有發(fā)育成完整個(gè)體的能力，即每個(gè)生物細(xì)胞都具有全能性。1．2植物組織培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用有：實(shí)現(xiàn)優(yōu)良品種的快速繁殖；培育脫毒作物；制作人工種子；培育作物新品種以及細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)等?！妓伎?〗細(xì)胞分化是一種持久性的變化，它有什么生理意義？使多細(xì)胞生物體中細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能趨向?qū)ｉT化，有利于提高各種生理功能的效率?！妓伎?〗填表比較根尖分生組織和愈傷組織的異同：組織類型細(xì)胞來源細(xì)胞形態(tài)細(xì)胞結(jié)構(gòu)細(xì)胞排列細(xì)胞去向根尖分生組織受精卵正方形無液泡緊密分化成多種細(xì)胞組織愈傷組織高度分化細(xì)胞無定形高度液泡化疏松再分化成新個(gè)體相同點(diǎn)都通過有絲分裂進(jìn)行細(xì)胞增殖1．5植物組織培養(yǎng)的過程可簡單表示為：（脫分化）離體細(xì)胞、組織、器官（又叫外植體）（再分化）愈傷組織（生長）胚狀體叢芽等新個(gè)體活動(dòng)2：閱讀“影響植物組織培養(yǎng)的條件”，討論并完成以下問題：1．6材料：植物的種類、材料的年齡和保存時(shí)間的長短等都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果?！妓伎?〗一般來說，容易進(jìn)行無性繁殖的植物容易進(jìn)行組織培養(yǎng)。1．7營養(yǎng)：常用的培養(yǎng)基是MS培養(yǎng)基，其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg，微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、Cl、Ni、I、Co，有機(jī)物有甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等?！妓伎?〗填表：激素使用的先后順序及其用量比例對細(xì)胞分裂和分化的影響。溫度為1822℃，光照條件為每日用日光燈照射12小時(shí)。使用時(shí)根據(jù)母液的濃縮倍數(shù)，計(jì)算用量，并加蒸餾水稀釋。在菊花組織培養(yǎng)中，可以不添加植物激素，原因是菊花莖段組織培養(yǎng)比較容易。［思考6］MS培養(yǎng)基中各種營養(yǎng)物質(zhì)的作用是什么？肉湯培養(yǎng)基相比，MS培養(yǎng)基有哪些特點(diǎn)？大量元素和微量元素提供植物細(xì)胞所必需的無機(jī)鹽；蔗糖提供碳源，維持細(xì)胞滲透壓；甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是為了滿足離體植物細(xì)胞在正常代謝途徑受到一定影響后所產(chǎn)生的特殊營養(yǎng)需求?；顒?dòng)4：閱讀“外植體消毒”，填寫下列流程圖：旺盛嫩枝(流水)沖洗刷洗，沖洗20分鐘左右(無菌吸水紙)吸干表面水分(70％的酒精)搖動(dòng)23次67秒(無菌水)清洗(無菌吸水紙)吸干表面水分(氯化汞)溶液浸泡1～2分鐘(無菌水)清洗3次［思考7］在此消毒過程中，是不是強(qiáng)度越大越好，為什么？ 不是。3．發(fā)酵操作活動(dòng)5：閱讀“接種、培養(yǎng)、移栽和栽培”，填寫：3．1前期準(zhǔn)備：用70％的酒精消毒工作臺(tái)，點(diǎn)燃酒精燈。3．2接種操作：接種過程中插入外植體時(shí)形態(tài)學(xué)上端朝上，每個(gè)錐形瓶接種7～8個(gè)外植體。3．3培養(yǎng)過程應(yīng)該放在無菌箱中進(jìn)行，并定期進(jìn)行消毒，保持適宜的溫度和光照。然后將幼苗移植到消過毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境中生活一段時(shí)間，進(jìn)行壯苗。［思考9］外植體在培養(yǎng)過程中可能會(huì)被污染，你認(rèn)為造成污染的原因有哪些？外植體消毒不徹底；培養(yǎng)基滅菌不徹底；接種中被雜菌污染；錐形瓶密封性差等。多利的尸體將被制成標(biāo)本，存放在蘇格蘭國家博物館。羅斯林研究所所長哈里但2002年1月科學(xué)家發(fā)現(xiàn)多利羊的左后腿患上了關(guān)節(jié)炎這種典型的“高齡病癥”，現(xiàn)在，多利羊壯年死于老年羊常得的肺部感染疾病。世界第一只體細(xì)胞克隆動(dòng)物多利羊的誕生曾震驚了世界，它的死也引起了人們對克隆動(dòng)物的關(guān)注、以及對克隆技術(shù)發(fā)展前景的再思考。（二）過程與方法列表比較花藥培養(yǎng)與組織培養(yǎng)選擇適宜的培養(yǎng)材料和培養(yǎng)基（三）情感、態(tài)度與價(jià)值觀培養(yǎng)動(dòng)手實(shí)踐、勇于探索的科學(xué)探究素質(zhì)通過討論花藥離體培養(yǎng)技術(shù)在生產(chǎn)實(shí)踐中的應(yīng)用，幫助學(xué)生確立理論聯(lián)系實(shí)際的觀點(diǎn)【教學(xué)重點(diǎn)】選取適宜的培養(yǎng)材料和培養(yǎng)基【教學(xué)難點(diǎn)】選取適宜的培養(yǎng)材料和培養(yǎng)基【教學(xué)方法】啟發(fā)式教學(xué)【教學(xué)工具】多媒體課件【教學(xué)過程】（一）引入新課利用植物的莖可以經(jīng)過組織培養(yǎng)得到新植株，但這種方法同時(shí)也存在著一定的缺陷，繁殖出來的新植株往往無法獲得一些新的性狀。（二）進(jìn)行新課1．基礎(chǔ)知識(shí)活動(dòng)2：閱讀“被子植物的花粉發(fā)育”，回答下列問題：1．被子植物的花粉是在 中由 經(jīng)過 分裂形成的。〖思考3〗在正常情況下，一個(gè)小孢子母細(xì)胞可以產(chǎn)生 4 個(gè)精子；在一枚花藥中可以產(chǎn)生 很多 個(gè)花粉。活動(dòng)3：閱讀“產(chǎn)生花粉植株的兩條途徑”，討論并回答下列問題：1．產(chǎn)生花粉植株（即單倍體植株）的兩種途徑：一是花粉通過 胚狀體 階段發(fā)育為植株，二是通過 愈傷組織 階段發(fā)育為植株。2．填寫培育花粉植株的途徑圖解：（ ）花藥中的花粉（ ）（ ）（ 胚狀體 ）（ 愈傷組織 ）（ ）叢芽生根移栽3．胚狀體的結(jié)構(gòu)及其發(fā)育過程與種子相似，所以把胚狀體到從芽的過程稱為 分化 ，而把從愈傷組織到從芽的過程稱為 再分化 。2．材料的選擇：①從花藥來看，應(yīng)當(dāng)選擇（初花期、盛花期、晚花期）的花藥；②從花粉來看，應(yīng)當(dāng)選擇（四分體期、單核期、雙核期、萌發(fā)期）的花粉；③從花蕾來看，應(yīng)當(dāng)選擇（完全未開放、略微開放、完全盛開）的花蕾?！妓伎?〗為什么不選擇使用單核期之前或之后的花粉？單核期之前，花藥質(zhì)地幼嫩，容易破碎；單核期之后，花瓣開始松動(dòng)，消毒困難。2．實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)活動(dòng)5：閱讀“材料的選擇”，回答下列問題：1．選擇花藥時(shí)一般通過 鏡檢 確定花粉發(fā)育時(shí)期，此時(shí)需要對花粉細(xì)胞核進(jìn)行染色，最常用的染色劑是 醋酸洋紅溶液 和 焙花青－鉻釩溶液 ，它們分別可以將細(xì)胞核染成 紅 色和 藍(lán)黑 色。該試劑的配制方法是將 無水酒精和冰醋酸 按體積比為 3：1 的比例混合均勻。活動(dòng)7：閱讀“接種和培養(yǎng)”，回答下列問題：1．剝?nèi)』ㄋ帲合竞蟮幕ɡ?，要? 無菌 條件下除去花萼、花瓣。2．接種花藥：剝?nèi)〉幕ㄋ幰⒖探臃N到 培養(yǎng)基 上。3．培養(yǎng)：花藥培養(yǎng)利用的培養(yǎng)基是 MS 培養(yǎng)基，pH為 ，溫度為 25 ℃，幼苗形成之前（需要、不需要）光照。4．培養(yǎng)20－30d后，花藥開裂，長出 愈傷組織 或釋放出 胚狀體 。5．通過愈傷組織形成的植株，常常會(huì)出現(xiàn) 染色體倍性 的變化，因而需要鑒定和篩選。（三）課堂總結(jié)、點(diǎn)評(píng)本課題有一定難度，成功率較低。最好課前做好時(shí)間規(guī)劃，以提高工作效率。同時(shí)對于興趣較高的同學(xué)可以安排在課外動(dòng)手嘗試，教師提供相關(guān)的技術(shù)指導(dǎo)。為了防止性狀分離并快速繁殖，可以利用該植物的一部分器官或組織進(jìn)行離體培養(yǎng)，發(fā)育出完整植株。涉及知識(shí)點(diǎn)有：組織培養(yǎng)、體細(xì)胞、生殖細(xì)胞等。組織培養(yǎng)就是無性生殖的一種方式，它是由體細(xì)胞培養(yǎng)而來的，含有原物種的全部基因，而花粉粒是生殖細(xì)胞?？梢?，植物組織培養(yǎng)若取自體細(xì)胞則為無性生殖；若取自生殖細(xì)胞則為有性生殖。以上兩個(gè)初級(jí)精母細(xì)胞可產(chǎn)生染色體數(shù)目不正常的配子（以下簡稱不正常的配子）。2. 若不是心寬似海，哪有人生風(fēng)平浪靜。用一些事情，總會(huì)看清一些人。既糾結(jié)了自己，又打擾了別人。4. 歲月是無情的，假如你丟給它的是一片空白，它還給你的也是一片空白。你必須努力，當(dāng)有一天驀然回首時(shí)，你的回憶里才會(huì)多一些色彩斑斕，少一些蒼白無力。學(xué)習(xí)