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dna的粗提取和鑒定-在線瀏覽

2025-01-24 01:46本頁面
  

【正文】 過濾可除去部分蛋白質(zhì)及不溶于 NaCl溶液的雜質(zhì) ②當 NaCl溶液稀釋至 mol/L時, DNA析出,過濾可除去溶于 NaCl溶液的部分蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì) DNA不被蛋白酶所水解 加入嫩肉粉 嫩肉粉中含木瓜蛋白酶,水解蛋白質(zhì) ( 酶的專一性) DNA不溶于酒精溶液 加入冷卻酒精 (95%) DNA析出,除去溶于酒精的蛋白質(zhì) DNA可被二苯胺染成藍色 加入二苯胺,并沸水浴 鑒定 DNA 高溫 DNA耐高溫 DNA和蛋白質(zhì)對高溫耐受性不同:蛋白質(zhì)、 DNA熱穩(wěn)定性不同。 DNA對洗滌劑耐受性 洗滌劑能夠瓦解細胞膜,但對 DNA沒有影響。 2) DNA與其他細胞成分在酒精中溶解度不同, DNA不溶于酒精,細胞中某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。但是對 DNA沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受 60~ 80℃ 的高溫,而 DNA在 80℃ 以上才會變性。 提取 DNA的原理包括 DNA的 兩個方面 溶解性和耐受性 實驗原理 6 ①動物 雞血細胞液的優(yōu)點 提醒: 人和哺乳動物成熟的紅細胞中不含細胞核,也沒有DNA,不適于作為 DNA提取的材料,但卻是提取血紅蛋白的理想材料。 7 方法與過程 1).制雞血細胞液 活 雞鮮血 180mL 500mL燒杯中,玻棒 攪拌 ,離心或靜置沉淀。 用兩層紗布過濾濾液中含有 DNA。 ② 整個實驗中 加入 “ 兩次蒸餾水, 三次 NaCl溶液 ,一次酒精 ” 兩次加蒸餾水的目的不同,一是漲破細胞,二是稀釋 NaCl溶液。 ③ 加蒸餾水或加入酒精用玻棒攪拌時 ,動作要 輕緩且朝一個方向 。 使用時注意玻璃棒不要碰到燒杯底。 ⑤二苯胺試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用 ,否則會影響鑒定的效果 .二苯胺是一種有毒性的試劑 ,使用時注意不要讓藥液接觸到皮膚或身
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