1dna重組技術(shù)的基本工具-在線瀏覽
2025-02-09 00:03本頁面
【正文】 作 小飛守角制作 小飛守角制作 T 磷酸二酯鍵 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 A 小飛守角制作 磷酸二酯鍵 即脫氧核糖、磷酸之間的連接 A T G G C A T C T T C G A A 小飛守角制作 演示 小飛守角制作 重播 小飛守角制作 DNA連接酶 ── “分子縫合針” 切斷的 DNA片段要與受體細胞的 DNA連接，你覺得可以用什么酶？ DNA聚合酶和 DNA連接酶有何相同點和不同點？ 小飛守角制作 二、 DNA連接酶 —— “分子縫合針” 作用： 將雙鏈的 DNA片段連接起來 （連接兩核苷酸之間的磷酸二酯鍵） 小飛守角制作 G A A T T C C T T A A G 即脫氧核糖、磷酸基之間的連接 G P A P 小飛守角制作 DNA聚合酶 小飛守角制作 DNA聚合酶和 DNA連接酶的異同點 ⑴ DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核酸片段 的末端上，形成磷酸二酯鍵；而 DNA連接酶是在兩 個 DNA片段之間形成磷酸二酯鍵，不是在單個核苷 酸與 DNA片段之間形成磷酸二酯鍵。因此 DNA連接酶不需要模板。 小飛守角制作 DNA連接酶 DNA聚合酶 連接 DNA鏈 雙 鏈 單 鏈 連接部位 在兩 DNA片段之間形成磷酸二酯鍵 將單個核苷酸加到已存在的核酸片段的 3’末端的羥基上，形成磷酸二酯鍵 小飛守角制作 DNA聚合酶 DNA連接酶 區(qū)別 1 區(qū)別 2 相同點 尋根問底 ? DNA連接酶與 DNA聚合酶是一回事嗎 ?為什么 ? 1)只能將 單個核苷酸 連接到已有的核酸片段上，形成磷酸二酯鍵 都形成 磷酸二酯鍵 本質(zhì)都是蛋白質(zhì) 1)在 兩個 DNA片段之間 形成磷酸二酯鍵 2)以 一條 DNA鏈為模板 ，將 單個核苷酸 通過磷酸二酯鍵 連接成一條互補的 DNA鏈 2)將 DNA雙鏈上的 兩個缺口同時連接 起來，不需要模板 小飛守角制作 限制酶切割后有兩種不同的結(jié)果，一種產(chǎn)生黏性末端，一種產(chǎn)生平末端。coliDNA連接酶： 連接黏性末端 T4DNA連接酶： 連接黏性末端和平末端 小飛守角制作 種類： Ecoli DNA 連接酶 ? 只能將雙鏈 DNA片段互補的粘性末端之間連接起來，不能將雙鏈 DNA片段平末端之間進行連接 ? T4 DNA 連接酶 ? 既可“縫合”雙鏈 DNA片段互補的黏性末端，又可以“縫合”雙鏈 DNA片段的平末端，但連接平末端之間的效率比較低 小飛守角制作 ③類型： 類型 E切割結(jié)果產(chǎn)生的 DNA片段末端形式為 。還有一種連接平末端的連接酶是 。 被同一種限制切斷的幾個 DNA具有相同的黏性末端。 小飛守角制作 三、基因進入受體細胞的載體 —— “分子運輸車” ： ⑴作為運載工具，將目的基因轉(zhuǎn)移到宿主細
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