實(shí)驗(yàn)52高效毛細(xì)管電泳電導(dǎo)檢測(cè)法分離檢測(cè)水中陰離子-在線瀏覽
2025-05-31 23:28本頁(yè)面
【正文】 帶展寬較大）。 6. 影響電滲流的因素 （ 1）電場(chǎng)強(qiáng)度的影響 電滲流速度和電場(chǎng)強(qiáng)度成正比，當(dāng)毛細(xì)管長(zhǎng)度一定時(shí)，電滲流速度正比于工作電壓。分析時(shí)，采用緩沖溶液來(lái)保持 pH穩(wěn)定。 緩沖溶液離子強(qiáng)度，影響雙電層的厚度、溶液黏度和工作電流，明顯影響電滲流大小。 （ 4）溫度的影響 毛細(xì)管內(nèi)溫度的升高，使溶液的黏度下降，電滲流增大。 溫度每變化 1℃ ，將引起背景電解質(zhì)溶液黏度變化 2%～ 3%； 加入濃度較大的中性鹽，溶液離子強(qiáng)度增大，使溶液的黏度增大，電滲流減小。 加入陰離子表面活性劑，如十二烷基硫酸鈉（ SDS），可以使壁表面負(fù)電荷增加， zeta電勢(shì)增大，電滲流增大； 加入有機(jī)溶劑如甲醇、乙腈，使電滲流增大。 (absolute mobility)μab 無(wú)限稀釋溶液中帶電離子在單位電場(chǎng)強(qiáng)度下的平均遷移速度，簡(jiǎn)稱淌度。 (effective mobility)μef 實(shí)際溶液中的淌度 (實(shí)驗(yàn)中測(cè)定的 )。有關(guān)色譜理論也適用。22 ??????????? Y tnDELDLVLn Refapefap mm 擴(kuò)散系數(shù)小的溶質(zhì)比擴(kuò)散系數(shù)大的分離效率高，分離生物大分子的依據(jù)。 影響分離度的主要因素；工作電壓 V；毛細(xì)管有效長(zhǎng)度與總長(zhǎng)度比；有效淌度差。 改善方法： （ 1）減小毛細(xì)管內(nèi)徑； （ 2）控制散熱； HPCE中的進(jìn)樣方式 進(jìn)樣量：毛細(xì)管長(zhǎng)度的 1%2%；納升級(jí)、非常??； 1. 流體力學(xué)進(jìn)樣方式 （ 1）進(jìn)樣端加壓力（一般為氣壓） （ 2）出口端抽真空 （ 3）虹吸進(jìn)樣 tLPd?1 2 8π4??進(jìn)樣體積2. 電動(dòng)進(jìn)樣方式 毛細(xì)管兩端加一個(gè)合適的電壓，樣品中離子的組分通過(guò)電遷移進(jìn)入毛細(xì)管中。 可以通過(guò)電堆積效應(yīng)提高靈敏度。 4. 電滲流進(jìn)樣方式 樣品中的組分（特別是中性組分）通過(guò)電滲流的作用進(jìn)入毛細(xì)管中，是電動(dòng)進(jìn)樣的延伸。 HPCE的分離模式 1. 自由區(qū)帶模式 （ CZE) 帶電粒子的遷移速度 =電泳和電滲流速度的矢量和。 最基本、應(yīng)用廣的分離模式； 2. 毛細(xì)管凝膠電泳（ CGE) 將聚丙烯酰胺等在毛細(xì)管柱內(nèi)交聯(lián)生成凝膠。能夠有效減小組分?jǐn)U散，所得峰型尖銳，分離效率高。 特點(diǎn) ： 抗對(duì)流性好，散熱性好，分離度極高。柱便宜、易制備。 在電場(chǎng)力的作用下，膠束在柱中移動(dòng)。在其等電點(diǎn)時(shí)，呈電中性，淌度為零； 4. 聚焦：具有不同等電點(diǎn)的生物試樣在電場(chǎng)力的作用下遷移，分別到達(dá)滿足其等電點(diǎn) pH的位置時(shí)，呈電中性，停止移動(dòng)，形成窄溶質(zhì)帶而相互分離； 5. 陽(yáng)極端裝稀磷酸溶液，陰極端裝稀 NaOH溶液； 6. 加壓將毛細(xì)管內(nèi)分離后的溶液推出經(jīng)過(guò)檢測(cè)器檢測(cè)； 7. 電滲流在 CIEF中不利，應(yīng)消除或減小。 2. 負(fù)離子分析時(shí)，前導(dǎo)電解質(zhì)的淌度大于試樣中所有負(fù)離子的。陰極進(jìn)樣，陽(yáng)極檢測(cè)。假設(shè)“ 2” 號(hào)中離子擴(kuò)散到“ 3” 號(hào)，該區(qū)電場(chǎng)強(qiáng)度大，離子被加速，返回到“ 2” 區(qū)；當(dāng)“ 2” 號(hào)中離子跑到“ 1” 號(hào)區(qū)，離子被減速使之歸隊(duì)； 4. 特點(diǎn)：界面明顯，富集、濃縮作用； 6. 毛細(xì)管電色譜（ CEC） 在毛細(xì)管壁上鍵合或涂漬高效液相色譜的固定液，以電滲流為流動(dòng)相，試樣組分在兩相間的分配為分離機(jī)理的電動(dòng)色譜過(guò)程； HPCE的檢測(cè)器 檢測(cè)器 檢測(cè)限 (mol/L) 特點(diǎn) UV－可見(jiàn)吸收 10－ 4～ 10－ 5 近似通用，常規(guī)應(yīng)用 激光光熱 107～ 108 靈敏度高，受激光器波長(zhǎng)限制 熒光 非相干光誘導(dǎo) 激光誘導(dǎo) 107～ 108 1010～ 1011 靈敏度高 高靈敏度，價(jià)格昂貴 折射指數(shù) 106～ 107 通用性強(qiáng)，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，靈敏度較低 電位 電導(dǎo) 安培 105～ 107 105～ 108 108～ 1010 通用性，靈敏度高，價(jià)格適中。 質(zhì)譜 107～ 109 儀器復(fù)雜，可獲得結(jié)構(gòu)信息，質(zhì)量靈敏度高 放射 108～ 1011 靈敏度高，操作放射性物質(zhì)有特殊要求 間接法 間接 UV 間接 LIF 104～ 105 108～ 108
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