初級(jí)分離ppt課件-文庫(kù)吧資料
2025-05-12 12:02本頁(yè)面
【正文】 pH接近 PI時(shí)， ?最小， S最小 B I o s e p a r a t I o n E n g I n e e r I n g 方法 : A、 “ Ks”分級(jí)鹽析法：在一定 pH值及溫度下 ， 改變鹽濃度 （ 即I） 達(dá)到沉淀的目的 。 次常用 Na2SO4 缺點(diǎn)：在 400C以下溶解度較低 ， 主要用于熱穩(wěn)定蛋白 。 對(duì)陽(yáng)離子排序?yàn)椋? Th4+ Al3+ H+ Ba2+ Sr2+ Ca2+ Cs+ Rb+ NH4+ K+ Na+ Li+ B I o s e p a r a t I o n E n g I n e e r I n g 結(jié)論： a 不同種類的鹽主要影響 Ks； b 離子半徑小 ， 帶電多 ， 電荷密度高 ， 鹽析效果好 。 I 其中： S： 蛋白質(zhì)溶解度， g/L β: 常數(shù)；與蛋白質(zhì)、溫度、 pH 有關(guān)，與鹽析劑種類無關(guān) Ks: 鹽析常數(shù)； 與蛋白質(zhì)、鹽析劑種類有關(guān)，與溫度、 pH 無關(guān) I: 離子強(qiáng)度， mol/L B I o s e p a r a t I o n E n g I n e e r I n g 2) 影響因素 ? 無機(jī)鹽種類 ? 濃度 ? 溫度 ? pH B I o s e p a r a t I o n E n g I n e e r I n g A、 無機(jī)鹽種類 感膠離子序 (Hofmeister序列 ): In 1888，Hofmeister對(duì)一系列鹽沉淀蛋白質(zhì)的能力進(jìn)行了測(cè)定研究 。 B I o s e p a r a t I o n E n g I n e e r I n g 優(yōu)點(diǎn) ? 設(shè)備簡(jiǎn)單 、 成本低 、 放大容易 ， 產(chǎn)物濃度越高沉淀越有利 ，收率越高； ? 原料液體積很快地減小 10~50倍 ， 從而簡(jiǎn)化生產(chǎn)工藝 、 降低生產(chǎn)費(fèi)用； ? 使中間產(chǎn)物保持在一個(gè)中性溫和的環(huán)境； ? 及早地將目標(biāo)蛋白質(zhì) .從其蛋白質(zhì) .水解酶分離出來 ， 避免蛋白質(zhì)降解 ， 提高產(chǎn)物穩(wěn)定性； ? 用沉淀法作為蛋白質(zhì)色譜分離前處理 ， 可使使用色譜分離的限制因素降低到最少 。 ? 與結(jié)晶聯(lián)系 在本質(zhì)上都是新相析出的過程，主要是物理變化，當(dāng)然也存在化學(xué)反應(yīng)的沉淀或結(jié)晶。 B I o s e p a r a t I o n E n g I n e e r I n g 1 沉淀分級(jí) ? 定義： 物理 環(huán)境的變化引起的溶質(zhì)的溶解度降低、生成固體凝聚物的現(xiàn)象 ? 常用加入試劑的方法，改變 溶劑 和 溶質(zhì) 的能量平衡來降低其溶解度，使產(chǎn)物離開溶液生成不溶性顆粒，沉降析出。 第三章 初 級(jí) 分 離 B I o s e p a r a t I o n E n g I n e e r I n g 思考題 1. 常用的沉淀法有哪幾種 ？ 簡(jiǎn)述各自的沉淀機(jī)理 。 2. 生產(chǎn)中常用的鹽析劑有哪些 ？ 其選擇依據(jù)是什么 ？ 3. 何謂分步鹽析沉淀 ？ 4. 有機(jī)沉淀法與鹽析沉淀法相比有何優(yōu)缺點(diǎn)？ B I o s e p a r a t I o n E n g I n e e r I n g 初級(jí)分離 ? 定義： 從 菌體發(fā)酵液 、 細(xì)胞培養(yǎng)液 、 胞內(nèi)抽提液（細(xì)胞破碎液）及其他各種 生物原料 初步提取目標(biāo)產(chǎn)物，使目標(biāo)產(chǎn)物得到濃縮和初步分離的下游加工過程 ? 特點(diǎn)： 體積大、雜質(zhì)含量高，濃縮倍數(shù)高、操作簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)、純化倍數(shù)低等 ? 技術(shù)： 沉降、過濾、膜分離、萃取、吸附、沉淀分級(jí)、泡沫分離 B I o s e p a r a t I o n E n g I n e e r I n g 本 章
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