醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)技術(shù)-在線瀏覽
2025-02-02 02:20本頁面
【正文】 基因組比例約 50%左右，存在間隔區(qū)。 作為一個完整的復(fù)制子，在轉(zhuǎn)化細(xì)胞后能自主復(fù)制，并對細(xì)菌的一些代謝活動和抗藥性表型產(chǎn)生重要作用，即給細(xì)菌帶來特殊標(biāo)志。質(zhì)粒并非細(xì)菌生命活動所必需，其編碼的性狀對細(xì)菌有保護(hù)作用質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)特點環(huán)狀 DNA分子含復(fù)制啟動子，在其下游具復(fù)制起始點 (ori)選擇標(biāo)記多克隆位點 (polylinker)質(zhì)粒特性1. 質(zhì)粒的主要成分為環(huán)狀 DNA分子，分子相對小。4. 限制性內(nèi)切酶單一切口。多克隆位點6. 不相容性 :攜帶相同復(fù)制子的質(zhì)粒不能在同一細(xì)菌中共存。質(zhì)粒的類型按復(fù)制機制： ：在 “嚴(yán)緊 ”控制下復(fù)制的質(zhì)粒。一旦細(xì)胞復(fù)制停止，質(zhì)粒拷貝數(shù)不能增加。 ：高拷貝數(shù)質(zhì)粒，每個細(xì)胞可含10200個拷貝。按質(zhì)粒功能分型F質(zhì)粒 ：決定細(xì)菌的性別，能將宿主染色體基因和它本身轉(zhuǎn)移到另外一個宿主中。F`質(zhì)粒ABC DF`質(zhì)粒F`質(zhì)粒FF`R質(zhì)粒：抗藥性基因包括臨近的兩個 DNA分子片段，一個為 抗性轉(zhuǎn)移因子 （轉(zhuǎn)移基因、 DNA復(fù)制基因等）和 抗性決定因子 （抗青霉素、抗氨芐青霉素等）單獨的抗性決定因子只有在抗性轉(zhuǎn)移因子作用下發(fā)生轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)位因子概念： 轉(zhuǎn)位因子 （ transposable element）可移動的基因成分，即能在一個 DNA分子內(nèi)部或兩個 DNA分子之間移動的 DNA片段。轉(zhuǎn)座子相對于那些可以從一個基因組轉(zhuǎn)移到另外一個基因組的載體而言，如逆轉(zhuǎn)錄病毒或質(zhì)粒等，轉(zhuǎn)座子只是基因組內(nèi)部的載體類似物， 是基因內(nèi)部突變的主要來源。 插入序列的靶序列在插入的過程中被復(fù)制，形成兩個短的正向重復(fù)序列。轉(zhuǎn)座子除了帶有轉(zhuǎn)座的必需的基因外，還可以有編碼轉(zhuǎn)座以外的其他基因。轉(zhuǎn)座子具有一個中心區(qū)，其兩側(cè)各有一個 IS元件。轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座子意義：1 基因重排 2 引入突變 3 產(chǎn)生新的基因二、大腸桿菌 在基因工程中的應(yīng)用：將目的片段重組于載體，并將此重組 DNA轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞內(nèi)，后者便獲得并表達(dá)重組 DNA的遺傳性狀。大腸桿菌的遺傳物質(zhì)：染色體 DNA相對集中形成類核，全長 1100~1400?m，含 4288個開放讀碼框架。大腸桿菌基因組的特點：基因組： 4 639 221個堿基對，約 3 500個基因。大多數(shù)基因 分散排列 在整個染色體的不同區(qū)域，即使相關(guān)的基因也可能分布在不同的部位操縱子結(jié)構(gòu)：功能上相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因常串聯(lián)在一起組成操縱子結(jié)構(gòu)大腸桿菌基因圖譜劃分成 100等份?；蚪M小，基因數(shù)目少，重復(fù)序列少。噬菌體基因無內(nèi)含子，結(jié)構(gòu)連續(xù)；病毒中含有內(nèi)含子，結(jié)構(gòu)間斷。如噬菌體 ?X174基因組的大部分用來編碼蛋白質(zhì)。DNA病毒的特點DNA病毒基因組以雙鏈 DNA為多數(shù)，可以是環(huán)狀也可是線狀。真核 DNA病毒在宿主 細(xì)胞核內(nèi) 復(fù)制。舉例（ — ） SV40猴腎細(xì)胞中分離?；蚪M復(fù)制依賴于宿主，可分為早期復(fù)制和晚期復(fù)制。短鏈（ S（ +）），長短不一， 5`端固定，兩條鏈的 5`端序列互補，保持環(huán)狀結(jié)構(gòu)，同時也是最常整合肝細(xì)胞染色體的 DNA序列。C區(qū) 編碼 HBcAg；前 C和 C區(qū)編碼HBeAg；變異率較大區(qū)域P區(qū) ：是最長的一段，與其他部位有重疊，編碼產(chǎn)物是依賴于 RNA的 DNA聚合酶；X區(qū) ：編碼蛋白為HSxAg，是一種反式作用因子，與病毒基因表達(dá)有關(guān)。結(jié)構(gòu)蛋白為核心蛋白和包膜糖蛋白。其他為非結(jié)構(gòu)蛋白。大部分是 HIV1。單鏈 RNA有 9個基因，其中 3個結(jié)構(gòu)基因（gag、 pol、 env）病毒基因組 5`端和 3`端各有一個長末端重復(fù)順序（ LTR）結(jié)構(gòu)基因為 gag、 pol、 env；非結(jié)構(gòu)基因 tat、 rev、 nef、 vif、 vpr、 vpuGagp24(衣殼蛋白 )有宿主細(xì)胞表面 CD4分子結(jié)合位點envgagpol病毒復(fù)制RNA酶 HHIV病毒復(fù)制第五節(jié) 真核生物基因及其特點真核生物基因組包括 核內(nèi)染色體 DNA和核外 細(xì)胞器 DNA兩部分。生物體的結(jié)構(gòu)與功能越復(fù)雜，基因組 DNA應(yīng)越多， C值越大。難以解釋的現(xiàn)象： 人類基因組 109鹼基對 基因數(shù)僅 3~ 僅 2%~3%的 DNA序列用于編碼蛋白質(zhì) 剩余 DNA具何功能？？ 單順反子結(jié)構(gòu)單順反子 ：一個結(jié)構(gòu)基因經(jīng)過轉(zhuǎn)錄和翻譯生成一個 mRN
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