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辣椒紅色素的提取與分離論文-在線瀏覽

2024-08-06 04:30本頁面
  

【正文】 素在被提取前是貯存在辣椒果實的完整細胞組織中,由于受到細胞膜及細胞內(nèi)某些成分的保護并形成脂類,對光熱等具有較高的穩(wěn)定性。辣椒紅色素穩(wěn)定性是指其在各種可能的環(huán)境中是否保持原有的色澤,即是否褪色或變色。(1) 光對辣椒紅色素穩(wěn)定性的影響國內(nèi)外的各種研究表明辣椒紅色素的耐光性較差在油性介質(zhì)中避光保存的辣椒紅色素是比較穩(wěn)定的。根據(jù)張志強的實驗結(jié)果,暗室和室內(nèi)光線下,色素?zé)o褪色現(xiàn)象,且損失較小, 6天后仍有96%以上保留,在日光下不到半天的時間,色素幾乎損失殆盡,幾乎為無色,紫外光對色素有明顯的影響, 3天左右?guī)缀醵紦p失。溫度越高,辣椒紅色素損失越多。辣椒紅色素在25~80℃時穩(wěn)定性較好, 色素變化不大,當(dāng)溫度升高到80~100℃時,穩(wěn)定性下降,當(dāng)超過100℃時,色素極不穩(wěn)定,所以提取過程中應(yīng)避免長時間處于80℃以上的高溫。(4) 氧化劑對辣椒紅色素穩(wěn)定性的影響張志強等將不同濃度(、 /L )體積分數(shù)為30%的H2O2 加到已配好的色素溶液中,定容至10mL,搖勻470nm 處測定其吸光度,靜置2h后,再次測定其吸光度。因此在辣椒紅色素提取過程中要避免與氧化劑接觸。二、 實驗1. 實驗原理辣椒紅色素為脂溶性色素,選用適當(dāng)?shù)姆椒ㄌ崛『?,可采用不同的分離技術(shù)進行色素的分離。超聲提取過程產(chǎn)生強烈的振動、空化、攪拌,與傳統(tǒng)提取方式比較具有收率高、生產(chǎn)周期短、無需加熱、有效成分不被破壞等優(yōu)點。分離過程中,本實驗采用硅膠為吸附劑,石油醚/丙酮為流動相的柱層析法。一般情況下極性較大的物質(zhì)易被硅膠吸附,極性較弱的物質(zhì)不易被硅膠吸附。薄層層析又叫薄層色譜,是色譜法中的一種,是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的實驗技術(shù),是近年來發(fā)展起來的一種微量、快速而簡單的色譜法,它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點。因此又可用來精制樣品。此外,在進行化學(xué)反應(yīng)時,常利用薄層色譜觀察原料斑點的逐步消失來判斷反應(yīng)是否完成。待展開劑前沿離頂端約1cm附近時,將色譜板取出,干燥后噴以顯色劑,或在紫外燈下顯色。在瓶口蒙上膜,并在薄膜表面戳破幾個洞,是錐形瓶通過小口與外界想通,然后放入超聲波清洗器的水槽中,超聲15min。iii. 蒸發(fā)濃縮使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將濾液蒸發(fā)濃縮,回收有機溶劑;向濃縮后的圓底蒸餾瓶中滴加微量石油醚,溶解濃縮物,成待分離原液。然后在硅膠柱上方放置一個圓形小濾紙片,并將填裝好的硅膠柱固定在鐵架臺上。iii. 添加原液繼續(xù)添加待分離原液(),然后繼續(xù)添加提前配好的提取液(石油醚/丙酮=1:10)。iv. 收集分離液當(dāng)?shù)谝徊糠钟猩后w即將流出層析柱的時候,立即換用離心管收集。c) 色素分離 (薄層層析)i. 薄層板的制備(傾注法)提前一天制備。一只手握持玻璃板的一端并使板與水平面成約30176。按照相同方法制備45塊薄層板,放置于室溫晾干,然后置于烘箱內(nèi)加熱活化。ii. 層析分離用吹風(fēng)機或者用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將離心管里的提取液進行蒸發(fā)濃縮;配制不同比例的展開劑(石油醚,丙酮混合液)于層析缸中;,每個板點兩個樣,一個來自分離濃縮后所得的原液,另一個來自柱層析分離得到的提取液;將點樣后的薄層板放置在層析缸中,蓋上蓋子,色素自行展開,觀察比較不同比例展開劑的分離效果。三種比例的展開劑展開效果均比較理想,不過相比較而言,1/9展開劑展開效果比其他兩種比例的效果略差,色素未完全展開,中間色素仍有大團聚集。兩個薄層板色帶充分展開,顏色分布界限明顯,5/95上沿還展開出了四種類胡蘿卜素色帶。3. 硅膠柱層析分離辣椒色素屬分配層析法,是根據(jù)色素和辣素的結(jié)構(gòu)差異在束縛與硅膠上的固定相和洗脫液中的溶解度不同,因此在固定相和洗脫液之間的分配系數(shù)不同而達到分離效果。內(nèi)蒙古工業(yè)大學(xué)有研究,其柱層析法采用100200目硅膠為填料,石油醚與丙酮(體積比為10:1)復(fù)合液為洗脫液;%,而且色價較高為65;可以形成橙黃、紅色與淡黃色%條帶,有利于紅辣椒中有效成分的精細分離。超聲波溶劑提取法在提取過程中, 通過產(chǎn)生強烈的振動,空化, 攪拌, 從辣椒粉中提取出辣椒紅色素。5. 實驗說明: 1. 丙酮容易揮發(fā)且有毒害,實驗中注意避免吸入過多;2. 超聲提取中應(yīng)保證錐形瓶直立,切勿斜倒讓水流入;3. 加入石油醚在茄形瓶后來回震蕩,盡量溶解附著在壁上的辣椒紅素;4. 旋蒸的作用就是蒸去溶劑,比一般的方法效率高。 5. 操作旋蒸儀中注意:(1)安裝接口部分要加少量礬士林,避免抽真空的時候,接口部分漏氣真空度上不去。 (3)在茄型瓶中盛裝的樣品最多不要超過75%,否則在減壓時會出現(xiàn)倒吸。 (5)在旋蒸接近結(jié)束時,應(yīng)先打開通氣閥門,使旋蒸儀內(nèi)外氣壓一致,然后關(guān)閉旋轉(zhuǎn)開關(guān),
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