實(shí)習(xí)二紅細(xì)胞、網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測(cè)-在線瀏覽
2024-10-04 01:03本頁(yè)面
【正文】 倍 第六頁(yè)，共三十三頁(yè)。 ? 用吸管吸取己充分混勻的稀釋血液一滴，滴于蓋玻片的下方邊緣處，稀釋血液即充填入計(jì)數(shù)池中。 ? 計(jì)數(shù) ? 平放計(jì)數(shù)板于顯微鏡臺(tái)上，先用低倍鏡找到計(jì)數(shù)池的中央大方格。 ? 再轉(zhuǎn)換高倍鏡計(jì)數(shù)。如將上側(cè)線和左側(cè)線上的紅細(xì)胞都計(jì)數(shù)在內(nèi)，那么不要再將下側(cè)和右側(cè)線上的細(xì)胞計(jì)入 。 ? 計(jì)數(shù) 5 個(gè)中方格 ( 即四角的及中央的中方格 ) 由紅細(xì)胞總共的個(gè)數(shù)，將其結(jié)果乘以 10 。即得每升血液中所含紅細(xì)胞數(shù)目。 ? 每升血液中紅細(xì)胞數(shù)目 = 五個(gè)中方格內(nèi)紅細(xì)胞個(gè)數(shù) 5( 變?yōu)? ) 10 ( 變?yōu)? 1 u1) 10 6 ( 變?yōu)? 1L) 200( 稀釋倍數(shù) )= 五個(gè)中方格內(nèi)紅細(xì)胞個(gè)數(shù) 10 10 ? 清潔儀器： ? 計(jì)數(shù)后，將蓋玻片及計(jì)數(shù)板用水沖洗干凈，再用綢或細(xì)布擦干 ? 吸管先用蒸餾水，繼用 95% 酒精，后用乙醚洗滌干凈，保存?zhèn)溆? 第九頁(yè)，共三十三頁(yè)。 血紅蛋白測(cè)定 ? 方法：氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法 ? 原理： ? 血紅蛋白 (Hb)被高鐵氰化鉀 [K3Fe(CN)6]氧化為高鐵血紅蛋白〔 Hi〕， Hi與氰離子結(jié)合成氰化高鐵血紅蛋白〔 HiCN〕 ? HiCN在 540nm有一吸收峰 ? 測(cè)定其光密度而得血紅蛋白濃度 第十一頁(yè)，共三十三頁(yè)。 ? 該試劑應(yīng)呈透明、淡黃色， pH在 ～ ，以蒸餾水作空白，在 540nm比色，讀數(shù)是 0 ? 溶液應(yīng)放置棕色試劑瓶中，塞緊后保存于冰箱中〔但不宜凍結(jié)〕，至少可穩(wěn)定數(shù)月 ? 如發(fā)現(xiàn)試劑變綠、渾濁那么不能使用 ? 其中非離子外表活性劑可加速溶血，縮短轉(zhuǎn)化時(shí)間，防止血漿蛋白改變引起的渾濁 第十三頁(yè)，共三十三頁(yè)。 ? 計(jì)算： ? 血紅蛋白〔 g/L〕 = 測(cè)定管光密度〔 64458/44000〕 251 = 測(cè)定管光密度 A ? 式中： 〔 1〕 64458 是目前國(guó)際公認(rèn)的血紅蛋白分子量 〔 2〕 44000 是國(guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)公布的血紅蛋白摩爾吸光度 〔 3〕 251是稀釋倍數(shù) 第十五頁(yè)，共三十三頁(yè)。 [本卷須知 ] ? 用吸血管吸血過(guò)程應(yīng)仔細(xì)、認(rèn)真，準(zhǔn)確把握住吸入的血液量是初學(xué)者的一個(gè)難點(diǎn)，也是實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確與否的一個(gè)關(guān)鍵 ? HiCN稀釋液不能貯存在塑料瓶中，否那么會(huì)使 CNˉ 含量下降，測(cè)定結(jié)果偏低－－應(yīng)貯存在棕色有塞玻璃瓶中 ? 4℃ 冰箱保存一般可用數(shù)月，但不能在 0℃ 以下保存，因?yàn)榻Y(jié)冰可引起高鐵
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