基因工程部分復(fù)習(xí)-在線瀏覽
2024-11-10 15:42本頁面
【正文】 養(yǎng)、繁殖，或人為的使細胞某些生物學(xué)特性按人們的意愿發(fā)生改變，最終獲得人們所需要的組織、細胞或個體。是細胞工程的最基本技術(shù)。包括病毒融合、化學(xué)融合、和電融合 細胞核移植技術(shù)：利用顯微操作技術(shù)將細胞核與細胞質(zhì)分離，然后再將不同來源的核與質(zhì)重組，形成雜種細胞。 2）、動物細胞培養(yǎng)技術(shù)的建立 1907年， Harrison首先培養(yǎng)了蛙胚神經(jīng)管區(qū)細胞，并觀察到從中長出的軸突細胞（神經(jīng)纖維），他的工作被認為是動物細胞培養(yǎng)開始的標志； 1911年， Carrel發(fā)現(xiàn)了雞胚浸出液對于培養(yǎng)細胞的生長促進作用，并首次把無菌技術(shù)引入組織培養(yǎng)技術(shù)中。 1940年， 1951年， Earle和 Gay分別建立了 c3H小鼠結(jié)締組織細胞系的 L系和人體細胞系－人體宮頸癌 Hela細胞系。 60年代， Harris(1965)誘導(dǎo)不同動物體細胞融合獲得成功并培養(yǎng)存活。該雜種細胞具有在小鼠體內(nèi)和體外培養(yǎng)條件下大量繁殖的能力，并能長期地分泌單克隆抗體，從而建立了小鼠淋巴細胞雜交瘤技術(shù)。 這一成功開創(chuàng)了由體細胞培育動物個體的新型實驗途徑，其貢獻在于： ① 證明了動物細胞仍然具有全能性； ② 初步建立了體細胞核移植的實驗體系， ③ 卵細胞質(zhì)對體細胞核的發(fā)育功能起著關(guān)鍵性的調(diào)節(jié)作用 動物細胞工程的應(yīng)用 ? 動物細胞培養(yǎng)生產(chǎn)醫(yī)藥產(chǎn)品（單克隆抗體） ? 新品種培育 ? 試管動物與嬰兒 ? 組織工程 ? 珍稀動植物資源的保存與保護 （二）、哺乳動物細胞培養(yǎng) 培養(yǎng)對象細胞和性質(zhì) ? 培養(yǎng)對象：哺乳動物細胞和昆蟲動物細胞 ? 哺乳動物細胞種類與性質(zhì) 根據(jù)細胞的壽命，分為 非致死細胞：在體外培養(yǎng)基中不斷增殖，數(shù)目以指數(shù)式形式增加，當細胞密度達到一定程度時，細胞停止分裂，不再生長。這樣可以連續(xù)傳代。 致死細胞：能在體外生存和增殖，但不能連續(xù)傳代，往往分裂幾代或幾十代后就會死亡。 培養(yǎng)過程 1）動物細胞分離和傳代培養(yǎng)過程 A 獲得原代細胞 原代培養(yǎng)：從特定功能組織器官中分離后，無法增殖或處于穩(wěn)定傳代培養(yǎng)前動物細胞，又叫初代細胞。 ? 適應(yīng)在體外培養(yǎng)條件下持續(xù)傳代培養(yǎng)的細胞稱為 傳代細胞 。 細胞系： 經(jīng)過原代培養(yǎng)，細胞逐漸形成具有相似生理即代謝特性的穩(wěn)定細胞系，可供繁殖和多次傳代培養(yǎng)。 細胞株： 從一個經(jīng)過生物學(xué)鑒定的細胞系用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法，由單細胞增殖形成的細胞群，稱細胞株 。 2）動物細胞培養(yǎng)的環(huán)境特性 A 生物特性 具有精細分工、職能專一的細胞器 能夠進行蛋白質(zhì)翻譯后的修飾。 3 動物細胞培養(yǎng)方法 動物細胞的離體培養(yǎng)方法有兩種方式： 1）貼壁培養(yǎng)：貼附在 比表面積 較大的微載體上或直接貼附在反應(yīng)器器壁上， A 對象：大多數(shù)原代細胞 Ｂ貼壁
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