干細胞標(biāo)記物(存儲版)
【正文】 322個活躍基因。 反義顯像：是通過螯合劑將金屬核素 (99mTc、 111In等 )與反義寡核苷酸連接 (RASON)，在細胞內(nèi)與靶基因的 m RNA 互補結(jié)合顯像，以反映目標(biāo) DNA 轉(zhuǎn)錄情況。 干細胞標(biāo)記及活體示蹤 在移植前對干細胞進行合適的標(biāo)記 ,能夠?qū)σ浦埠蟮母杉毎捌浞只毎c宿主自身細胞加以鑒別和示蹤 光鏡及電鏡常用細胞標(biāo)記物質(zhì) : Hoechst(藍色熒光 ) ， DiI， PKH67(綠色熒光 )和 PKH26(紅色熒光 )等熒光色素。分化中單核細胞相融合最后形成多核肌細胞。β 主要珠蛋白 (人造血干細胞表現(xiàn)為 CD34+和 Thylo, 而 CD10， CD14， CD15， CD16，CD19， CD20皆為陰性。表達于 20 %～ 60 %的人 CD34 + 細胞 ,被認(rèn)為是定向為粒單系祖細胞的標(biāo)記 AC1332： 一種 CD133異構(gòu)體 , 被鑒定為可被 AC133抗體識別的原始表面抗原。 CD34CD45: 研究發(fā)現(xiàn) CD34 + 細胞往往同時表達 CD45 抗原 (LCA ) 并以 180 KD 的 CD45RO 和200 KD 的 CD45RA 兩種異構(gòu)體為主 ,并通過實驗證明 ,造血干細胞在分化過程中CD45 抗原表達 , 早期是以 CD45RO 為主 ,在分化過程中 CD45RA 表達上調(diào)。 Kit： 原癌基因 ckit表達產(chǎn)物（又叫干細胞因子受 體 SCFR,CD117） ,表達于幾乎所有小鼠造血干細胞。 表型為 Thy1Low的細胞群能完全重建受致死量照射宿主的淋巴造血系統(tǒng)。 受體： （ receptor）是一種能夠識別和選擇 性結(jié)合某種配體（信號分子）的大 分子物質(zhì) 受體與配體間的作用具有三個主要特征： ① 特異性； ② 飽和性； ③ 高度的親和力。 干細胞表面分子功能： 參與干細胞的分化調(diào)控 維持干細胞的自我更新和多能性 參與機體重要的生理和病理過程 “通用的 ” 干細胞標(biāo)記： ABCG2/Bcrp1 （ St. Jude Children39。 一種抗 Sca1抗體經(jīng)常和一些細胞表面標(biāo)志分子表達的陰性選擇一起用來鑒定和分離小鼠 HSCs。 人類 60%75%的 CD34+造血細胞同時表達 ckit分子。并且對人類、羅猴、豬骨髓的研究也表明存在現(xiàn)在尚未被認(rèn)識的缺乏CD34 表面標(biāo)志的造血干細胞群體。 AC133抗體分選干細胞在白血病的的治療中優(yōu)于 CD34 ABCG2: ABCG2 (ATPbinding cassette superfamily G member 2) 廣泛存在于各種干細胞上，并決定了 SP細胞的 Hoechst 陰性染色表型。不表達 Ⅰ 、 Ⅱ 和 Ⅲ型膠原及造血干細胞表面標(biāo)記 。 磷酸肌酸激酶（ CK）， CKMM亞型， Cmet酪氨酸轉(zhuǎn)氨酶和 M鈣粘蛋白等指標(biāo)。 活體示蹤干細胞常用的細胞標(biāo)記物質(zhì)及其在影像學(xué)的應(yīng)用 1. 核醫(yī)學(xué)分子顯像技術(shù)活體示蹤干細胞 : SPECT (single photon emission puted tomography， SPECT) PET (positronem issiontom ography， PET)。 哈佛大學(xué)的 Miguel RamalhoSantos等報告了一項類似研究的類似發(fā)現(xiàn)。 轉(zhuǎn)鐵蛋白受體 (transferrin receptor， TfR) (4)基因表達顯像 報告基因表達顯像：又稱轉(zhuǎn)基因表達顯像，將能夠表達可測表型 (酶、受體， 轉(zhuǎn)運體等 ) 的特定核苷酸序列 (報告基因 )與靶基因偶聯(lián)，通過測定表型蛋白間接 反映靶基因的表達。 未分化的精原細胞表達低水平的 ckit及低量的特異染色質(zhì)。也有檢測發(fā)現(xiàn)分化細胞中有Brain3，谷氨酰氨受體亞單位 GluR4和 GluR6，遞質(zhì)合成酶 TH和 GAD67, GAD65, GFAP和 NFL的表達 肌干細胞： Cmet酪氨酸轉(zhuǎn)氨酶， M鈣粘蛋白 至少有 3種骨骼肌來源的干細胞： ①衛(wèi)星細胞 ②背主動脈壁中的細胞 ③側(cè)群細胞是骨髓或肌肉中含有肌干細胞的一群細胞 鑒別要點： 成纖維細胞扁平多突起，胞質(zhì)豐富 衛(wèi)星細胞呈球形，貼壁后絕大多數(shù)為梭形或紡錘形，相鄰細胞間以細絲拉網(wǎng)，少數(shù)有突起呈不規(guī)則形，能合成骨骼肌特有的磷酸肌酸激酶 CKMM亞型，還有肌動球蛋白等。 應(yīng)用 FACS即可自骨髓中 Lin/WGA+細胞群中分離造血干細胞 未分化造血干細胞表面標(biāo)志 ： 小鼠 人 CD34/Low CD34+ Scal+ CD59+ Thy1+/Low Thy1+ CD38+ CD38/Low cKit+ cKit/Low Lin Lin 造血干細胞的鑒定 細胞形態(tài)：集落呈非貼壁生長，細胞形態(tài)較小 細胞表面標(biāo)志 : Lin, Thy1,Sca1,Kit,CD34,CD133 ABCG2,KDR/VEGFR2,其它： CD38 ， WGA 基因表達：轉(zhuǎn)錄因子 TAL1,GATA2。 CD133 + 。 胸腺及骨髓中 ckit+細胞分化機制 胸腺 ckit 骨髓 ckit 粒細胞系 － + 單 核 細 胞系 － + 紅細胞系 － + T細胞 + + B細胞 + + CD34 CD34 ：是一種細胞表面的唾液粘蛋白 CD34抗原被認(rèn)為是造血干細胞 (HSCs) 的標(biāo)志物 Osawa等人首先證明小鼠 HSCs可以是 CD34陰性 人的 CD34陰性細胞也有低水平的嫁接和造血能力 移植研究表明胎綿羊 CD34陰性細胞有重新繁殖的能力
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