微陣列分析導(dǎo)論ppt課件-在線瀏覽
2025-06-29 03:25本頁面
【正文】 白質(zhì)和核酸的功能，而傳統(tǒng)檢測方法一次只能檢測一個(gè)生物大分子， 生物芯片技術(shù) 提供了 高通量 檢測生物大分子的方法。 ? ①狹義：微陣列芯片，主要包括 cDNA微陣列、寡核苷酸微陣列、蛋白質(zhì)微陣列和小分子化合物微陣列等 ? ②廣義：能對生物成分或生物分子進(jìn)行快速并行處理和分析的厘米見方的固體薄型器件，主要 還 包括 微流體芯片和“芯片實(shí)驗(yàn)室”。 細(xì)胞 什么是微陣列？ 微陣列芯片 基因表達(dá)資料 mRNA 對 mRNA進(jìn)行標(biāo)記 雜交 定量 How? 靶標(biāo) 標(biāo)記探針 gene mRNA 微陣列分析 ? 微陣列分析（ microarray analysis):利用微陣列芯片通過一些實(shí)驗(yàn)步驟來研究生物、化學(xué)及物理方面的問題。芯片上每個(gè)點(diǎn)能和雜交液中的熒光標(biāo)記的特異性 cDNA雜交，使得每個(gè)點(diǎn)的熒光信號和基因表達(dá)的豐度成正相關(guān)。 ?應(yīng)用領(lǐng)域：醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)、食品 微陣列的起源 ?生物芯片是隨人類基因組計(jì)劃啟動和實(shí)施應(yīng)運(yùn)而生； ? 1991年 Fodor等人首先提出 DNA芯片的概念； ? 1991年 Affymetrix率先生產(chǎn)世界上第一塊基因芯片； ? 1995年第一塊以玻璃為載體的基因芯片在美國斯坦福大學(xué) ，由 Schena及其同事研究出來的。與基因組探針不同的是， cDNA探針不含有內(nèi)含子序列。 微陣列是如何定義的？ ? 微陣列必須符合： ①有規(guī)則的； ②顯微尺度的； ③平面的； ④特異性的 。單鏈的靶標(biāo) DNA分子和溶液中熒光素標(biāo)記的探針發(fā)生雜交結(jié)合，使得芯片上的點(diǎn)呈現(xiàn)出熒光信號，信號的強(qiáng)度和對應(yīng)的基因表達(dá)水平成正相關(guān)，熒光信號的強(qiáng)度按照彩色模式來賦予不同的顏色，基因的表達(dá)情況能夠通過檢測芯片上不同位置的熒光信號來定量。 微陣列定義 顯微尺度的點(diǎn) ?顯微尺度（ microscopic):是一個(gè)物體若沒有顯微鏡的幫助，不能清楚地被看見。 ?微陣列： ① 光引導(dǎo)原位合成的點(diǎn)： 15～ 30181。m ③ 組織芯片的點(diǎn)： 200～ 600181。玻片是微陣列中用得最為廣泛的基質(zhì)載體。 ?平坦的表面優(yōu)點(diǎn)：適合大規(guī)模自動化生產(chǎn)；為光掩膜、接觸式針點(diǎn)樣、噴墨式非接觸點(diǎn)樣和其它制備工序提供了精密的距離，確保制備微陣列的高質(zhì)量；使掃描和成像變得容易。含有短的寡聚核苷酸陣列上的靶標(biāo)和單一的探針分子雜交時(shí)常會產(chǎn)生不能分辨的多個(gè)雜交信號。陽性對照產(chǎn)生的可識別信號極大地改善了評估實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的能力，特別在實(shí)驗(yàn)對象得到陰性結(jié)果時(shí)尤顯突出。只有陽性對照中也末產(chǎn)生可識別的信號，才能對微陣列分析的
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