毛細(xì)管電泳儀應(yīng)用於中藥成分之分析定量doc-在線瀏覽
2024-08-25 05:53本頁面
【正文】 青、二氯甲烷)之廢液。 毛細(xì)管電泳的發(fā)展，在1967年Hjerten等率先提出在高電場，直徑3mm毛細(xì)管中作自由溶液的毛細(xì)管區(qū)帶電泳(Capillary zone electrophoresis)，簡稱為CZE；1984年Terabe等建立一種重要的分離模式，即以各組成分(特別是中性成分)，在毛細(xì)管內(nèi)的膠束(Micelle)及緩衝溶液之間的分配為基礎(chǔ)之膠束電動力學(xué)毛細(xì)管層析 (Micellar electrokinetic capillary chromatography)，簡稱為MECC或MEKC；1990年Honda等最早將毛細(xì)管電泳應(yīng)用於芍藥中 Paeoniflorin及Oxypaeoniflorin之定量，發(fā)現(xiàn)毛細(xì)管電泳之再現(xiàn)性佳，定量結(jié)果與HPLC相似。MEKC是毛細(xì)管電泳中應(yīng)用最廣的方法之一，既能分離中性成分，也能分離帶電成分，MEKC主要是在緩衝溶液中，加入一定濃度以上的界面活性劑，以形成膠束，其應(yīng)用範(fàn)圍包括維生素、大部分藥物及中藥成分。 毛細(xì)管電泳之分析方法，係利用不同樣品離子電荷泳動速度的差異，配合毛細(xì)管內(nèi)電解質(zhì)在外加高電場下所產(chǎn)生的電滲流，形成各種樣品離子在毛細(xì)管中淨(jìng)移動速度不同，因而達到分離效果。另外，毛細(xì)管口徑小，散熱效果佳，因此可使用高電場進行電泳，大幅縮短樣品分離時間。毛細(xì)管電泳只要針對不同的分子性質(zhì)(如分子大小、電荷數(shù)、疏水性等)改變操作模式和緩衝溶液的成分，便可分離不同的樣品。毛細(xì)管電泳與高效液相層析之比較整理如下： 毛細(xì)管電泳高效液相層析分析速度較快較慢理論板數(shù)較高較低溶媒消耗無或少多樣品量低(以nl計)高(μl計)管柱價格低高管柱清洗快、容易費時自動化高不容易二?毛細(xì)管電泳應(yīng)用 (一)麻藥材中Parishin、Parishin B及Parishin C之含量測定： 天麻，原名赤箭，別名明天麻，係蘭科(Orchidaceae)植物天麻 Gastrodia elata 的乾燥根莖。分析柱：Cosmosil 5C18AR，5μm， .150mm。移動相：A：甲醇。 時間(分)AB線性梯度條件01585152575303070403070流速：。 2. 毛細(xì)管電泳層析之條件： 毛細(xì)管電泳儀：Beckman廠牌P/ACE 5500。 檢測波長：UV 222nm。 溫度：30℃。 內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)品：Methylparaben。比較二種方法之再現(xiàn)性(如表一)，毛細(xì)管電泳無論在三次分析成分時間或含量測定之相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，其結(jié)果均在2%以下，與高效液相層析相當(dāng)。表一 天麻藥材中指標(biāo)成分分別以高效液
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