植病研究法---細(xì)菌病害的研究法-在線(xiàn)瀏覽
2024-09-25 22:22本頁(yè)面
【正文】 的細(xì)菌，氯化鋰抑制假單胞菌屬細(xì)菌。 [2]假單胞菌屬 (Pseudomonas) 沒(méi)有特殊的營(yíng)養(yǎng)要求，許多培養(yǎng)基都可用于分離。 ② 金氏培養(yǎng)基 B(King‘s medium B)，分離有熒光的假單胞菌 蛋白胨 甘油 磷酸氫二鉀 (K2HPO4) 硫酸鎂 (MgSO4 熒光假單胞菌在培養(yǎng)基中產(chǎn)生可擴(kuò)散的青或褐色的色素 ，紫外線(xiàn)照射顯示青到藍(lán)色。 ③ Kelmen(1954)TTC培養(yǎng)基： 蛋白胨 酪朊水解物 葡萄糖 瓊膠 蒸餾水 1000ml 分裝 100ml，滅菌后。青枯菌 培養(yǎng) 2天后， 致病力強(qiáng)的野生型菌落白色，或中間有一淡紅色點(diǎn)的菌落；致病力弱或喪失致病力的菌落深紅色，邊緣帶藍(lán)色。7H20) % 瓊膠 % 蒸餾水 1000ml pH ～ 這是 分離 Xanthomonas屬細(xì)菌最常用的培養(yǎng)基 ，也適用于假單胞菌屬、歐文氏菌屬和有些棒桿菌屬的細(xì)菌， ② SX瓊膠培養(yǎng)基 (Schaad and White， 1974) 可溶性淀粉 10g 牛肉浸膏 5g 磷酸二氫鉀 (KH2PO4) 2g 瓊膠 15g 蒸餾水 1000ml 適用于分離可以水解淀粉的 。 [4]歐文氏菌屬 (Erwinia) 前面介紹的培養(yǎng)基有許多也適用于歐文氏菌屬，以下是 對(duì)歐文氏菌具有特色的結(jié)晶紫聚果膠培養(yǎng)基 。2H2O)新鮮配制的 1% 水溶液 瓊膠 2g 硝酸鈉 (NaNO3) 隨后將 聚果膠酸鈉 加入，高速攪拌 15s，分裝三角瓶滅菌后要立即倒入培養(yǎng)皿，制成平板干燥后使用。 [5]棒形桿菌屬 (Clavibacter) 此屬細(xì)菌有些是難培養(yǎng)的。 酵母浸膏 葡萄糖 2.． 5g 磷酸氫二鉀 (K2HPO4) 磷酸二氫鉀 (KH2PO4) 硫酸鎂 (MgSO47H2O) 瓊膠 蒸餾水 1000ml 適用于分離棒桿菌．也適用于 Xanthomonas。不同屬的植物病原細(xì)菌，它們的培養(yǎng)性狀顯然不同。描述時(shí)，要指明培養(yǎng)基、培養(yǎng)時(shí)間和培養(yǎng)溫度等。培養(yǎng)性狀主要是指 生長(zhǎng)量、表面生長(zhǎng)情況、色素的產(chǎn)生、有無(wú)沉淀和特殊氣味 等。 ? 培養(yǎng)液表面下生長(zhǎng)的情況包括混濁程度，是均勻的云霧狀還是形成團(tuán)粒狀和片狀的菌團(tuán)。 [2]瓊膠斜面培養(yǎng)性狀 斜面的培養(yǎng)性狀 : 生長(zhǎng)量的多少、菌苔的形狀、顏色光澤和粘度，以及培養(yǎng)基的顏色和有無(wú)特殊的氣味等 。菌苔的表面有光滑的、不平整的和有皺褶的。菌苔有透明的、半透明或不透明的，表面有暗色的或發(fā)亮的。瓊膠平板上菌落的觀(guān)察主要是：形狀和大小、顏色和光澤、表面是否隆起或凹陷、邊緣的形狀、透明度和粘度、培養(yǎng)基顏色的變化等。黃單胞菌屬的細(xì)菌能夠形成非水溶性的黃色素，所以菌落是黃色的。如玉米蔫萎病細(xì)菌，曾經(jīng)分在黃單胞菌屬中，但是根據(jù)它的黃色素與黃單胞菌屬的細(xì)菌顯然不同，現(xiàn)在已經(jīng)分在泛生菌屬 (Pantoea)。有些棒桿菌屬細(xì)菌也能形成黃色菌落。假單胞菌屬細(xì)菌能否產(chǎn)生熒光性色素，是很重要的分類(lèi)特征。為了測(cè)定假單胞菌屬細(xì)菌色素的產(chǎn)生，可用特殊的如金氏培養(yǎng)基 ,有兩種配方： 培養(yǎng)基 I 培養(yǎng)基 Ⅱ 蛋白胨 2g 2g 硫酸鉀 (K2SO4) lg 一 甘油 1g 1g 氯化鎂 (MgCl2) 一 磷酸氫二鉀 (K2HPO4) 一 硫酸鎂 (MgSO4培養(yǎng)基 I 適用于觀(guān)察非熒光性色素，培養(yǎng)基 Ⅱ 適用于觀(guān)察熒光性色素。 四、細(xì)菌的計(jì)數(shù) ? 細(xì)菌的繁殖量、植物接種和血清學(xué)方面的研究都要求知道細(xì)菌的數(shù)量。 ? 前兩種方法是計(jì)數(shù)活的和死的細(xì)菌的總數(shù)，后一種方法是測(cè)定活細(xì)菌數(shù)目。它是一塊很厚的載玻片，上面劃有每邊長(zhǎng)為 ，方格的深度是 mm。 ? 測(cè)定時(shí)注意事項(xiàng)： ? （ 1）取待測(cè)稀釋菌懸液向血球計(jì)數(shù)板加樣前，須將菌懸液充分搖勻。 實(shí)驗(yàn)步驟 ? 鏡檢計(jì)數(shù)室：對(duì)計(jì)數(shù)室進(jìn)行鏡檢，若內(nèi)有污物，清洗后才能計(jì)數(shù)。靜置 5min。位于格線(xiàn)上菌體只計(jì)上邊線(xiàn)和左邊線(xiàn)上的，如果出芽酵母芽體大小達(dá)到母細(xì)胞一半時(shí)，可計(jì)作兩個(gè)菌體。
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