生物化學(xué)技術(shù)補(bǔ)充1-吸收光譜分析法-在線瀏覽
2024-09-04 15:29本頁面
【正文】 組分 b在兩波長處的吸光系數(shù)相差愈大，則靈敏度愈高。 補(bǔ)充 1 光譜檢驗(yàn)技術(shù) 概念及分類 ?概念 利用各種化學(xué)物質(zhì)具有發(fā)射、吸收或散射光譜譜系的特征，來確定物質(zhì)性質(zhì)、結(jié)構(gòu)或含量的技術(shù) ?分類 （根據(jù)物質(zhì)對光譜響應(yīng)特征的不同，可將其分為） ?發(fā)射光譜分析技術(shù) ?吸收光譜分析技術(shù) ?散射光譜分析技術(shù) 在生化技術(shù)方面，光譜分析是一類十分重要的技術(shù)，應(yīng)用極為廣泛；它既可以研究物質(zhì)的結(jié)構(gòu)，也可以對特定物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析 一、吸收光譜分析法 ?吸收光譜 是指波長連續(xù)分布的光透過物質(zhì)時(shí)，某些波長的光被物質(zhì)吸收而產(chǎn)生暗線或暗帶組成的光譜 ?吸收光譜分析法 利用吸收光譜對物質(zhì)進(jìn)行定量的技術(shù)稱為吸收光譜分析法，是實(shí)驗(yàn)室最常用的分析技術(shù)之一 ?特點(diǎn) 它操作簡便、快速，線性范圍較寬，應(yīng)用廣泛 ?分類 目前最常應(yīng)用的技術(shù)有 可見 — 紫外分光光度法 和原子吸收分光光度法 (一 )可見 紫外分光光度法 LB爾定律 （可見 紫外光區(qū)波長為 200~760nm，其中 200~400nm為紫外光） ① 對比法 ② 標(biāo)準(zhǔn)曲線法 lCEA cm ??? %11 當(dāng)兩種或兩種以上的組分共存時(shí)，可出現(xiàn)吸收光譜重疊的情況；測定某一組分時(shí)，其他組分對它會有不同程度的干擾，此時(shí)可采用 雙波長法 排除雜質(zhì)的干擾 吸收光譜相互重疊的 a、 b兩組分。選擇各自的測得波長λ 1和 λ 2，使干擾組分在這兩個(gè)波長處的吸光系數(shù)相同，而欲測組分在兩波長處的吸光系數(shù)有顯著的區(qū)別。用雙波長法還能消除樣品溶液背景吸收的干擾和混濁的干擾，提高測定的準(zhǔn)確性。檢查方法是將波長選定在 580nm處，將狹縫開到最大 (或打開光門 )，打開鎢燈，在比色皿內(nèi)插一白紙片。校正時(shí)將這種玻璃放在比色皿座上，以空氣調(diào) 0，
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