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干細(xì)胞標(biāo)記物-在線瀏覽

2024-09-25 21:28本頁面
  

【正文】 造血干細(xì)胞分化為各系的祖細(xì)胞和成熟細(xì)胞時(shí),會(huì)出現(xiàn)各系細(xì)胞的專一標(biāo)志,即系表面抗原 如 : 淋巴 系 : CD1 CD7 粒 系 : CD1 CD1 CD1 CD16 紅 系 : CD3 CD4 CD5 CD5 CD71; 單核 系 : CD14 巨核 系 : CD3 CD4 CD4 CD6 CD107 B淋巴系 : CD1 CD CD2 CD22 T/NK 系 : CD CD CD1 CD2 CD26 檢測(cè)造血祖細(xì)胞時(shí),可選擇其中 35個(gè)代表各系的抗原。 Thy1是用來鑒別造血干細(xì)胞的種系特異性標(biāo)志物 .Thy1在 CD34陽性細(xì)胞中表達(dá)最高, 是比CD34更早期的造 血干 /祖細(xì)胞表面標(biāo)志 ,并且當(dāng)造血干細(xì)胞開始表達(dá)其分化細(xì)胞類型 (如 CD45RA, CD38,和 CD71)時(shí),他的表達(dá)開始下降 . 小鼠造血干細(xì)胞表達(dá)底水平 Thy1。 干細(xì)胞抗原 ( stem cell antigen1,Sca1) Sca1是 18kDa磷脂酰肌醇錨定蛋白,屬 Ly6(一種胞漿膜蛋白) 抗原家族成員。 一種抗 Sca1抗體經(jīng)常和一些細(xì)胞表面標(biāo)志分子表達(dá)的陰性選擇一起用來鑒定和分離小鼠 HSCs。 Sca1在幾種非造血組織中也被發(fā)現(xiàn)。 有人自骨髓中 Thy1Io、 Lin、 Sca1+細(xì)胞群中,可分離純?nèi)嗽煅杉?xì)胞。 Ckit可編碼一種穿膜酪氨酸激酶受體分子。 人類 60%75%的 CD34+造血細(xì)胞同時(shí)表達(dá) ckit分子。 小鼠多能干細(xì)胞表面分子標(biāo)志可視為 Thy1Io、 WGA+、ckit+、 Lin。 胸腺及骨髓中 ckit+細(xì)胞分化機(jī)制 胸腺 ckit 骨髓 ckit 粒細(xì)胞系 - + 單 核 細(xì) 胞系 - + 紅細(xì)胞系 - + T細(xì)胞 + + B細(xì)胞 + + CD34 CD34 :是一種細(xì)胞表面的唾液粘蛋白 CD34抗原被認(rèn)為是造血干細(xì)胞 (HSCs) 的標(biāo)志物 Osawa等人首先證明小鼠 HSCs可以是 CD34陰性 人的 CD34陰性細(xì)胞也有低水平的嫁接和造血能力 移植研究表明胎綿羊 CD34陰性細(xì)胞有重新繁殖的能力 CD34CD38: 研究表明 CD34 + 細(xì)胞群中 , 99 %同時(shí)表達(dá) CD38 + ,而 CD34 + CD38 細(xì)胞不僅形態(tài)上缺少分化的特征 ,而且體外細(xì)胞長(zhǎng)期培養(yǎng)能形成 CFU2Blast. CD38 抗原是造血干細(xì)胞向多系分化的標(biāo)志之一 ,并隨分化過程其表達(dá)水平 增高 ,多能造血干細(xì)胞為CD38 。 CD34+CD34 : 通過一系列研究提出 ,成年小鼠骨髓造血干細(xì)胞位于 CD34 低表達(dá)和陰性組份 (CD34low/ ) ,輸入單個(gè)小鼠 CD34low/ ckit + Sca1 + 及系列標(biāo)志 (Lin ) 細(xì)胞可使 21 %的受者獲得長(zhǎng)期淋巴系統(tǒng)重建。并且對(duì)人類、羅猴、豬骨髓的研究也表明存在現(xiàn)在尚未被認(rèn)識(shí)的缺乏CD34 表面標(biāo)志的造血干細(xì)胞群體。 CD133可以作為用 CD34篩選 HSC和體外擴(kuò)增的補(bǔ)充。 CD133 + 。 目前認(rèn)為 AC133可代替 CD34作為造血干祖細(xì)胞標(biāo)志。 AC133抗體分選干細(xì)胞在白血病的的治療中優(yōu)于 CD34 ABCG2: ABCG2 (ATPbinding cassette superfamily G member 2) 廣泛存在于各種干細(xì)胞上,并決定了 SP細(xì)胞的 Hoechst 陰性染色表型。因此在原始 HSC分離鑒定上, ABCG2比 CD34更有希望 ABCG2在 SP細(xì)胞上的專一表達(dá)提示 ABCG2可能成為是成體多能干細(xì)胞陽性篩選的潛在標(biāo)志物 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體 2( KDR/VEGFR2) 是造血干細(xì)胞的表面標(biāo)志 多能干細(xì)胞限于 CD34+和 KDR+部分 CD34+KDR細(xì)胞亞群則主要包括一些系特異定向祖細(xì)胞 KDR 受體 (血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體 ) 可作為一種判別 HSC 和 造血祖細(xì)胞 ( hematopoietic progenitor cells , HPC) 的標(biāo)志。 應(yīng)用 FACS即可自骨髓中 Lin/WGA+細(xì)胞群中分離造血干細(xì)胞 未分化造血干細(xì)胞表面標(biāo)志 : 小鼠 人 CD34/Low CD34+ Scal+ CD59+ Thy1+/Low Thy1+ CD38+ CD38/Low cKit+ cKit/Low Lin Lin 造血干細(xì)胞的鑒定 細(xì)胞形態(tài):集落呈非貼壁生長(zhǎng),細(xì)胞形態(tài)較小 細(xì)胞表面標(biāo)志 : Lin, Thy1,Sca1,Kit,CD34,CD133 ABCG2,KDR/VEGFR2,其它: CD38 , WGA 基因表達(dá):轉(zhuǎn)錄因子 TAL1,GATA2。 現(xiàn)常用 CD34+、 CD3 Lin; CD34+、 CD3 DR等參數(shù)精選干 /組細(xì)胞 ) 間質(zhì)干細(xì)胞的標(biāo)志物 STRO1 CD4 SH2 、 SH3CD2 CD7 CD90、CD10 CD1 CD124 Ⅰ 、 Ⅱ 和 Ⅲ 型膠原 () 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞( MSC)檢測(cè) : ① 形態(tài)和培養(yǎng)特性 : MSC體積小,梭形,核漿比大,能連續(xù)傳代培養(yǎng)。不表達(dá) Ⅰ 、 Ⅱ 和 Ⅲ型膠原及造血干細(xì)胞表面標(biāo)記 。分化差的細(xì) 胞則相反。也有檢測(cè)發(fā)現(xiàn)分化細(xì)胞中有Brain3,谷氨酰氨受體亞單位 GluR4和 GluR6,遞質(zhì)合成酶 TH和 GAD67, GAD65, GFAP和 NFL的表達(dá) 肌干細(xì)胞: Cmet酪氨酸轉(zhuǎn)氨酶, M鈣粘蛋白 至少有 3種骨骼肌來源的干細(xì)胞: ①衛(wèi)星細(xì)胞 ②背主動(dòng)脈壁中的細(xì)胞 ③側(cè)群細(xì)胞是骨髓或肌肉中含有肌干細(xì)胞的一群細(xì)胞 鑒別要點(diǎn): 成纖維細(xì)胞扁平多突起,胞質(zhì)豐富 衛(wèi)星細(xì)胞呈
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