20xx年醫(yī)學(xué)專題—參與dna復(fù)制有關(guān)的酶和蛋白質(zhì)-在線瀏覽
2024-11-04 07:10本頁面
【正文】 ,N 端,C 端,DNApol Ⅰ,第十一頁，共五十二頁。 ① 5′→3′聚合活性： 在模板(m每個酶分子每分鐘添加1 000個單核苷酸。,第十三頁，共五十二頁。i qiē)酶活性： 沒有脫氧核苷三磷酸底物時， DNA聚合酶 I 能從3′OH開始以3′→5′方向水解DNA，產(chǎn)生5ˊ單核苷酸。所以聚合酶的3ˊ→5ˊ外切酶活性也叫修補(bǔ)活性。,第十五頁，共五十二頁。i qiē)酶活性： DNA聚合酶I具有5′→3′外切酶活性。,第十六頁，共五十二頁。,切口翻譯(nicktranslation) DNA聚合酶 I 的5ˊ→3ˊ外切酶活性和聚合活性同時(t243。)作用可以進(jìn)行切口翻譯(nicktranslation)，用來制造放射性探針。,第十八頁，共五十二頁。,339。,339。,④ 內(nèi)切酶活性： DNA聚合酶 I 也具有5ˊ→3ˊ 內(nèi)切酶活性，如圖713所示。 很多實驗證明(zh232。ng)DNA聚合酶 I 在大腸桿菌復(fù)制中不是主要的合成酶，而是在除去RNA引物和損傷修復(fù)中起重要作用。,不配對(p232。)的片段,內(nèi)切酶活性,第二十一頁，共五十二頁。o)聚合酶。 ① 從5′→3′方向合成DNA ② 具有3ˊ→5ˊ外切酶活性，但沒有5ˊ→3ˊ外切酶活性。,第二十二頁，共五十二頁。 DNA多聚酶Ⅲ相當(dāng)復(fù)雜(f249。)，其結(jié)構(gòu)和各亞基的功能如圖11－24，25所示?！?39。,第二十三頁，共五十二頁。 α亞基具有(j249。 ε亞基具有3‘→5’外切酶的功能，起到校正的作用。,τ亞基加到核心酶上使其二聚化，進(jìn)一步產(chǎn)生pol III※。ngch233。 γ復(fù)合體是由γ，δ，δ′，χ和ψ亞基組成，其作用是固定β亞基這個“夾子〞的支架。,▼聚合酶Ⅲ的活性 聚合活性： DNA復(fù)制時聚合酶 Ⅲ 全酶十分重要，它可以在DNA模板上的引物的3′OH上以每分鐘約50 000核苷酸的速率逐個延伸新生的DNA。y242。 DNA聚合酶Ⅲ的作用范圍如圖714所示。,第二十六頁，共五十二頁。,(4) 真核生物中的DNA聚合酶 所有真核生物中的聚合酶的性質(zhì)根本上同大腸桿菌中的聚合酶相似，它的活性有賴于模板，帶3′OH的引物，四種脫氧核糖核苷磷酸。 DNA聚合酶α： 在迅速增殖的細(xì)胞(x236。酶分子量在165,000一175,000U之間。是真核生物的復(fù)制酶。,第二十八頁，共五十二頁。在整個細(xì)胞周期中它的活力沒有變化，它利用Dnase I 處理(chǔlǐ)過的天然DNA作模板，對變性DNA幾乎沒有活性，不具外切酶的活性。這個酶可以使用帶缺口的DNA作底物，但以多聚(A)、寡聚(dT)810作為底物，酶活力更高。 DNA聚合酶α和DNA聚合酶δ〔主要復(fù)制酶〕: 是真核生物的復(fù)制酶，主要根據(jù)是聚合酶δ的活性隨細(xì)胞周期而變化。,第二十九頁，共五十二頁。 但兩個鏈都必須與同一另外的鏈互補(bǔ)結(jié)合，而且兩鏈必須相鄰，即只能(zhī n233。 例子：T4誘導(dǎo)的連接酶不僅能在模板上連接DNA和DNA之間的切口，也能連接RNA和RNA之間的切口，不僅能連接DNA中的單鏈切口或雙鏈的粘性末端，而且能連接平頭雙鏈DNA 。,第三十頁，共五十二頁。,3 與解鏈有關(guān)的酶和蛋白質(zhì) DNA是雙螺旋，在復(fù)制中雙螺旋要解開，雙螺旋的解開使得復(fù)制叉前面產(chǎn)生正超螺旋，如果這些應(yīng)力不以某種方式釋放將阻礙復(fù)制叉前進(jìn)。)介紹一些這類蛋白質(zhì)。,(1) 單鏈結(jié)合(ji233。)蛋白 (SSB蛋白) SSB蛋白：是缺乏酶活性的復(fù)制輔助蛋白
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