高效毛細管電泳及其在體內(nèi)藥物分析中的應(yīng)用doc-在線瀏覽
2024-08-25 22:38本頁面
【正文】 到緩沖液中，當其濃度超過臨界濃度后就形成有疏水內(nèi)核、外部帶負電的膠束。正離子的運動方向和電滲流一致，故最先流出；中性粒子的電泳流速度為“零”，故其遷移速度相當于電滲流速度；負離子的運動方向和電滲流方向相反，但因電滲流速度一般都大于電泳流速度，故在中性粒子之后流出，從而因各種粒子遷移速度不同而實現(xiàn)分離。HPCE所用的大理石英毛細管柱，在pH3情況下，其內(nèi)表面帶負電，和溶液接觸時形成了一雙電層。 CZE的基本原理HPCE選用的毛細管以高壓電場為驅(qū)動力，以毛細管為分離通道，依據(jù)樣品中各組分之間濃度和分配行為上的差異而實現(xiàn)分離的一類液相分離技術(shù)。根據(jù)其分離樣本的原理設(shè)計不同主要分為以下幾種類型：毛細管區(qū)帶電泳(CZE)；毛細管等速電泳(CITP)；毛細管膠束電動色譜(MECC)；毛細管凝膠電泳(CGE)；毛細管等電聚焦(CIEF)。1 HPCE的幾種經(jīng)典分離模式HPCE可分析的成分小至無機離子，大至生物大分子，如蛋白質(zhì)、核酸等。此技術(shù)可分析的成分小至有機離子，大至生物大分子如蛋白質(zhì)、核酸等。高效毛細管電泳及其在體內(nèi)藥物分析中的應(yīng)用摘要 本文主要綜述了高效毛細管電泳技術(shù)近年來研究進展及其在體內(nèi)藥物分析中的應(yīng)用。關(guān)鍵詞 高效毛細管電泳 體內(nèi)藥物分析 樣品濃縮技術(shù)高效毛細管電泳(high performance capillary electrophoresis，HPCE)又稱毛細管電泳，指以高壓電場為驅(qū)動力，以毛細管為分離通道，依據(jù)樣品中各組分之間遷移率和或分配行為上的差異而實現(xiàn)分離的一種液相分離技術(shù)?？捎糜诜治龆喾N體液樣本如血清或血漿、尿、腦脊液及唾液等，HPCE分析高效、快速、微量，與HPLC有并駕齊驅(qū)的趨勢?？捎糜诜治龆喾N體液樣本如血清或血漿、尿、腦脊液及唾液等，HPCE分析高效、快速、微量。目前CZE和MECC用得較多，本文以這兩種方法為例來說明HPCE的原理。在電解質(zhì)溶液中，帶電粒子在電場作用下，以不同速度向其所帶電荷相反方向遷移的現(xiàn)象叫作電泳。在高電壓作用下，雙電層中的水合陽離子引起流體整體地朝負極方向移動的現(xiàn)象叫電滲，粒子在毛細管內(nèi)電解質(zhì)中的遷移速度等于電泳和電滲流(E0F)兩種速度的矢量和。 MECC的基本原理MECC雖然膠束帶負電，但一般情況下電滲流的速度仍大于膠束的遷移速度，故膠束將以較低速度向陰極移動。MECC使HPCE能用于中性物質(zhì)的分離，拓寬了HPCE的應(yīng)用范圍，是對HPCE極大的貢獻。在用毛細管電泳做定量檢查時，所得數(shù)據(jù)的RSD值通常較大，常采用內(nèi)標法,以提高其定量精密度。 靈敏度較低。隨HPCE的不斷完善,提高靈敏度的措施也愈來愈多。 樣品的前處理是提高靈敏度的重要措施，在體內(nèi)藥物分析中,常見的樣品有血漿、血清、尿液和頭發(fā)等,為避免樣品中的蛋白質(zhì)和鹽等基質(zhì)對分析測定的干擾,常需對樣品進行預處理。對樣品的預處理要求,沒有HPLC和GC那么嚴格。沉淀法中，當待測物濃度足夠大時,可離心進樣或經(jīng)簡單離心過濾后進樣。待測物分子較小且與高濃度蛋白質(zhì)混合時,可用超濾法或排阻色譜法分離。也有將液液萃取與固相萃取相結(jié)合,在消除樣本中雜質(zhì)的同時,可以提高檢測靈敏度,如測定血清中R和S司可巴比妥[3]的含量就采用此法。 樣品濃縮技術(shù)的采用樣品濃縮技術(shù)是采用特殊的進樣過程將大體積樣品溶液中的痕量被測物濃縮后進行分離，從而提高檢測靈敏度的一種技術(shù) ,毛細管電泳中的樣品濃縮技術(shù)有柱上濃縮與柱前濃縮之分。Eap等[4]采用FASS技術(shù)對血樣中的四類抗抑郁藥物進行富集，測定了米安色(mianserin)、去米安色林、8一羥基米安色林及其對映體的血藥濃度。在水柱和背景電解質(zhì)交界處進行富集。 采用更高靈敏度的檢測器CE常用紫外可見檢測器，但是檢測光程受毛細管內(nèi)徑的限制,毛細管內(nèi)徑小于100um，檢測光程短，當采用一般通用型紫外檢測器時，靈敏度只能達到106mol/L[5]。除紫外可見檢測器外，近年來，CE采用了激光誘導熒光檢測器，它是CE中最靈敏的檢測器。最近我國開發(fā)的固液化學發(fā)光體系
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