[理學(xué)]7基因芯片技術(shù)-閱讀頁(yè)
2025-04-29 00:41本頁(yè)面
【正文】 化學(xué)偶聯(lián)X BX C , e t c .B B A C C. . . . .. . . . .平板印刷用擋光板 1h υ固相支物物化學(xué)偶聯(lián)?壓電打印原位聚合技術(shù) 壓電打印原位聚合技術(shù) 其裝置與普通的彩色噴墨打印機(jī)并無(wú)兩樣，所用技術(shù)也是常規(guī)的固相合成方法。沖洗、去保護(hù)、偶聯(lián)等則同于一般的固相原位合成技術(shù)。 優(yōu)點(diǎn)： 設(shè)備廉價(jià)，技術(shù)相對(duì)簡(jiǎn)單，反應(yīng)產(chǎn)率高 缺點(diǎn)： 點(diǎn)陣密度低，易產(chǎn)生交叉污染 ?“點(diǎn)膜”型 合成工作用傳統(tǒng)的 DNA固相合成儀完成，只是合成后用特殊的自動(dòng)化微量點(diǎn)樣裝置將其以比較高的密度涂布于硝酸纖維膜、尼龍膜或玻片上。該方法是目前大多數(shù)中小型公司所采用的方法。 基因芯片制作的關(guān)鍵就是如何將大量的探針?lè)肿庸潭ㄓ谥С治锷希⒈３痔结樂(lè)肿拥臉?gòu)像處于自然狀態(tài)，使探針 DNA 分子能自由地與樣品分子進(jìn)行雜交。這種類型“芯片”的點(diǎn)陣是通過(guò)“點(diǎn)膜”形式制作的，并通過(guò)一定的方法使探針能夠牢固地結(jié)合于其上，整個(gè)過(guò)程類似于斑點(diǎn)雜交技術(shù)（如 CloneTech公司）。當(dāng)前具有此類產(chǎn)品研制能力的公司很少（如 Affimetrix公司）。 集成電路型 將雜交技術(shù)與微電子技術(shù)結(jié)合于一體有目的地通過(guò)電子裝置檢測(cè)或控制 DNA等生物大分子的作用過(guò)程（如 Nanogen公司） 第四節(jié) 基因芯片的雜交及結(jié)果分析 將不同條件下從某生物體中轉(zhuǎn)錄出來(lái)的所有 mRNA 經(jīng)標(biāo)記成為探針后，再與包含它所有基因而制成的芯片雜交。 ?標(biāo)記的方法通常是在反轉(zhuǎn)錄的底物中加入帶有標(biāo)記基團(tuán)的寡核苷酸單體，通過(guò)反轉(zhuǎn)錄將標(biāo)記分子摻入 cDNA 分子中。 一．探針的標(biāo)記 ?在一定的條件下，分子間氫鍵的斷裂與恢復(fù)是 DNA/DNA 、 DNA/RNA 分子間選擇性結(jié)合的根本動(dòng)力，這一過(guò)程稱之為雜交。 以下圖為例，首先將八聚體寡核苷酸所有可能的序列組合合成或固定于片基上，對(duì)于每一序列其在片基上的位置是預(yù)先決定好的。這樣，就會(huì)出現(xiàn)特定的雜交圖譜，有雜交信號(hào)部位的寡核苷酸片段與待測(cè)樣品序列是互補(bǔ)的最后分析產(chǎn)生雜交信號(hào)的寡核苷酸序列的重疊情況進(jìn)而推導(dǎo)出樣品的核酸序列。 圖像的采集用落射熒光顯微鏡 或電荷偶聯(lián)裝置照相機(jī) 非共聚焦激光掃描儀等進(jìn)行。 擬南芥、酵母基因表達(dá)研究等 人類基因組單核苷酸多態(tài)性的鑒定及分型，人線粒體 究等 BRCAⅠ 基因外顯子 11]、 CFTR基因、β地中海貧血、酵母突變菌株、 HIV1逆轉(zhuǎn)錄酶及蛋白酶基因等的突變檢測(cè)等 儀 器 ? 1． 恒溫?fù)u床 ? 2． 培養(yǎng)用錐性瓶 ? 3． 超凈工作臺(tái) ? 4． 離心機(jī) ? 5. 滅菌鍋 恒溫空氣搖床 超凈工作臺(tái) 離心設(shè)備 臺(tái)式高速冷凍離心機(jī) 1 2 對(duì)照菌 GFP誘導(dǎo)表達(dá)菌 電泳儀 儀 器 電泳槽 SDSPAGE凝膠電泳系統(tǒng) 思考題 ? 生物芯片的定義、分類及制作方法？ ? 基因芯片技術(shù)與傳統(tǒng)的 Northern雜交技術(shù)有何異同？ 考試題型 ?一、名詞解釋（每小題 2分，共 10分） ?二、判斷題（每小題 1分，共 10分） ?三、填空題（每空格 ，共 20分） ?四、選擇題（在下列各小題的備選答案中，請(qǐng)把你認(rèn)為正確答案的題號(hào)填入題干的括號(hào)內(nèi)。每題 1分，共 20分） ?五、簡(jiǎn)答題（每小題 6分，共 30分） ?六、問(wèn)答題（ 10分） 總成績(jī) =30%平時(shí)成績(jī) +70%考試成績(jī)
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1