離體快繁與脫毒28h-在線瀏覽
2025-06-29 02:55本頁面
【正文】 ，機械組織不發(fā)達(dá)，容易發(fā)生機械損傷，對病蟲害特別敏感 。 ②無表皮毛，保水和反光能力差。 ④葉氣孔突出，張大。 （ ①無根毛 ②根與 苗 輸導(dǎo)不相連。 2. 生理功能方面 莖尖、腋芽 花藥 單細(xì)胞 原生質(zhì)體 愈傷組織 胚狀體 芽分化 完整再生植株 再生植株馴化 定植苗 組織培養(yǎng)過程中 4個階段 異養(yǎng)階段 半自養(yǎng)階段 半自養(yǎng) 自養(yǎng)階段 自養(yǎng)階段 （２）煉苗 ? 瓶煉 ? 盤煉（試管苗的出瓶移栽） ? 容器移栽 ? 大田移栽 在全自動培養(yǎng)間進(jìn)行光照培養(yǎng) 試管苗移栽于溫室 ?生根方法 試管內(nèi)生根（培養(yǎng)基） 試管外生根 影響試管內(nèi)生根的因素 ? 植物材料 ? 培養(yǎng)基 ? 植物激素 ? 營養(yǎng)元素 ? 其它物質(zhì)（核黃素、活性碳） ? 培養(yǎng)條件 ? 光照 ? pH ? 溫度 無菌 異養(yǎng) 高溫 弱光 恒溫 試管苗的生長環(huán)境 克服試管苗弱點，提高其移栽成活率的措施 （ 1） 移栽要抓三個關(guān)鍵 ①水分的平衡（不要失水過多） ②溫度和光照（不能太高） ③光和能力逐步形成或加強 （ 2）提高移栽成活率的技術(shù)措施 ①移栽前的工作 ②移栽時應(yīng)注意的問題 （ 1）培養(yǎng)瓶生壯苗 移栽前的工作 1 加入生長控制劑，如多效唑， B9， CCC，其作用是使苗粗壯，葉綠素增加。一般煉苗時間為 10— 30D。 移栽時應(yīng)注意的問題 泥炭 珍珠巖 椰糠 移栽時應(yīng)注意的問題 一般強度較高的慢射光較好 (4)注意一定光照，溫度條件 ５試管苗的鑒定 （１）形態(tài)學(xué)鑒定 （２）細(xì)胞學(xué)鑒定 五、植物組織培養(yǎng)中應(yīng)注意的問題 ? 褐變（褐化） ? 污染 ? 玻璃化 １ 褐變 （１）褐變 褐變 ：指在組織培養(yǎng)過程中，由培養(yǎng)材料向培養(yǎng)基中釋放褐色物質(zhì)，致使培養(yǎng)基逐漸變成褐色，培養(yǎng)材料也隨之慢慢變褐而死亡的現(xiàn)象。 （ 組織中的多酚氧化酶被激活，使酚類物質(zhì)被氧化生產(chǎn)生棕褐色醌類物質(zhì)而引起褐變。特別應(yīng)注意一種呈乳白色的細(xì)菌污染，這種細(xì)菌為芽孢桿菌，外被莢膜，耐高溫，一般滅菌劑難以殺死，可隨培養(yǎng)材料、用具傳播，可出現(xiàn)在培養(yǎng)基表面，也可呈滴形云霧狀存在于培養(yǎng)基內(nèi)，發(fā)現(xiàn)及時淘汰，并對用過的器具嚴(yán)格高溫滅菌。 （２）克服方法 ? 外植體滅菌不徹底 ? 培養(yǎng)基及各種器具清潔滅菌不徹底 ? 人為因素 ? 超凈工作區(qū)被污染 ? 環(huán)境不清潔 細(xì)菌污染 ? 表現(xiàn) ： 發(fā)酵狀 水漬狀 滴形云霧狀 ? 污染原因： 培養(yǎng)基滅菌不過關(guān) 接種器具污染 操作污染 交叉污染 真菌污染 ? 表現(xiàn) ： ? 灰、白、黃、綠菌絲體、孢子組成絨毛狀物有色圈 ? 污染原因 ： ? 培養(yǎng)室濕度過大 ? 瓶口積落有灰塵和孢子。 物品因素 器皿和用具 培養(yǎng)皿：洗 → 熱壓 玻璃器皿：洗 → 干熱（干熱箱）或晾干 接種用具：用 CCL4布擦 → 濕布擦 → 泡 75%~95%酒精 → 燒 培養(yǎng)基：濕熱 培養(yǎng)材料 外部細(xì)菌：用水沖洗 → 化學(xué)藥劑處理 內(nèi)部細(xì)菌 莖尖培養(yǎng) 加抗生素：青霉素、利福平 操作的空氣：洗刷地板 95%酒精擦超凈工作臺 用化學(xué)試劑薰蒸（甲醛或者甲醛： 高錳酸鉀 =10:1) 污染來源 作好接種前準(zhǔn)備 ? 接種室的滅菌 ? 超凈工作臺的滅菌 ? 接種器皿、用具的滅菌 ? 工作人員接種前應(yīng)做的準(zhǔn)備工作 ? 材料的滅菌 ? 接種室的地面，墻壁要擦洗干凈 ? 接種前一夜用甲醛熏蒸 10ml/m2 ? 接種室還可以采用紫外燈滅菌 作好接種前準(zhǔn)備 ? 開風(fēng)機前將紫外燈打開 30分鐘以上 ? 之后開風(fēng)機 15分鐘 ? 用 95%酒精洗工作臺面 作好接種前準(zhǔn)備 、用具的滅菌 ? 用具先用 95%酒精浸泡，后于酒精燈外焰灼燒 作好接種前準(zhǔn)備 ? 個人衛(wèi)生，穿工作服 ? 用 70%酒精擦手 作好接種前準(zhǔn)備 ?一個典型的材料滅菌流程 ?常用滅菌劑 ?滅菌關(guān)鍵性問題 作好接種前準(zhǔn)備 適當(dāng)?shù)拇钆? 適當(dāng)?shù)臐舛? 適當(dāng)?shù)臅r間 一個典型的滅菌流程 材料的預(yù)處理 (剪切、清洗 ) 75%酒精 (20 s) %升汞 (15 min) 無菌水沖洗 （ 6次） 瀝干 接種 注意接種操作 — 防止空氣污染 ? 防止空氣污染 ? 防止操作帶來的污染 ? 防止器皿用具污染 防止空氣污染 接種時在近火焰處打開瓶口，使瓶傾斜，以免空氣中微生物落入瓶中 正 確 錯 誤 防止操作帶來的污染 A 整個接種操作應(yīng)在近火焰處進(jìn)行，且動作要迅速 正 確 錯 誤 接種過程中盡可能達(dá)到懸空要求 防止操作帶來的污染 B 正 確 錯 誤 接種時不得用手接觸瓶蓋內(nèi)壁或瓶口 防止操作帶來的污染 C 正 確 錯 誤 瓶蓋朝上放，接種完畢后立即蓋好瓶口 防止操作帶來的污染 D 正 確
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