生物化學(xué)課件蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能-閱讀頁
2025-01-31 13:39本頁面
【正文】 亞基 吸附 氧 分子的能力 肌紅蛋白 氧 分 子 環(huán)境氧低時 Hb 迅速 釋放 氧分子 動脈 環(huán)境氧高時 Hb 快速吸收氧分子 (R) 松弛態(tài) (T) 緊張態(tài) 靜脈 釋放氧分子后 Hb 變回 T 態(tài) 肌肉 肺 血紅蛋白 六、蛋白質(zhì)的重要性質(zhì) ?蛋白質(zhì)由氨基酸組成，和氨基酸一樣， 是兩性電解質(zhì)。 ?蛋白質(zhì)帶電的多少，帶電的符號與溶液的pH值有關(guān)。 ?pI的應(yīng)用： ①溶解度最小 —— 分離提純蛋白質(zhì)（沉淀法） ②帶電性質(zhì) —— 分離鑒定蛋白質(zhì)（電泳法） ?蛋白質(zhì)是高分子化合物，在水溶液中形成的顆粒具有膠體溶液的特征如布朗運動、丁達爾現(xiàn)象、電泳現(xiàn)象 ,不能透過半透膜 ,并具有吸附能力。 ①蛋白質(zhì)顆粒表面帶有很多極性基團， 形成 水膜 （水化層） ； ②同種蛋白質(zhì)帶有 同種 電荷 ，相互排斥。 蛋白質(zhì)的沉淀作用 分類： ?可逆沉淀 ：在沉淀過程中，蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)都沒有發(fā)生變化，在適當(dāng)?shù)臈l件下，可以重新溶解形成溶液。 分子在其 pI時，容易互相吸引，聚合沉淀；加入鹽離子會破壞這些吸引力，使分子散開，溶入水中。 （用于分離純化蛋白質(zhì)） 蛋白質(zhì)分子表面的疏水區(qū)域，聚集了許多水分子，當(dāng) 鹽濃度高 時，這些水分子被鹽抽出，暴露出的疏水區(qū)域相互結(jié)合，形成沉淀。 ③加入重金屬 如 HgCl2 、 AgNO3 、 Pb(Ac)2 、 FeCl3 等 與蛋白質(zhì)中帶負(fù)電荷的基團形成難溶鹽 ④加入生物堿和某些酸類 如：秋水仙堿，茶堿 如：鞣酸、單寧酸、苦味酸、三氯醋酸 與蛋白質(zhì)中帶正電荷的基團形成難溶鹽 ? 哪些沉淀為可逆沉淀？ ? 哪些沉淀為不可逆沉淀（變性沉淀 ） ?天然蛋白質(zhì)受到理化因素的影響，分子內(nèi)部嚴(yán)格的空間結(jié)構(gòu)受到破壞，從而引起蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)和生物學(xué)性質(zhì)發(fā)生改變，但 并不導(dǎo)致蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)的破壞 ，這種現(xiàn)象稱為 蛋白質(zhì)變性作用 。 ?變性蛋白的特征： ① 生物活性喪失 （最主要） ； ② 理化性質(zhì)改變 —— 溶解度下降，易沉淀、結(jié)晶能力喪失、粘度增加、擴散速度下降等 。 ? 變性條件若不過于激烈，一旦條件去除，則變性蛋白恢復(fù)原來的構(gòu)象，這種現(xiàn)象叫作變性蛋白的 復(fù)性作用 (renaturation)。蛋白質(zhì)分子中含有許多類似雙縮脲結(jié)構(gòu)的肽鍵 ,所以也能發(fā)生雙縮脲反應(yīng)。 ③米倫氏反應(yīng) (Millon Reaction) 蛋白質(zhì)溶液中加入米倫試劑 (HgNO2 、 HgNO3 、 HNO3和 HNO2的混和液 )，產(chǎn)生白色沉淀，加熱 則變?yōu)榧t色沉淀，此為 Tyr的酚基所特有的 反應(yīng)，因此含有 Tyr的蛋白質(zhì)均有此反應(yīng)。 (可定性定量分析蛋白質(zhì)） ⑤其他顏色反應(yīng) 乙醛酸反應(yīng) 會產(chǎn)生紫色環(huán)，用于鑒定含 Trp的 反應(yīng)； 坂口反應(yīng) 會產(chǎn)生紅色產(chǎn)物，用于鑒定 含 Arg的反應(yīng)； 酚試劑反應(yīng) 是酚試劑與蛋白質(zhì) 反應(yīng)產(chǎn)生藍色化合物。 ? 這三種氨基酸在 280nm 附近有最大吸收峰，因此大多數(shù)蛋白質(zhì)在 280nm 附近顯示強的吸收。 ? 定量可能測不準(zhǔn)
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