南農傳染病實習報告-在線瀏覽
2024-09-15 03:50本頁面
【正文】 mL） 121℃，1520min用之前每只試管加1μL血清，1μLNAD血清：用前要滅能（56℃， 40min）3. 生理鹽水： NaCI 加入50mL去離子水，然后高壓滅菌4. 細胞維持液：在50ml的DMEM液中加入1ml的血清和1ml的雙抗（青、 鏈霉素）；（四） 倒TSA平板將TSA溶液高壓后冷卻至60℃左右。標記好班級，組號，名稱和時間第二天：豬體剖解、細菌學檢查和病毒學檢查病料取樣。（一）外部檢查觀察被毛和營養(yǎng)狀況，檢查四肢、眼結膜的顏色、皮膚等有無異常，下頜淋巴結是否有腫脹現(xiàn)象，肛門附近有無糞便污染等。因為豬對麻醉藥不敏感，故不使用麻藥，直接放血致死。3. 腹腔剖開從劍狀軟骨后方沿腹壁正中線由前向后至恥骨聯(lián)合切開腹壁，再從劍狀軟骨沿左右兩側肋骨后緣切開至腰椎橫突。按照脾、腸、胃、腎的次序檢查，并逐一取出腹腔臟器，觀察臟器有無病變。5. 注意事項：a) 剖檢過程中要注意個人防護，剖檢人員必須帶手套，防止手劃傷感染。c) 剖檢中要做記錄，將每項檢查的各種異?，F(xiàn)象詳細記錄下來，以便根據(jù)異?，F(xiàn)象做出初步診斷。具體操作如下：a) 右手執(zhí)筆式持接種環(huán)，在酒精燈火焰上灼燒接種環(huán)，待冷；b) 左手抓緊瓊脂培養(yǎng)基平皿，用手掌將平皿的底固定，用手指將平皿的蓋略抬起一些，進行接種。40176。溫箱內培養(yǎng)2448小時（培養(yǎng)后可出現(xiàn)多種菌落，注意區(qū)分不同培養(yǎng)時間點不同類型菌類形態(tài)）。3．病毒學病料處理a) 臨床上各種疾病的癥狀非常相似，而且極易發(fā)生混合感染，因此確診需 依賴于實驗室的診斷。b) 用剪刀剪取病變明顯的肺臟部位，置于小青瓶或平皿中，用小剪刀剪成大小約1mm3的碎塊，然后加入等量滅菌生理鹽水或PBS，置于玻璃勻漿器中進行勻漿，組織勻漿液倒入小青瓶中，置于20℃冰箱凍存?zhèn)溆谩?四) 實驗結果1. 剖解記錄表格時間：2013528地點：逸夫樓4017組號： 第五組品種： 乳豬性別：公年齡： 不詳外部檢查體表被毛粗亂，體形消瘦；可站立，眼結膜顏色正常；腰臀皮膚可見芝麻到綠豆大的紅點，肛門附近無糞便污染狀況，耳朵、胸、腹、背、四肢：全身有不同體積的瘀血斑，可視粘膜發(fā)紺，關節(jié)有輕微腫脹，站立姿勢不穩(wěn)，肛門周圍有少量糞便污染。腹股溝淋巴結腫脹，橫切斷面也有出血點，肺門淋巴結腫脹，腹股溝淋巴結腫脹，發(fā)紅，顏色不均，質地較硬，表面凹凸不平呈結節(jié)狀變化類似，髂下淋巴結，腫脹明顯，表面更不平整。心臟無明顯病變，肝正常肺門淋巴結顏色變紅，有腫脹變化和結節(jié)狀結構。腎表面有點狀出血點，被膜松軟，光澤低， 2. 鏡檢結果可能由于細菌含量較低，所以只能看見肺組織細胞，未能見到副豬嗜血桿菌，后來對于副豬嗜血桿菌的陽性培養(yǎng)液進行涂片鏡檢觀察，可以見到紅色的細短桿菌。明天觀察。b) 將滅菌的小濾器置于無菌的小青瓶上，用注射器吸取離心后的上清，將注射器與濾器相接，用力壓注射器活塞，使上清通過濾器，濾液即為無菌的含有病毒的組織上清，置于20℃冰箱凍存?zhèn)溆没蚪臃N細胞。c) 使其鋪滿細胞表面，置于37℃二氧化碳培養(yǎng)箱孵育半小時；d) 棄去組織濾液，在細胞中加入細胞維持液500μL，37176。（三） 結果1. 接種剖解豬的肺臟的病料的培養(yǎng)皿上沒有長菌，長的也是污染的菌，因為菌落形態(tài)較大，白色。4. 編號1的是陽性疑似副豬，編號3為疑似巴氏桿菌的培養(yǎng)，待明天上午觀察結果。(三) 細菌的藥敏試驗1. 用涂布棒將1號與3號細菌接種于TSA平板上，將各種抗菌藥物圓紙片（任選7種）分別貼于培養(yǎng)基表面，各片距離要相等，37℃培養(yǎng)，培養(yǎng)24h檢查。我們小組選擇的是環(huán)丙霉素、紅霉素、諾氟沙星、阿莫西林、林可霉素、復方新諾明、阿奇霉素3. 結果判定：根據(jù)藥物紙片周圍有無抑菌圈及其直徑大小，來判斷細菌對藥物的敏感程度。(四) 細菌的生化試驗1. 用接種針（無菌）取分離的細菌24h純培養(yǎng)物分別接種到含葡萄糖、蔗糖、果糖、半乳糖、D核糖和麥芽糖培養(yǎng)基的生化管內，開口向下，放滅菌培養(yǎng)皿中，37℃培養(yǎng)24h，觀察結果并記錄。a) 糖類分解試驗：原理：接種細菌若發(fā)酵某種糖或醇，可產酸，使培養(yǎng)液顏色由紫色變?yōu)辄S色；如發(fā)酵的同時又產生氣體，培養(yǎng)液顏色由紫色變?yōu)辄S色的同時，在微量發(fā)酵管頂部積有氣泡。產酸，培養(yǎng)液顏色由紫色變?yōu)辄S色；產酸產氣，培養(yǎng)液顏色由紫色變?yōu)辄S色，并在微量發(fā)酵管頂部積有氣泡。接種方法及結果判定：用接種環(huán)將細菌培養(yǎng)物接種與尿素瓊脂斜面，不要穿刺到底，下部留作對照。陽性反應，則瓊脂斜面有粉紅到紫紅色。c) 氧化酶試驗原理：氧化酶或稱細胞色素氧化酶，是細胞色素呼吸酶系統(tǒng)的終末呼吸酶。接種方法及結果判定：取白色潔凈濾紙沾取菌落。陰性于兩分鐘內不變色。 接種方法及結果判定：取槽置于潔凈的試管內或玻片上，然后加3％過氧化氫數(shù)滴；或直接滴加3％過氧化氫于不含血液的細菌培養(yǎng)物中
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