二元手性選擇體系毛細(xì)管電泳分離檢測未衍生化氨基酸對映體的研究-在線瀏覽
2024-09-14 13:35本頁面
【正文】 效簡便、分析成本低。苯丙氨酸(Phe)是一種重要的氨基酸，是人和動物8種必需氨基酸的其中之一，其結(jié)構(gòu)如圖Ⅰ所示。L苯丙氨酸是人和動物所需要的一種氨基酸，而D苯丙氨酸是生產(chǎn)艾滋病病毒抑制劑的重要中間體[3]。目前已經(jīng)報道的苯丙氨酸對映體的拆分方法，主要有高效液相色譜[5]、手性膜法[6]、薄層色譜[7]、離子色譜法[8]和毛細(xì)管電泳[9]等。電導(dǎo)檢測法具有通用性，氨基酸無須經(jīng)過衍生即可檢測，操作大大簡化，是氨基酸一種理想的檢測方法。2 實驗部分 儀器與試劑CES2003毛細(xì)管電泳儀（高壓電源、電導(dǎo)檢測器、毛細(xì)管電泳數(shù)據(jù)工作站，中山大學(xué)化學(xué)與化學(xué)工程學(xué)院研制）；pHS3C精密酸度計（上海偉業(yè)儀器廠）；石英毛細(xì)管柱50 cm50 181。 圖Ⅰ 苯丙氨酸的結(jié)構(gòu)式(Phe, pI = )Fig.ⅠThe structure of Phenylalanine and Lysin (Phe, pI = )氫氧化鈉（NaOH，廣州化學(xué)試劑廠，分析純）、檸檬酸(Cit，天津市大茂化學(xué)試劑廠，分析純)、乙酸銅（Cu(CH3COO)2所用水為超純水。實驗時，各取適量以制得不同濃度的電泳運行液。 實驗方法毛細(xì)管柱在使用前依次用去離子水、 mol/L HCl溶液、去離子水、 mol/L NaOH溶液、去離子水和運行緩沖液分別沖洗約5 min，檢測電極用超聲波清洗，電極及檢測池的制作參見文獻(xiàn)[10]。實驗在室溫（25℃）、相對濕度75%的實驗條件下進(jìn)行。因此采用Cu(II)LLysHPMC的運行體系，本文認(rèn)為HPMC和Cu(II)LLys形成二元手性選擇劑協(xié)同體系，提高了對映體的分離度。本實驗通過固定Cu(II) mmol/L，改變L賴氨酸的濃度( mmol/L, mmol/L, mmol/L, mmol/L)，考察了不同摩爾配比對分離度的影響，見表I所示。因此，本實驗選擇銅和L賴氨酸絡(luò)合物的最佳配比為1 : 2。逐漸增大絡(luò)合物的濃度，分離度提高，對映體遷移時間減少； mmol/L時，分離度明顯下降，對映體得不到分離（見表I）。圖Ⅱ 三種不同的手性選擇體系對分離度的影響Fig.Ⅱ The effect of three different chiral selectors on the resolutiona. Cu(II) b. Cu(II)+Llys c. Cu(II)+LLys+HPMCConditions: (concentration of Cu(II), LLys, HPMC: mmol/L, mmol/L, 20 mg/L)。 working voltage: 15 kV。 injection voltage: kV.表I 銅和L賴氨酸絡(luò)合物配比和濃度對分離度的影響Tab. I The effect of concentration ratio of Cu(Ⅱ) to LLys , concentration of Cu(Ⅱ) and LLys on the resolutionconcentration ratio of Cu(Ⅱ) to LLys(mmol/L : mmol/L)1 : 11 : 1 : 21 : 3Rs0 concentration of Cu(Ⅱ) and LLys(mmol/L : mmol/L) : : : : Rs Conditions: mmol/L NaOH+ mmol/L Cit+ 20 mg/L HPMC。圖Ⅲ 羥丙基甲基纖維素（HPMC）結(jié)構(gòu)式Fig.Ⅲ The structure
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