第十六章細胞因子與細胞粘附因子的測定-在線瀏覽
2025-09-18 13:26本頁面
【正文】 分析法 三、酶聯(lián)免疫斑點試驗 四、免疫學測定方法學評價第三節(jié) 細胞因子與細胞粘附分子測定的臨床應用 一、臨床應用原則 二、特定疾病診斷的輔助指標 三、評估機體的免疫狀態(tài)、判斷治療效果及預后思考題小結(jié) 是由活化的免疫細胞及某些基質(zhì)細胞表達并分泌的活性物質(zhì)，其主要生物學功能是介導和調(diào)節(jié)免疫應答及炎癥反應，其化學本質(zhì)是蛋白質(zhì)或多肽。 細胞因子細胞粘附因子 是介導細胞間及細胞與細胞外基質(zhì)間粘附作用的分子，其化學本質(zhì)為糖蛋白，可以細胞膜表面表達和可溶性兩種形式存在。 DNA擴增法216。 原位雜交法216。 一、促進細胞增殖和增殖抑制測定法216。細胞 代謝活性測定方法 3HTdR、 125IUdR摻入法或 MTT等比色法216。在細胞的增殖過程中， DNA合成的增加使得指示細胞對核苷或堿基的需求增多，若將核苷標記上可以示蹤的同位素（ 3H/125I ），通過檢測細胞內(nèi)的同位素含量，則可反映細胞增殖的程度 。因此，待測細胞因子作一系列稀釋后加至指示細胞培養(yǎng)體系，以檢測培養(yǎng)細胞的死細胞數(shù)作為判斷指標，死細胞數(shù)量與細胞因子的活性呈正比。死、活細胞情況可用同位素 51Cr釋放法判斷，或應用臺盼蘭染色死細胞后直接計數(shù)。死細胞數(shù)、 51Cr釋放量越高或比色測定的吸光值越低，表明待測細胞因子的細胞毒活性則越高。本法常用于 TNF等的測定二、細胞毒活性測定法基本原理252。L929 小鼠干擾素252。A549252。 VSV、 EMCV及 Sindbis virus等216。抑制病毒蝕斑形成或抑制病毒的產(chǎn)量三、抗病毒活性測定法常用于檢測抗病毒活性的細胞株常用于攻擊細胞的病毒檢測抗病毒活性的方法216。 用 TNFα 與 TNFβ 特異性中和抗體作阻斷試驗，以區(qū)別兩類 TNF216。 若選用 L929細胞，其不宜生長過密。 細胞被某種因素激活后，代謝增強，線粒體脫氫酶活性也增強， 著色也會加深。 MTT染色時，必須考慮待檢樣品中有無激活靶細胞的因素。細胞病變程度分為 5個等級，即： “ 0” ，表示無明顯 CPE； “ 1+” ， CPE≤25 ％； “ 2+” ， CPE為 25～ 50％； “ 3+” ， CPE為 50～ 75％； “ 4+” ， CPE為 75～ 100％。 該法操作復雜、影響因素較多，在試驗前應對所用的病毒進行滴定。 216。216。趨化因子誘導細胞移動的方式四、趨化活性測定法敏感性較高特異性不高操作繁瑣易受干擾五、生物學活性測定方法學評價第二節(jié) 免疫學測定法 細胞因子 (或受體 )與相應的特異性抗體 ( 單克隆抗體或多克隆抗體 )結(jié)合，通過同位素、熒光或酶等標記技術(shù)加以放大和顯示， 從而定性或定量顯示細胞因子 (或受體 )的水平。 ELISA法不僅可以用于細胞因子檢測，也可用于可溶性細胞因子受體或可溶性粘附因
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