【正文】 GMP規(guī)范要求的嚴格培訓；公司憑借強大的技術隊伍，不斷開發(fā)新產(chǎn)品，加大對動物血清進一步的深入研究，使我公司動物血清分離和提純工程技術始終走在動物血清行業(yè)前列，成為動物血清行業(yè)的風向標！我們視“質量是生命，開發(fā)是壽命，信譽是健康”的理念，努力把產(chǎn)品質量做的更好，以快捷的、完善的售后服務成為客戶的忠實地合作伙伴，實現(xiàn)與客戶在生物技術領域的共同發(fā)展。 建設內容：建立精制牛血清白蛋白生產(chǎn)線；建設2034 m2GMP標準生產(chǎn)車間（其中生產(chǎn)潔凈區(qū)域面積300 m2，實驗室100 m2。 工程方案：（1）建、構筑物的建筑特征、結構及面積方案（平面圖、規(guī)劃圖略）結構形式為：框架鋼結構層數(shù)為：1層，建設2034 m2GMP標準生產(chǎn)車間總面積為：2034 m2。高度為：，長度是90米。土建投入：470萬元，設備投入480萬元，設施投入：166萬元。 項目經(jīng)營思路： 本項目利用生物工程技術采用科學的血清采集方法，先進、穩(wěn)定的生產(chǎn)工藝，嚴格的質量檢測手段，生產(chǎn)出低內毒素、無噬菌體、無支原體及無其他病毒污染的高品質細胞培養(yǎng)用新生牛血清和在色澤、溶解度、純度、功能性等方面均較傳統(tǒng)產(chǎn)品有較大突破的牛血清白蛋白。 五、項目產(chǎn)品前景展望和項目應用的技術：（一）、項目產(chǎn)品介紹牛血清的結構　　牛血清中的簡單蛋白，是血液的主要成分（38g/100ml），分子量68kD。僅含已糖和已糖胺，%。白蛋白可與多種陽離子、陰離子和其他小分子物質結合。在動物細胞無血清培養(yǎng)中，添加白蛋白可起到生理和機械保護作用和載體作用。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應用，例如在western blot中作為Blocking agent。加入BSA后，它可能起到“保護”或“載體”作用，不少酶類添加 BSA后能使其活性大幅度提高。對多數(shù)底物DNA而言，BSA可以使酶切更完全，并可實現(xiàn)重復切割。而BSA可以結合緩沖液或底物DNA中抑制限制性內切酶活性的金屬離子和其它化學物質。（二）、牛血清在生物工程中的運用牛血清在細胞培養(yǎng)基中的主要功能牛血清是細胞培養(yǎng)中用量最大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份，具有極為重要的功能。（2）. 提供結合蛋白，能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等，能結合或調變它們所結合的物質活力。（4）.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質上所需因子來源。（6）. 提供蛋白酶抑制劑，使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活，保護細胞不受傷害。（1）. 蛋白質是牛血清中主要成份。纖維粘連素 細胞促進細胞附著；α2 巨球蛋白 抑制胰蛋白酶的作用；胎牛血清中含胎球蛋白 促細胞附著；轉鐵蛋白 能結合鐵離子，減少其毒性和被細胞利用。（3）.激素：激素對細胞的作用是多方面的。類胰島素生長因子：能與細胞表達的胰島素受體結合，從而有胰島素同樣的作用。氫化可的松：血清中含有定量的該成分，它可能兼有促細胞貼附和增殖作用，但有人證明，血清中的氫化可的松，如細胞密度高時可能有抑制細胞的作用和誘導其發(fā)生分化。與蛋白相結合狀態(tài)的微量元素對細胞培養(yǎng)有意義。脫掉氨基后，L谷氨酰胺可作為培養(yǎng)細胞的能量來源、參與蛋白質的合成和核酸代謝。L谷氨酰胺的降解導致氨的形成，而氨對于一些細胞具有毒性。一種肽酶逐漸裂解二肽，釋放L谷氨酰胺供利用。 什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅？ 酚紅在培養(yǎng)基中用作PH值的指示劑：中性時為紅色，酸性時為黃色，堿性時為紫色。為避免固醇類反應，培養(yǎng)細胞，尤其是哺乳類細胞時，用不加酚紅的培養(yǎng)基。 如何用臺盼蘭計數(shù)活細胞？ 用無血清培養(yǎng)基把細胞懸液稀釋到200～2000個/毫升，％的臺盼蘭溶液?；罴毎懦馀_盼蘭，因而染成藍色細胞是死細胞。 二價離子抑制胰蛋白酶活性嗎？使用胰蛋白酶時加入EDTA的目的是什么？ 二價離子的確抑制胰蛋白酶活性。建議胰蛋白酶處理細胞前，用EDTA清洗細胞，以消除來自培養(yǎng)基中所有的二價離子。下表列出了50mM TrisHC 溶液在4℃，25℃，37℃時，不同PH值。C 25176。C 如何從T25瓶中轉移sf9細胞？能用胰蛋白酶消化嗎？ 我們推薦使用脫落細胞的方法，此技術破壞性最小，生活力最高。作為一種選擇你也可以輕輕拍打培養(yǎng)瓶。 胰酶消化一個T25瓶的sf9細胞： 1. 去除培養(yǎng)基。 3. 加入2ml 1x胰酶EDTA（恰好覆蓋細胞表面）。在儀器下檢測看到5分鐘后它們正在向上移動。（培養(yǎng)基中的FBS終止了胰酶的活性。去除培養(yǎng)基。傳代。 在重新凍存sf9細胞前，它可以傳多少代？隨著傳代的次數(shù)的增加，它的感染能力會降低嗎？ 通常情況當細胞經(jīng)過30次傳代后，應該返回凍存。如果超過95％的細胞保持有活力和在大約30小時左右加倍，細胞仍然可以使用。 貯存在冰箱中的瓶口已開的培養(yǎng)基，在放置幾天后顏色變紫? 這主要是由于在暴露到周圍的CO2水平時，碳酸氫納導致了pH值的上升。 細胞培養(yǎng)基偶然被凍，可否繼續(xù)使用？ 如果細胞培養(yǎng)基偶然被凍，您應該熔化培養(yǎng)基并觀察是否有沉淀產(chǎn)生。 無血清培養(yǎng)與有血清培養(yǎng)使用的抗生素量一樣嗎？ 當在無血清培養(yǎng)基中添加抗生素時，降低至少在有血清培養(yǎng)基中所使用濃度的50%。在無血清培養(yǎng)條件下，抗生素不被滅活，可能對于細胞達到毒性水平。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。 為什么要在溶解的一周內使用貯存在4℃冰箱中的液體胰蛋白酶溶液? 胰蛋白酶在4℃就可能開始降解，如果在室溫下放置超過30分鐘，就會變得不穩(wěn)定。若存放于4℃時，請勿超過一個月。 如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質量受損? 將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。 血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理? 血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因，但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后，也會存在于血清中，亦是造成沉淀物的原因之一。 若欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管內，以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內一起過濾。 為什么要熱滅活血清? 加熱可以滅活補體系統(tǒng)。在免疫學研究，培養(yǎng)ES細胞、平滑肌細胞時，推薦使用熱滅活血清。經(jīng)此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進，或完全沒有任何作用，甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量，而造成細胞生長速率的降低。 若非必須，可以不需要做熱處理這一步。這應該不會影響血清的質量。 如何避免沉淀物的產(chǎn)生? 我們建議您在使用血清的時候，注意下列的操作: (1)解凍血清時，請按照所建議的逐步解凍法(20℃至4℃至室溫)，若血清解凍時改變的溫度太大(如20℃至37℃)，非常容易產(chǎn)生沉淀物。 (3)請勿將血清置于37℃太久。 (4)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。溫度過高，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多。我國在很多大學中都設立了生命科學院。比如基因工程藥物或疫苗在研究生產(chǎn)過程中很多是通過細胞培養(yǎng)來實現(xiàn)的。正在倍受重視的基因治療、體細胞治療也要經(jīng)過細胞培養(yǎng)過程才能實現(xiàn)，發(fā)酵工程和酶工程有的也與細胞培養(yǎng)密切相關。細胞培養(yǎng)的發(fā)展，培養(yǎng)基的質量又是關鍵，而培養(yǎng)基的主要成份中動物血清對細胞的生長繁殖發(fā)揮著重要甚至是難以替代的作用。保證牛血清質量也是促進生物制品質量提高的重要環(huán)節(jié)。牛血清包括胎牛血清、新生牛血清和成牛血清。并應具備適當?shù)谋O(jiān)測系統(tǒng)。、霉菌、支原體和病毒的污染，