dna重組技術(shù)的基本工具(講課)-在線瀏覽
2025-02-09 02:36本頁(yè)面
【正文】 花植株 上述培育抗蟲(chóng)棉的關(guān)鍵步驟是什么？ ? 解決培育抗蟲(chóng)棉的關(guān)鍵步驟需要哪些工具？ “分子手術(shù)刀” —— 限制性核酸內(nèi)切酶 關(guān)鍵步驟一： 抗蟲(chóng)基因從蘇云金芽孢桿菌細(xì)胞內(nèi)提取出來(lái) 關(guān)鍵步驟二： 抗蟲(chóng)基因與棉花 DNA“縫合” 關(guān)鍵步驟三： 抗蟲(chóng)基因進(jìn)入棉花細(xì)胞 “分子縫合針” —— DNA連接酶 “分子運(yùn)輸車(chē)” —— 運(yùn)載體 1 . DNA重組技術(shù) 的基本工具 “分子手術(shù)刀” “分子縫合針” “分子運(yùn)輸車(chē)” 限制性核酸內(nèi)切酶 DNA連接酶 運(yùn) 載體 ? 簡(jiǎn)稱(chēng)： ? 分布： ? 一、限制性核酸內(nèi)切酶 —— “分子手術(shù)刀” 主要在 原核生物 中 限制酶 尋根問(wèn)底 (P4) ? 你能推測(cè)限制酶存在于原核生物中的作用是是什么嗎？ 原核生物易受自然界外源 DNA的入侵 ，但生物在長(zhǎng)期的進(jìn)化過(guò)程中形成了一套完善的防御機(jī)制，以防止外來(lái)病原物的侵害。所以，限制酶在原核生物中主要起到 切割外源 DNA、 使之失效 ，從而達(dá)到 保護(hù)自身 的目的 。這樣，盡管細(xì)菌中含有某種限制酶也不會(huì)使自身的 DNA被切斷，并且可以防止外源 DNA的入侵。 SmaⅠ 平末端 平末端 ? ④作用： ? ⑤結(jié)果： 一、限制性核酸內(nèi)切酶 —— “分子手術(shù)刀” 切割 DNA 產(chǎn)生黏性未端和平末端 ? 特點(diǎn) : ? ? ? 作用： ? 結(jié)果： 簡(jiǎn)稱(chēng)： 分布： 工具 1：限制性核酸內(nèi)切酶 主要在 原核生物 中 限制酶 識(shí)別特定核苷酸列 , 切割特定切點(diǎn) （專(zhuān)一性） 切割 DNA 產(chǎn)生黏性未端或平末端 ? 要想獲得某個(gè)特定性狀的基因必須要用限制酶切幾個(gè)切口？可產(chǎn)生幾個(gè)黏性 (平 )末端？ 要切兩個(gè)切口，產(chǎn)生四個(gè)黏性 (平 )末端。 思考 ? Go back ……GAATTC…… ……CTTAAG…… ……GAATTC…… ……CTTAAG…… EcoRⅠ ……G AATTC…… ……CTTAA G…… ……G AATTC…… ……CTTAA G…… 不同來(lái)源的 DNA片段混合 將不同種來(lái)源的 DNA片段連接起來(lái) 生物 A基因片段 生物 B基因片段 ……G AATTC…… ……CTTAA G…… ……G AATTC…… ……CTTAA G…… 酶切 作用 : 把 DNA片段 拼接成新的 DNA， 作用原理： 催化 磷酸二酯鍵 形成 ,不是氫鍵 二、 DNA連接酶 —— “ 分子縫合針 ” 可把黏性末端之間的 縫隙“縫合”
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