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沉淀反應ppt課件(2)-在線瀏覽

2025-06-18 05:36本頁面
  

【正文】 疫電泳 四、免疫固定電泳 思考題 小結(jié) 第一節(jié) 沉淀反應原理及特點 沉淀反應 ( precipitation) 是指可溶性抗原與相應抗體在適當條件下發(fā)生特異性結(jié)合而出現(xiàn)的沉淀現(xiàn)象 ,其特性與經(jīng)典的抗原抗體反應相同。 形成肉眼可見的大的免疫復合物。免疫比濁法中的速率法就是利用此階段測定免疫復合物形成的速率。 ?方法受抗原抗體比例的影響非常明顯 ?應用于測定抗原抗體反應的最適比例 (三種類型 ) 一、 絮狀沉淀試驗 抗原稀釋法:抗原最適比例 抗體稀釋法:抗體最適比例 方陣滴定法:抗原抗體最適比例 絮狀沉淀試驗 表 61 最適比方陣測定法 抗體 稀釋度 抗原稀釋度 1/10 1/20 1/40 1/80 1/160 1/320 1/640 對照 1/5 + + + + + + + + + + + + 177。 + + + + + + + + + — 1/80 — — — — + + + — 當 可溶性抗原 與相應抗體特異結(jié)合,二者比例合適時,在特殊的緩沖液中它們快速形成一定大小的抗原抗體復合物,使反應液體出現(xiàn)濁度。 原 理 二、免疫濁度測定 :反應體系中保持抗體過量 :特異性強,效價高,親和力 強并使用 R型抗體 PH為 ~ 影響因素 免疫濁度測定 分類 免疫濁度測定 第三節(jié) 凝膠內(nèi)沉淀試驗 可溶性抗原和相應抗體在凝膠中擴散,形成濃度梯度,在抗原抗體相遇并且濃度比例適當?shù)奈恢眯纬扇庋劭梢姷某恋砭€或沉淀環(huán)。 原 理 原理:抗體與待測的抗原 ,在兩者比例合適的部位結(jié)合形成沉淀環(huán)。 技術要點:將抗體混入 %瓊 脂糖內(nèi)( 50℃ ),未凝固前傾 注成平板,凝固后打孔(直徑 3~ 5mm ),孔中加入抗原溶 液和不同濃度的標準品,置濕 盒內(nèi) 37℃,24 ~ 48h 觀察孔周 圍是否出現(xiàn)沉淀環(huán)。 技術要點:平板玻璃上傾注一層均勻的瓊脂糖薄層,凝固后打孔,孔
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