【正文】 愈合時間，減少或避免骨折遲緩愈合、不愈合及關(guān)節(jié)強(qiáng)直等并發(fā)癥,且藥源廣，價廉方便，不良反應(yīng)小，很值得推廣。機(jī)理:虎杖可增加血小板和纖維蛋白原，縮短凝血時間、凝血活酶時間從而促進(jìn)內(nèi)凝血、抗纖溶、局部止血。虎杖對急性上消化道出血具有顯著的止血作用，可能為蒽醌類衍生物與鞣質(zhì)的雙重作用[21,22]。劉統(tǒng)峰 [25]自擬參虎調(diào)肝湯合拉米呋啶治療慢性乙型肝炎70例療效觀察，結(jié)果：臨床基本治愈364例，顯效20例，好轉(zhuǎn)9例，無效5例，%。 陳曉莉 [27]等比較虎杖片與辛伐他汀治療高脂血癥的療效，將高膽固醇血癥患者120例，隨機(jī)分為兩組，分別服用虎杖片和辛伐他汀，療程均2個月，并觀察治療前后膽固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、動脈硬化指數(shù)等指標(biāo)變化?；⒄葘?fù)發(fā)性口腔潰瘍、膽石癥、慢性前列腺炎、男性不育、闌尾周圍膿腫、小兒過敏性紫癜、褥瘡及心腦血管疾病，療效顯著 [28]。應(yīng)加強(qiáng)虎杖資源調(diào)查、生物學(xué)特性、人工繁育技術(shù)、種質(zhì)的遺傳多樣性、生態(tài)因子與品質(zhì)相關(guān)性、優(yōu)良種質(zhì)的收集和篩選等方面的研究工作,為建立規(guī)范的虎杖生產(chǎn)基地,實現(xiàn)虎杖資源的可持續(xù)利用奠定基礎(chǔ)。在藥效研究方面近年有較多的實驗研究的報道,然在臨床藥理學(xué)、毒理學(xué)、藥代動力學(xué)等方面尚缺乏系統(tǒng)規(guī)范的研究。1 材 料 與 方 法1．1 材料、儀器與試劑儀器：LC3600高效液相色譜儀系統(tǒng)(北京凱奧科技發(fā)展有限公司）、UV3600紫外檢測器（北京凱奧科技發(fā)展有限公司）、超越3000色譜工作站（浙江大學(xué)智能信息研究所）)FY1215001型超臨界CO 2萃取裝置(南通市飛宇石油科技開發(fā)有限公司)TDL—5Z 高速臺式離心機(jī)(長沙星科有限公司)5FSJ114植物標(biāo)本粉碎機(jī)（牧漁業(yè)扶溝科技儀器廠）超低溫冰箱 （中科美菱）FD—1冷凍干燥機(jī)（北京德天佑科技發(fā)展有限公司）AUY220電子分析天平 (SHIMADZU CORPORAT ON JAPAN)2021A型 電熱恒溫干燥箱（上海東星建材試驗設(shè)備有限公司）HHS數(shù)顯恒溫水浴鍋（金壇市正基儀器有限公司）試劑：無水乙醇為分析純；無水甲醇為色譜純、萃取劑；ddH 2O虎杖苷對照品 (中國藥品生物制品檢定所 , 供含量測定用)實驗材料：虎杖（采于湖南省邵陽市）1．2 對照品溶液的制備,置10mL 容量瓶中, 用甲醇定容至刻度, 搖勻, 1 的對照品Ⅰ液。1．3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制用紫外分光光度計檢測不同濃度虎杖苷標(biāo)樣的OD值（檢測波長：306nm），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。1．4 超臨界二氧化碳流體萃取工藝流程將虎杖按根莖液分類曬干，粉碎，過60目篩，備用。1．5 萃取物中虎杖苷含量的測定將所得萃取液處理后冷凍干燥后，將萃取物粗品用甲醇定容于 50mL 容量瓶中，用高效液相色譜外標(biāo)法測定萃取粗品中虎杖苷含量，測定條件為：色譜柱，6YWGC18分析柱(250mm,10μm)；流動相:無水甲醇；流速:；檢測波長: 306nm；柱溫:室溫；進(jìn)樣量:20μL。1．6．2 萃取時間對虎杖苷提取率的影響稱取虎杖莖粉100g，在萃取溫度30℃、萃取壓力20Mpa、攜帶劑用量50mL，萃取時間分別為20min、40min、60min,進(jìn)行超臨界二氧化碳流體萃取，提取液用HPLC進(jìn)行測定。1．6．4 萃取壓力對虎杖苷提取率的影響稱取虎杖莖粉100g，在萃取溫度30℃、萃取時間60min、攜帶劑用量50mL，萃取分別為壓力10Mpa、12Mpa、15Mpa,進(jìn)行超臨界二氧化碳流體萃取，提取液用HPLC進(jìn)行測定。表 因素水平表Table Factors and levels因 素Factors水 平Levels A 壓力 Mpa B 溫度℃ C 時間 min D 攜帶劑（甲醇）mlPressure Temperature Time presoaker71 10 25 20 502 12 30 40 753 15 35 60 100表 　試驗方案表Table Results of orthogonal experiment 試 A 萃取壓力 B 萃取溫度 C 萃取時間 D 萃取劑 虎杖苷含量驗 MPa ℃ min ml /%、mg/g 號1 10 25 20 502 10 30 40 753 10 35 60 1004 12 25 40 1005 12 30 60 506 12 35 20 757 15 25 60 758 15 30 20 1009 15 35 40 502 結(jié) 果 與 分 析2．1 虎杖苷對照品標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制、 mg/ml、 mg/ml、 mg/ml、 mg/ml在紫外分光光度計中分別測出五種濃度標(biāo)樣的OD值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（），得回歸方程為Y=+(R 2=)。 虎杖苷標(biāo)準(zhǔn)曲線（高效液相色譜法）2．2 單因素試驗結(jié)果2．2．1 攜帶劑的用量對虎杖苷提取率的影響實驗結(jié)果表明，攜帶劑用量為75mL時，萃取率較低，攜帶劑用量為50mL，100mL時，萃取率較高； 攜帶劑用量為50mL時比較適宜。萃取時間為20 min、40min時萃取率較低，萃 取時間為60min時，萃取率較高, 萃取時間選擇60min比較適宜。2．2．4 萃取壓力對虎杖苷提取率的影響實驗結(jié)果表明，萃取壓力對萃取率有一定影響，在萃取壓力10Mpa、12Mpa、15Mpa時，萃取率較低，萃取壓力為12Mpa,萃取率較高，所以萃9取壓力選擇12Mpa比較適宜。表 紫外分光光度法測定虎杖苷的正交試驗直觀分析表 Orthogonal experiment direct analyse實驗號 萃取壓力（A)/Mpa 萃取溫度（B）/℃ 萃取時間（C)/min 萃取劑（D)/ml 虎杖苷含量 (mg/g)1 10 25 20 50 2 10 30 40 75 3 10 35 60 100 4 12 25 40 100 5 12 30 60 50 6 12 35 20 75 7 15 25 60 75 8 15 30 20 100 9 15 35 40 50 K1 K2 K3 R 各參數(shù)代表的意義：Κ n 分別表示以 n 水平試驗的提取率之均數(shù)；R 表示因素的極差，即各因數(shù)的 ΚΚ Κ 3 中最大數(shù)與最小數(shù)之差。由表 數(shù)據(jù)可知：D 因素( 萃取劑 )的 R 值最大，因素的極差越