基因工程與蛋白質(zhì)工程-在線瀏覽
2025-02-08 17:41本頁面
【正文】 之間的 磷酸二酯鍵 斷開（ 切割 DNA分子） 來源： 主要從原核細(xì)胞分離 作用 ： 作用結(jié)果： EcoRI 基因工程的“專用工具” 平未端及粘性未端 ?下列四條 DNA分子，彼此間具有粘性末端的一組 （ ） ? ? A．①② B．②③ C．③④ D．②④ 種類： 作用部位： E DNA連接酶 —— “分子縫合針” 運(yùn)載體 ：常用 質(zhì)粒 、 噬菌體、動植物病毒 注意：真正用作運(yùn)載體的質(zhì)粒都 是人工改造過的。 獲取方法： 直接分離法 人工合成法：反轉(zhuǎn)錄法；化學(xué)方法合成法 PCR反應(yīng)合成 DNA 基本操作步驟 編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因 原理： DNA復(fù)制 過程：加熱 DNA解鏈 冷卻引物結(jié)合到互補(bǔ) DNA鏈 互補(bǔ)鏈合成 條件 ：耐高溫 DNA聚合酶 一、目的基因的獲得 直接分離法 （最常用的方法 ——鳥槍法） 人工合成法 化學(xué)合成法 反轉(zhuǎn)錄法 外源 DNA DNA片段 目的基因 多個目的基因 信使 RNA DNA單鏈 雙鏈 DNA 多個目的基因 多個目的基因 蛋白質(zhì)氨基酸序列 目的基因核苷酸序列 目的基因 （一）目的基因的提取 獲取方法： 直接分離法 人工合成法：反轉(zhuǎn)錄法；化學(xué)合成法 PCR反應(yīng)合成 DNA 基本操作步驟 原理： DNA復(fù)制 過程：加熱 DNA解鏈 冷卻引物結(jié)合到互補(bǔ) DNA鏈 互 補(bǔ)鏈合成 條件 ：耐高溫 DNA聚合酶 （ 二）基因表達(dá)載體構(gòu)建 基因表達(dá)載體由 ________、 _______、 ______、 ________四部分組成。 ②啟動子 (DNA片段 )≠ 起始密碼子 (RNA)。 1997年，科學(xué)家將動物體內(nèi)的能夠合成胰島素的基因與大腸桿菌的 DNA分子重組，并且在大腸桿菌中表達(dá)成功。 (1)此圖表示的是采取 __________合成基因的方法獲取 __________基因的過程。 (3) 圖中③代表 ，它往往含 基因，以便對目的基因的檢測。 ① 來源：主要是從 生物中分離純化出來的 。 “ 分子縫合針 ” 。 ② 與 DNA聚合酶作用的異同： 。 最常用的載體是： 。 將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞 ， 最常用的方法是 ， 其次 還有 和 。 將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞：最常用的方法是 。 復(fù)習(xí)回顧 限制性內(nèi)切酶 原核 特定 脫氧 核苷酸 磷酸二酯鍵 DNA連接酶 缺口 載體 細(xì)菌質(zhì)粒 直接分離法、人工合成法 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 基因槍法 花粉管通道法 顯微注射法 受精卵 連接酶在兩個 DNA片段之間形成磷酸二酯鍵 DNA聚合酶將單個脫氧核苷酸加到已存在的核酸片段的 3’端的羥基上，形成磷酸二酯鍵 四、目的基因的表達(dá)與鑒定 基因表達(dá) ?基因表達(dá)指基因組中某基因在細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄為 mRNA和翻譯成蛋白質(zhì)的過程。它往往是細(xì)胞形態(tài)功能變化之前的變化。 下圖為利用生物技術(shù)獲得動物乳腺反應(yīng)器和抗蟲棉的過程，據(jù)圖回答： ⑴在基因工程中， A表示 ，如果直接從蘇云金桿菌中獲得抗蟲基因，①過程使用的酶區(qū)別于其他酶的特點(diǎn)是 ，B表示 。在重組載體的構(gòu)建過程中需要的工具酶有 。 ⑷將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的過程中，在③過程中一般是采用 方法，在②過程中一般采用 方法， 受體細(xì)胞一般是 。 ⑹要確定目的的基因（抗蟲基因）導(dǎo)入棉花細(xì)胞后，是否能穩(wěn)定遺傳并表達(dá)，需進(jìn)行檢測和鑒定工作，請寫出在個體水
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