初級分離ppt課件-在線瀏覽
2025-06-23 12:02本頁面
【正文】 O3 Br NO3 ClO4 I CNS。 無機鹽的挑選原則： a 較高的鹽析效能； b 高溶解度 ， 能配置高離子強度的鹽溶液； c 溶解度受溫度的影響小； d 鹽溶液的密度不高 ， 便于蛋白質(zhì)沉淀和離心分離； e 不易引起蛋白質(zhì)的變性； f 價格低廉； 最常用 (NH4)2SO4 優(yōu)點：符合上述要求； 缺點：水解后溶液 pH降低 ， 在高 pH下產(chǎn)氨 ， 腐蝕性強 ， 有異味 ， 有毒 ， 終產(chǎn)物必須除盡 。 B I o s e p a r a t I o n E n g I n e e r I n g B、溫度和 pH值 T ?， ? ?； T ? ， ? ?。 B、 “ β”分級鹽析法：在一定 I下 ， 改變?nèi)芤旱?pH值及溫度達到沉淀的目的 。 B I o s e p a r a t I o n E n g I n e e r I n g 鹽析操作方式及方法 1) 操作方式 ? 固體鹽加入 ? 飽和鹽溶液加入 2) 飽和度 3) 方法 ? 分步鹽析 ? 重復鹽析 ? 反抽提法 B I o s e p a r a t I o n E n g I n e e r I n g 鹽析沉淀法的特點 1) 沉淀條件溫和，不會引起生物物質(zhì)變性失活； 2) 非蛋白的雜質(zhì)夾帶沉淀很少； 3) 適用范圍廣； 4) 鹽份含量高。 ） ? 與陽離子結(jié)合， pI升高 ? 與陰離子結(jié)合， pI降低 B I o s e p a r a t I o n E n g I n e e r I n g 等電點沉淀法中的 pH值作用于 β值而隱含在 Cohnx公式中 ， pI值通常在pH4~6范圍內(nèi)變化 ， 一般用無機酸（ 如鹽酸 、 磷酸和硫酸 ） 作沉淀劑 。 為了提高等電點法的沉淀能力 ， 常將其與鹽析法 、 有機溶劑法或其他沉淀法一起使用 。 最大缺點：無機酸會引起較大的蛋白質(zhì)不可逆變性的危險 。 B I o s e p a r a t I o n E n g I n e e r I n g 機理： A、 有機溶劑沉淀法的機理是加入溶劑后 ， 會使 水溶液的介電常數(shù)降低 ， 而使蛋白質(zhì)分子間的靜電 引力 （ 庫侖力 ） 增大 ， 導致凝集和沉淀 。 C、 丙酮 、 乙醇等不僅是蛋白質(zhì)的沉淀淀劑 ， 而且還是一種變性劑 ， 可見作用有機溶劑使蛋白質(zhì)在 沉淀 和 變性 之間既有區(qū)別又相關聯(lián) 。 有機溶劑的選擇 B I o s e p a r a t I o n E n g I n e e r I n g 影響因素及控制 A、 T：當乙醇與水混合時 ， 會放出大量的稀釋熱 ， 使溶液 T顯著升高 ， 對不耐熱的蛋白質(zhì)影響較大 。 另一方面溫度還會影響有機溶劑對蛋白質(zhì)的沉淀能力 ，一般溫度越低 ， 沉淀越完全 ， 所以在乙醇沉淀人血漿蛋白時 ， 溫度控制在 10?C下進行 。 如血纖維蛋白原的最大溶解度在乙醇濃度為 8%時達到最大 ， 而當乙醇濃度為 40%時達到最小 。 D、 [蛋白質(zhì) ]：避免使用很稀的濃度 ， 因蛋白質(zhì)在高濃度下才較穩(wěn)定 。 B I o s e p a r a t I o n E n g I n e e r I n g 熱沉淀 ? 定義： ? 利用蛋白質(zhì)間熱穩(wěn)定性差異進行的沉淀 B I o s e p a r a t I o n E n g I n e e r I n g 五、高分子聚合物沉淀法 1. 定義 — 利用一些水溶性高分子聚合物使目的物溶解度降低而析出固相物的過程 2. 沉淀機理 ? 非離子型（聚乙二醇等）：類似于有機溶劑沉淀
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