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2025-05-03 12:02 本頁面
【正文】 B I o s e p a r a t I o n E n g I n e e r I n g 第二節(jié)泡沫分離 ? 原理：根據(jù)表面吸附原理利用通風(fēng)鼔泡在液相中形成氣泡為載體對液相中的溶質(zhì)或顆粒進行分離，又稱為泡沫吸附分離。 F、 聚集體的陳化 ， 在陳化過程中 ， 絮體聚得大小和阻力平衡 。 異向聚集：由 Brownian運動所造成的碰撞導(dǎo)致 。 B I o s e p a r a t I o n E n g I n e e r I n g 9. 沉淀動力學(xué) 溶解度是一個平衡特性 ， 但是溶解度值的降低是一個動力學(xué)過程 。 計算公式： 式中 ， S溶解度； cPEG濃度； β常數(shù) ， 受溶液條件的影響 (如 pH值和離子強度 )； K常數(shù) ， 由蛋白質(zhì)大小和 PEG的類型決定 。 D、 [蛋白質(zhì) ]：避免使用很稀的濃度 ， 因蛋白質(zhì)在高濃度下才較穩(wěn)定 。 另一方面溫度還會影響有機溶劑對蛋白質(zhì)的沉淀能力 ，一般溫度越低 ， 沉淀越完全 ， 所以在乙醇沉淀人血漿蛋白時 ， 溫度控制在 10?C下進行 。 C、 丙酮 、 乙醇等不僅是蛋白質(zhì)的沉淀淀劑 ， 而且還是一種變性劑 ， 可見作用有機溶劑使蛋白質(zhì)在 沉淀 和 變性 之間既有區(qū)別又相關(guān)聯(lián) 。 最大缺點：無機酸會引起較大的蛋白質(zhì)不可逆變性的危險 。 ） ? 與陽離子結(jié)合， pI升高 ? 與陰離子結(jié)合， pI降低 B I o s e p a r a t I o n E n g I n e e r I n g 等電點沉淀法中的 pH值作用于 β值而隱含在 Cohnx公式中 ， pI值通常在pH4~6范圍內(nèi)變化 ， 一般用無機酸（ 如鹽酸 、 磷酸和硫酸 ） 作沉淀劑 。 B、 “ β”分級鹽析法：在一定 I下 ， 改變?nèi)芤旱?pH值及溫度達到沉淀的目的 。 無機鹽的挑選原則： a 較高的鹽析效能； b 高溶解度 ， 能配置高離子強度的鹽溶液； c 溶解度受溫度的影響??； d 鹽溶液的密度不高 ， 便于蛋白質(zhì)沉淀和離心分離； e 不易引起蛋白質(zhì)的變性； f 價格低廉； 最常用 (NH4)2SO4 優(yōu)點：符合上述要求； 缺點：水解后溶液 pH降低 ， 在高 pH下產(chǎn)氨 ， 腐蝕性強 ， 有異味 ， 有毒 ， 終產(chǎn)物必須除盡 。 缺點： ? 沉淀物可聚集有多種物質(zhì) ， 如大量鹽類和溶劑 ， 所以沉淀法所產(chǎn)品純度通常都比結(jié)晶法低； ? 過濾較困難 B I o s e p a r a t I o n E n g I n e e r I n g 蛋白質(zhì)溶解： 相似者相溶 親水性和疏水性： 蛋白質(zhì)表面特性 B I o s e p a r a t I o n E n g I n e e r I n g 1) 水化層 (hydration shell) tight hydration shell( water/1g 蛋白質(zhì) ) loose hydration shell(2g water /1g 蛋白質(zhì) ) 2) 靜電排斥 ? zeta電勢 Nernst Potential— 膠核表面電位 (不可測 ) Stern Potential— (不可測 ) ? Potential— 滑面電位 (可測 ,mobility) ?電位 Nernst電位 ionic strength 3) |pH水 – pI| Value |pH水 – pI| Value? zeta電勢 ? 水化層 ? 靜電排斥 ? Tight hydration shell
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