抗生素菌種選育的研究發(fā)展-在線瀏覽
2025-04-02 12:50本頁面
【正文】 ：一、誘變育種 發(fā)展簡史： 起源于 20世紀 60年代： 1960年法國 Karski研究小組在 2種不同類型的動物細胞混合培養(yǎng)中發(fā)現(xiàn)了自發(fā)融合現(xiàn)象，同時日本 Okada發(fā)現(xiàn)艾氏腹水瘤細胞易被滅活的仙臺病毒誘導融合，從而開始了細胞融合的探索 。 PEG誘導融合的作用被證明同樣適用于微生物原生質(zhì)體，從而微生物原生質(zhì)體融合技術(shù)迅速建立起來，在酵母、放線菌、霉菌、細菌等多種微生物的種內(nèi)、種間、屬間以至科間很快形成了實驗體系，解除了很多技術(shù)障礙。 1979年 P首先發(fā)表了融合育種提高青霉素產(chǎn)量的報告，從而開創(chuàng)了原生質(zhì)體融合技術(shù)在抗生素育種改良工作中的應用。二、原生質(zhì)體融合技術(shù) 常用的融合子篩選方法：營養(yǎng)缺陷型遺傳標記 失活原生質(zhì)體供體法熒光染色標記抗藥性標記 另外，溫度敏感型、糖發(fā)酵和同化性能、呼吸缺陷和形態(tài)等親本標記選擇方法也用于融合子的篩選，克服了營養(yǎng)缺陷型和抗藥性標記等的缺點，而且更適合于遠緣雜交。二、原生質(zhì)體融合技術(shù) 目前用于抗生素菌種選育的原生質(zhì)體融合技術(shù)相當成熟，已形成 原生質(zhì)體誘變、滅活原生質(zhì)體融合、電誘導原生質(zhì)體融合、原生質(zhì)體再生、原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化 等一系列技術(shù)。 由于原生質(zhì)體融合技術(shù)具有遺傳信息傳遞量大，能克服遺傳障礙，實現(xiàn)遠緣雜交，重組頻率高等優(yōu)點，為遺傳育種提供了一種有效手段，所以不論是方向性還是自覺性，原生質(zhì)體融合技術(shù)均比誘變育種前進了一大步，而且可以消除某一菌株在誘變處理后所出現(xiàn)的產(chǎn)量上升緩慢的現(xiàn)象。 由于鏈霉菌（ Streptomyces griseus） 是合成天然抗生素的最重要的生物，因此基因工程育種技術(shù)在鏈霉菌中應用最為廣泛。此后鏈霉菌的分子生物學發(fā)展很快，已形成了以變鉛青鏈霉菌 （ Streptomyces lividans） 為主的外源基因克隆表達系統(tǒng)。簡介簡介三、基因工程技術(shù) 基因工程技術(shù)的核心是 DNA重組技術(shù) ，即 利用供體生物的遺傳物質(zhì)，或人工合成的基因，經(jīng)過體外或離體的限制性內(nèi)切酶切割后與適當?shù)妮d體在連接酶作用下連接起來形成重組 DNA分子，然后再將重組 DNA分子導入受體細胞或受體生物構(gòu)建轉(zhuǎn)基因生物 ，該種生物就可以按人類事先設(shè)計好的藍圖表現(xiàn)出新的遺傳特征。這主要通過以下途徑實現(xiàn) ：提高限速酶的活力，改變細胞內(nèi)代謝流的方向；增加抗性基因拷貝數(shù)，提高產(chǎn)生菌自身耐受性；增強正調(diào)控作用或者解除負調(diào)控基因的阻遏作用；阻斷支路代謝，增加有效成分；引進抗性突變；組合生物合成（
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