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毛細(xì)管電泳儀應(yīng)用於中藥成分之分析定量-預(yù)覽頁

2025-08-08 05:53 上一頁面

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【正文】 藥之研發(fā)。   行政院衛(wèi)生署為了提昇中藥濃縮製劑的品質(zhì),已於八十九年七月二十四日公告,自九十年一月一日起,凡申請葛根湯等十種中藥方劑之濃縮製劑,查驗登記新案及藥品許可證有效期間展延時,應(yīng)制訂指標(biāo)成分定量方法。   毛細(xì)管電泳的發(fā)展,在1967年Hjerten等率先提出在高電場,直徑3mm毛細(xì)管中作自由溶液的毛細(xì)管區(qū)帶電泳(Capillary zone electrophoresis),簡稱為CZE;1984年Terabe等建立一種重要的分離模式,即以各組成分(特別是中性成分),在毛細(xì)管內(nèi)的膠束(Micelle)及緩衝溶液之間的分配為基礎(chǔ)之膠束電動力學(xué)毛細(xì)管層析 (Micellar electrokinetic capillary chromatography),簡稱為MECC或MEKC;1990年Honda等最早將毛細(xì)管電泳應(yīng)用於芍藥中 Paeoniflorin及Oxypaeoniflorin之定量,發(fā)現(xiàn)毛細(xì)管電泳之再現(xiàn)性佳,定量結(jié)果與HPLC相似。   毛細(xì)管電泳之分析方法,係利用不同樣品離子電荷泳動速度的差異,配合毛細(xì)管內(nèi)電解質(zhì)在外加高電場下所產(chǎn)生的電滲流,形成各種樣品離子在毛細(xì)管中淨(jìng)移動速度不同,因而達(dá)到分離效果。毛細(xì)管電泳只要針對不同的分子性質(zhì)(如分子大小、電荷數(shù)、疏水性等)改變操作模式和緩衝溶液的成分,便可分離不同的樣品。分析柱:Cosmosil 5C18AR,5μm, .150mm。 2. 毛細(xì)管電泳層析之條件: 毛細(xì)管電泳儀:Beckman廠牌P/ACE 5500。 溫度:30℃。比較二種方法之再現(xiàn)性(如表一),毛細(xì)管電泳無論在三次分析成分時間或含量測定之相對標(biāo)準(zhǔn)偏差,其結(jié)果均在2%以下,與高效液相層析相當(dāng)。 毛細(xì)管電泳相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(%,n=3)毛細(xì)管電泳與高效液相層析分析方法之條件如下: : 高效液相層析儀:與天麻相同。移動相:A:乙月青B:%醋酸溶液。毛細(xì)管:Beckman 內(nèi)徑75mm67cm uncoated capillary。 高效液相層析 緩衝液:20mM Sodium tetraborate及20mM Sodium Sodium cholate及12%甲醇之溶液。   玄參三種成分之毛細(xì)管電泳分析,緩衝液用 ,加入膽酸鈉作界面活性劑、甲醇作修飾劑,其圖譜如圖三所示,可在十九分鐘內(nèi)完成,也有很好的回收率( ~ %)及再現(xiàn)性(同日內(nèi)之相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為 ~%; ~ %),高效液相層析分析時間較長,如圖四所示,亦為毛細(xì)管電泳之二倍。由上述所舉例之二個研究觀之,毛細(xì)管電泳可用於中藥成分之分析,其回收率及再現(xiàn)性均不亞於高效液相層析,運(yùn)用毛細(xì)管電泳從事中藥成分之分析確屬可行。圖一 天麻之毛細(xì)管電泳分析圖譜。IS:內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)品(Propylparaben)
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