初級(jí)分離ppt課件-展示頁
2025-05-15 12:02本頁面
【正文】 重 點(diǎn) 1）蛋白質(zhì)沉淀分級(jí)原理，沉淀方法分類，影響溶液穩(wěn)定性有哪些因素？ 2）鹽析概論及影響鹽析效果主要有哪些因素？ 3）有機(jī)溶劑沉淀機(jī)理及影響因素。沉淀具有 濃縮 與 分離 的雙重作用。 ? 區(qū)別 結(jié)晶為同類分子或離子以有 規(guī)則排列形式 析出，沉淀為同類分子或離子以 無規(guī)排列形式 析出。 缺點(diǎn)： ? 沉淀物可聚集有多種物質(zhì) ， 如大量鹽類和溶劑 ， 所以沉淀法所產(chǎn)品純度通常都比結(jié)晶法低； ? 過濾較困難 B I o s e p a r a t I o n E n g I n e e r I n g 蛋白質(zhì)溶解： 相似者相溶 親水性和疏水性： 蛋白質(zhì)表面特性 B I o s e p a r a t I o n E n g I n e e r I n g 1) 水化層 (hydration shell) tight hydration shell( water/1g 蛋白質(zhì) ) loose hydration shell(2g water /1g 蛋白質(zhì) ) 2) 靜電排斥 ? zeta電勢(shì) Nernst Potential— 膠核表面電位 (不可測(cè) ) Stern Potential— (不可測(cè) ) ? Potential— 滑面電位 (可測(cè) ,mobility) ?電位 Nernst電位 ionic strength 3) |pH水 – pI| Value |pH水 – pI| Value? zeta電勢(shì) ? 水化層 ? 靜電排斥 ? Tight hydration shell 蛋白質(zhì) tein core Loose hydration shell 蛋白質(zhì)溶液的穩(wěn)定因素 B I o s e p a r a t I o n E n g I n e e r I n g 蛋白質(zhì)沉淀方法 1）原理 ? 降低水化層厚度 ? 降低雙電層厚度（ ζ電位） 2）關(guān)聯(lián)因素 電解質(zhì)種類、濃度、 pH等 eg: |pH水 – pI| Value |pH水 – pI| Value? zeta電勢(shì) ? 水化層 ? 靜電排斥 ? B I o s e p a r a t I o n E n g I n e e r I n g 3） 分類 ? 鹽析法 ? 等電點(diǎn)沉淀 ? 有機(jī)溶劑沉淀法 ? 熱沉淀 ? 非離子聚合物沉淀法 ? 聚電解質(zhì)沉淀法 ? 金屬離子沉淀法 B I o s e p a r a t I o n E n g I n e e r I n g 鹽析沉淀 定義 —— 在高濃度中性鹽存在下 ， 使目標(biāo)產(chǎn)物的溶解度降低而產(chǎn)生沉淀的過程 蛋白質(zhì)生理離子強(qiáng)度范圍： ～ B I o s e p a r a t I o n E n g I n e e r I n g 1）機(jī)理： A、減弱靜電斥力（ ?zeta potential）； B、去水化膜 （ ?hydration shell） B I o s e p a r a t I o n E n g I n e e r I n g 鹽析沉淀平衡式： log S = β— Ks 陰離子排序?yàn)椋簷幟仕岣?3 酒石酸根 3 F IO3 H2PO4 SO4 CH3COO Cl Cl
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