抗體制備技術-在線瀏覽
2024-08-29 02:44本頁面
【正文】 混合物～。高度均一、特異性強、效價高、少或無交叉反應性。作為免疫原需要由細胞的破碎、提取與純化～l1）細胞的破碎（物理法、化學法）l2）提取與純化：① 超速離心分離 — 是一種根據(jù)分離物質的比重特點，通過差速或梯度密度離心，將分子大小不同的抗原顆粒分開的方法，只適宜少數(shù)大分子物質的分離。l 鹽析法沉淀抗原的機理 ③ 超濾法 — 利用孔徑大小不同的特制薄膜對不同分子大小的抗原物質進行濾篩～④ 層析法 — 包括凝膠過濾、離子交換、親和層析等，用于抗原等物質的精提～⑤ 電泳 —— （略）3）鑒定： 鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、 純度以及免疫學活性。l 蛋白的含量 — 定氮（紫外光 280nm等）l 分子的質量 — 電泳、質譜l 蛋白的純度 — 電泳、高效液相層析l 免疫學活性 — 免疫雙擴散、免疫印跡 抗原性質分析結果50 00075 000100 000 1 2 3 4 5 Westernblot鑒定三株單抗的特異性； :正常小鼠血清 ； B6與病毒上清反應； G12與病毒上清反應； 2B12與病毒上清反應。 種類 — 無機、生物性、人工合成、油劑和 納米顆粒。 測定方法有平衡透析、 ELISA、競爭（非 競爭）結合等。l 2(n[Ab’]t[Ab ]t)l t代表測定時的溫度；l n=[Ab]t/[Ab’]t；l [Ab]t表示抗原濃度較高的 Amax的一半；l [Ab’]t表示抗原濃度較低的 Amax的一半。 （五）免疫血清的保存l 4℃ 保存（ 6個月）l 低溫保存（ 70 ℃ ～ 20 ℃ ， 5年）l 真空干燥保存（ 5 ～ 10年）注意點：保存前需經(jīng)除菌 保存液含防腐劑 避免反復凍融（分裝） 二、單克隆抗體制備l 單克隆抗體（ monoclone antibody，McAb）是由抗原致敏的 B淋巴細胞和骨髓瘤
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